曹君
- 作品数：6 被引量：35H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 内皮祖细胞移植在慢性阻塞性肺疾病小鼠体内分布被引量：2
- 2010年
- 目的:观察经气管移植内皮祖细胞(EPCs)在烟雾暴露所致慢性阻塞性肺疾病模型小鼠中的分布及分化。方法:体外分离小鼠骨髓单个核细胞于EGM-2MV培养基中培养并鉴定。24只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、COPD+PBS干预组及COPD+EPCs干预组;香烟烟雾暴露90d建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠模型;烟雾暴露结束后,COPD+PBS干预组及COPD+EPCs干预组分别经气管注入30μLPBS和30μL细胞悬液(含1×105个CM-DiI标记EPCs)。移植后观察30d处死小鼠,通过荧光显微镜观察移植细胞在肺内的分布及通过免疫荧光检测广谱细胞角蛋白的表达水平。结果:EPCs移植后30d可见EPCs分布于肺血管及气道,部分细胞表达上皮特异标志广谱细胞角蛋白。结论:EPCs移植后可定植COPD模型小鼠肺血管及气道,且可能转化为支气管及肺泡上皮细胞。
- 曹君陈平杨悦彭红刘绍坤
- 关键词：内皮祖细胞慢性阻塞性肺疾病支气管上皮细胞肺泡上皮细胞
- 内皮祖细胞对烟雾暴露所致COPD小鼠的保护作用
- 为探讨内皮祖细胞(EPC)对烟雾暴露所致COPD小鼠肺功能、肺病理、肺内细胞凋亡、抗氧化能力及基质金属蛋白酶(MMPs)的影响，采用密度梯度离心法分离4～6周雄性C57BIJ6J小鼠骨髓单个核细胞于EGM．2MV中诱导培...
- 曹君陈平杨悦彭红陈燕
- 关键词：内皮祖细胞COPD肺功能
- 两种分离培养小鼠骨髓来源内皮祖细胞方法的比较
- 2010年
- 目的比较密度梯度离心法及全骨髓培养法分离培养内皮祖细胞的差异。方法取4周雄性近交系C57BL/6J小鼠骨髓,分别使用密度梯度离心法及全骨髓培养法培养,观察细胞贴壁情况和细胞形态,并行DiI-acLDL及FITC-UEA-I双染、vWF、eNOS及细胞表面标志检测。结果密度梯度离心法培养细胞可形成典型铺路石样改变及形成血管样结构;而全骨髓培养法贴壁细胞形态多样,较多呈长梭形铺展生长,部分细胞呈类圆形及纺锤形。比较两种方法培养细胞摄取DiI-acLDL、结合FITC-UEA-I双阳性率以及vWF、eNOS及细胞表面标志表达阳性率,差别均有统计学意义(P<0.05)。应用密度梯度离心法,随着培养时间延长,表达CD34、CD133及FLk-1细胞逐渐增多(P<0.05)。结论密度梯度离心法及全骨髓培养法在EGM-2MV培养体系下均可培养出内皮祖细胞,但密度梯度离心法较全骨髓培养法培养的内皮祖细胞纯度高。
- 曹君陈平杨悦彭红陈燕刘绍坤
- 关键词：小鼠骨髓单核细胞内皮祖细胞密度梯度离心
- 烟雾暴露所致肺气肿小鼠模型的建立与评价被引量：24
- 2010年
- 目的探讨单纯烟雾暴露所致肺气肿小鼠模型建立及病理学、气道炎症及肺功能评价,并进行支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage,BAL)技术的改进。方法 20只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照及烟雾暴露组,烟雾暴露90d并观察30d后行小鼠肺功能检查、应用改进方法留取BALF行细胞计数及行肺组织病理切片观察,并与正常对照组进行比较。