目的:了解在高原缺血预处理(IPC)对肝脏缺血/再灌注损伤(I/R)早期保护作用及其机制.方法:SD大鼠45只随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组.各组恢复血流后分别于1,3,6h取血液标本,检测血清ALT(nkat/L)、丙二醛(MDA,mmol/L)、NO(μmol/L)的含量.结果:缺血预处理组NO的水平明显高于缺血再灌注组(1h:95.8±10.1 vs 64.2±6.8,P<0.01;3h:91.2±9.7 vs 69.5±7.2,P<0.01;6h:77.4±8.6 vs 63.7±6.1,P<0.01),低于假手术组;而ALT(1h:2257.1±201.7 vs 2912.2±398.4,P<0.01;3h:2465.5±243.4 vs 3637.4±441.8,P<0.01;2545.5±223.4 vs 4027.5±496.8,P<0.01)、MDA(1h:25.1±4.3 vs 38.7±7.6,P<0.01;3h:27.5±5.4 vs 45.3±8.8,P<0.01;34.2±6.7 vs 53.2±10.5,P<0.01)明显低于缺血再灌注组,高于假手术组.结论:在高原缺氧环境下,缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有明显保护作用,其机制可能与缺血与预处理抑制肝脏脂质过氧化物的产生,提高内源性NO的产生,改善肝脏的微循环有关.
目的:通过对不同冻存液冻存人胎肝细胞进行比较,探索一种效果较好的冻存液以改善冻存肝细胞质量。方法:实验于2004-08/11在南方医科大学珠江医院中心实验室完成。采用二步灌注法分离人胎肝细胞,将分离后的胎肝细胞分别以3组不同冻存液(H AM F-12,RPM I-1640,DM EM)在液氮中冷冻保存4周。4周后快速复苏胎肝细胞,进行存活率、形态学及尿素、白蛋白、谷草转氨酶分泌量检测。结果:①HAM F-12组生存率为(86.0±2.4)%,明显优于RPM I-1640组(81.9±6.5)%和DM EM组(82.1±4.6)%。②H AM F-12组肝细胞极性恢复快,肝细胞生长旺盛,细胞膜完整,胞浆内有丰富颗粒,核仁清楚,少数细胞内出现空泡,与对照组肝细胞形态相似。③用H AM F-12组液冻存人胎肝细胞复苏后,尿素、白蛋白、谷草转氨酶分泌量优于RPM I-1640组和DM EM组。结论:①在其他冻存条件相同下,HAM F-12冻存液显著提高了人胎肝细胞冻存质量,优于RPM I-1640液、DM EM液。②复苏后H AM F-12组肝细胞形态学光镜下观察与刚分离的肝细胞无明显差异,进行原代培养后肝细胞极性恢复较好。
