李俏俏
- 作品数：14 被引量：82H指数：6
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- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 破骨细胞参与时IGF-1对成骨细胞的促同化作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨IGF-1对成骨细胞(osteoblast,OB)的促同化作用是否需要破骨细胞(Osteoclast,OC)的协同。方法体外培养MC3T3小鼠成骨细胞及RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,RAW264.7细胞经核因子κB受体活化因子配基(Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)诱导分化为破骨细胞。以50 ng/ml重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)分别干预成骨细胞及分化成熟的破骨细胞,Wstern blotting验证IGF-1受体的活化。以0、10、50、100 ng/ml的rhIGF-1分别干预成骨细胞、破骨细胞及共培养的成、破骨细胞。12 h后终止培养,收集破骨细胞经IGF-1干预后的条件培养基(OC conditioned medium after IGF-1 treatment,OCCM)对另一组新接种的成骨细胞干预12 h。ELISA检测3组成骨细胞培基中骨钙素(bone Gla protein,BGP)、RANKL的含量,Real-time PCR检测成骨细胞中Bgp基因的表达。结果 RANKL诱导培养8 d后RAW264.7细胞形成TRAP阳性,成熟的多核破骨细胞;Wstern blotting检测表明rhIGF-1可有效得使成、破骨细胞中的IGF-1受体发生磷酸化;ELISA与Real-time PCR测定结果显示,IGF-1直接干预OB时,Bgp基因表达水平和培养基中BGP及RANKL蛋白的含量均与无干预的对照组无明显区别;而OCCM干预及共培养的OB组,当IGF-1初始干预浓度为10 ng/ml时BGP、RANKL含量及Bgp基因的表达水平显著提高,共培养组与OCCM培养组间无明显区别。结论 IGF-1对OB的促同化作用依赖于OC的参与,两种细胞间的联系可能是通过可溶性的细胞因子来完成。
- 赵荣兰彭效祥李俏俏窦烨孙蓓
- 关键词：RANKL破骨细胞成骨细胞IGF-1
- 凝胶层析分离蛋白质实验方法的优化被引量：2
- 2010年
- 目的建立一种简单,操作方便,实验结果可靠且重复性好的生化实验。方法用G75凝胶,柱高20cm,内径1~1.5 cm,分离两组样品：血红蛋白与溴酚蓝;牛血清蛋白与酪氨酸,点样,洗脱并收集。540 nm和280nm检测样品的吸光值,绘制洗脱曲线。结果在层析柱上出现明显移动速度不同的色带,洗脱曲线显示每组样品可呈现两个洗脱峰。结论本实验改变了以往的复杂处理操作程序,适用于本科生和研究生进行科研训练的实验方法。
- 薛金艳李俏俏王云飞王爱民
- 关键词：凝胶层析洗脱分光光度法
- 唾液淀粉酶活性与肥胖关系初探被引量：3
- 2017年
- 根据BMI指数,以不同指数范围人体的唾液淀粉酶为材料,采用碘-淀粉比色法测定唾液淀粉酶活性,研究其活性与肥胖的关系.结果表明:BMI指数较低(偏瘦)的人体的唾液淀粉酶活性平均值最高,BMI指数较高(肥胖)的人体的唾液淀粉酶活性平均值最低,BMI指数标准(正常)的人体的唾液淀粉酶活性平均值低于肥胖人体的唾液淀粉酶活性平均值.研究结果说明唾液淀粉酶活性与肥胖之间存在一定的反比关系.