结果烟雾暴露组小鼠气道阻力(Raw)较正常对照组增高,动态肺顺应性(Cdyn)降低;BALF中细胞总数高于正常对照组,巨噬细胞数(AM)、中性粒细胞数(N)、中性粒细胞所占比例(N%)也高于对照组,差异均有统计学意义;病理学观察示烟雾暴露组肺泡腔扩大、部分肺泡间隔断裂、肺泡腔融合、肺气肿形成,气道上皮排列紊乱、部分气道上皮增生、周围炎症细胞浸润并伴有平滑肌增生;形态学计量分析示烟雾暴露组平均内衬间隔(MLI)及肺泡破坏指数(DI)较正常对照组增加。应用改进技术行BAL成功率100%,回收率高达90%。结论单纯烟雾暴露可以成功建立小鼠肺气肿模型且稳定可靠,与人类慢性阻塞性肺病相似性好,经BAL技术改进后该模型可行性高。
- 曹君陈平杨悦欧阳若芸彭红
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病肺气肿动物模型支气管肺泡灌洗
- 细辛脑注射液治疗重度支气管哮喘42例临床观察被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨细辛脑注射液治疗重度支气管哮喘的临床疗效。方法:将78例重度支气管哮喘患者随机分为两组,对照组36例予氧疗、抗感染、口服茶碱缓释片、静脉滴注氨茶碱、地塞米松等治疗;治疗组42例在上述治疗的基础上加用静脉滴注细辛脑治疗。结果:总有效率治疗组为92.9%,对照组为75.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在常规治疗的基础上合用细辛脑注射液可以明显提高重度支气管哮喘的疗效。
- 刘绍坤向旭东陈平杨沫毅曹君
- 关键词：细辛脑注射液重度支气管哮喘
- 小鼠内皮祖细胞的培养和移植被引量：6
- 2009年
- 背景:内皮祖细胞移植在缺血性心脑血管疾病、创伤愈合等血管类疾病的治疗中展现出广泛的应用前景,目前内皮祖细胞在肺部疾病的研究还比较少。目的:分离和诱导培养骨髓来源的内皮祖细胞,并进行鉴定;经气管移植,观察内皮祖细胞的定位。设计、时间及地点:细胞体外培养和体内移植实验,于2008-05/2009-04在中南大学湘雅二医院中心实验室完成。材料:6周龄C57BL/6J小鼠17只,随机数字表法分为5只供体,10只受体,2只供细胞双荧光染色、免疫细胞化学实验。方法:冲洗小鼠长骨骨髓,用密度梯度离心法收集单个核细胞层,内皮细胞培养液EGM-2MV培养,观察细胞形态,将培养第7天内皮祖细胞与DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白37℃孵育4h,以检测内皮祖细胞对DiI-乙酰化低密度脂蛋白的摄取,再用20g/L多聚甲醛固定细胞10min,固定后用PBS浸洗,将FITC标记的凝集素Ⅰ加入上述标本,37℃孵育1h,PBS浸洗,通过激光共聚焦显微镜鉴定FITC-凝集素Ⅰ和DiI-乙酰化低密度脂蛋白。主要观察指标:将标记CM-DiI的内皮祖细胞经气管注入小鼠体内,10d后观察其在体内的定位。免疫组织化学方法检测细胞血管性血友病因子阳性率。移植后内皮祖细胞在体内的定位。结果:贴壁细胞呈现类圆形、纺锤形或多边形,7～14d可见部分贴壁细胞生长呈"铺路石"样外观。胞浆摄取DiI-乙酰化低密度脂蛋白,显示红色,胞膜结合FITC-凝集素Ⅰ,显示绿色,双染色阳性细胞为黄色,为正在分化的内皮祖细胞,双阳性细胞达90%以上,血管性血友病因子阳性率90%以上。经气管移植后标记CM-DiI的内皮祖细胞可定位至肺内气管、血管及肾、脾血管。结论:用密度梯度离心法在EGM-2MV培养体系下可以获得较高纯度的内皮祖细胞,该细胞气管移植后可定位至肺内气管、血管及肾、脾血管。
- 杨悦曹君陈平
- 关键词：内皮祖细胞小鼠骨髓