- 王云飞钱品品王勇帅窦烨李俏俏
- 关键词：唾液淀粉酶活性淀粉碘-淀粉比色法肥胖
- 金属硫蛋白2A基因沉默对乳腺癌细胞Cpy6B2表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨金属硫蛋白2A(MT2A)基因沉默对乳腺癌细胞呼吸链中细胞色素C氧化酶6B2亚基(Cpy6B2)表达的影响。方法乳腺癌野生细胞株MCF-7(以下简称MCF-7)分为空白对照组和MT2A干扰组,每组各12复孔。空白对照组不转染任何遗传物质,MT2A干扰组转染shRNA-MT2A载体,采用半定量PCR法检测两组MT2A mRNA的表达水平,MT2A干扰组成功获得MT2A基因沉默,采用实时定量PCR法分析两组Cpy6B2的表达水平。结果 MT2A干扰组中Cpy6B2的表达水平升高,与空白对照组相比,P<0.05。结论 MT2A基因可抑制人乳腺癌细胞Cpy6B2的表达。
- 魏西军王清路李俏俏江小华
- 关键词：金属硫蛋白乳腺癌细胞
- 禽流感病毒的分子生物学研究进展被引量：10
- 2009年
- 禽流感(AI)是由A型禽流感病毒(AIV)引起的禽类烈性传染病。它不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且对人类健康和生命安全构成了严重威胁。因此,禽流感已经成为人们关注的焦点。从病原基因组及其编码的蛋白质、致病力、变异性以及对AIV的分子诊断等角度就AIV的分子生物学研究进行综述,为防治AI提供理论基础。
- 薛金艳王清路窦烨李俏俏
- 关键词：禽流感病毒基因组分子诊断
- 生物质谱在蛋白质组学中的应用被引量：1
- 2007年
- 以基体辅助激光解析电离飞行时间质谱和电喷雾电离质谱为代表的现代生物质谱技术,为蛋白质组的研究提供了必要的技术手段,被称为蛋白质组研究的三大关键性支撑技术之一。而质谱-质谱联用、质谱与其它技术联用以及高产出筛选技术的应用和发展,将使蛋白质组的研究在高准确度、高灵敏度以及大规模化水平的发展成为可能。
- 李俏俏王清路
- 关键词：蛋白质组学
- 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2010年
- 采用加长引物5'端的方法克隆了hGM-CSF的编码基因,克隆过程中对该基因的局部做了密码子优化。然后克隆进毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电击转化毕赤酵母。PCR、SDS-PAGE与Western blotting证实hGM-CSF已整合进酵母基因组,摇瓶水平粗蛋白表达量达389mg/L,动物实验证实蛋白产物活性正常,SDS-PAGE与N-糖苷酶F去糖基化分析发现hGM-CSF被糖基化。
- 李俏俏王清路张玉军张锐徐寿增
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子毕赤酵母糖基化
- 透明颤菌血红蛋白基因(vgb)与monellin基因在毕赤酵母中的联合表达被引量：1
- 2008年
- 根据酵母偏爱密码子合成了monellin甜蛋白基因和vgb基因,然后构建了2种不同方式表达的载体,胞内表达的pPIC3.5KV和分泌表达的pPIC9KM。电击转化得到重组子GS115/pPIC9KM和GS115/pPIC9KM/pPIC3.5KV,通过PCR、SDS-PAGE及western blotting检测发现monellin甜蛋白基因和vgb基因成功整合进毕赤酵母基因组并成功表达,通过品尝和CO-差示光谱法证实其表达产物具有活性,用southern blotting对6株高产菌株进行拷贝数分析并未发现拷贝数与分泌蛋白产量之间存在明显的正相关。对比发现,含vgb基因菌株比未含菌株高甜度monellin的产量最高提高了20%,菌体密度平均提高了9%。
- 王清路张玉军窦烨李俏俏周彩霞
- 关键词：透明颤菌血红蛋白基因甜蛋白基因毕赤酵母拷贝数外源基因
- 巴斯德毕赤酵母表达系统的特点及应用被引量：22
- 2006年
- 本文介绍了来源于野生型石油酵母Y11430的巴斯德毕赤酵母的3种宿主菌的不同之处,并介绍了其甲醇诱导型基因AOX,同时说明了酵母菌体内微体对合成蛋白质的作用。从启动子类型、启动强弱、终止子及信号肽等方面对整合型载体做了详细的介绍。在外源蛋白表达方面,简要介绍了表达过程,重点讨论了如何防止外源蛋白降解,对影响毕赤酵母高效表达的因素做了扼要论述并提出了相应的解决方案。
- 王清路李俏俏薛金艳窦烨王红艳张玉军张杰
- 关键词：巴斯德毕赤酵母表达蛋白
- 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子研究进展被引量：7
- 2007年
- hGM-CSF是一种重要的具有免疫调节功能的糖蛋白,在造血调控和免疫调节方面发挥重要作用,具有重要的临床应用价值。总结近些年来各国对hGM-CSF的研究情况,首先对hGM-CSF的基因结构、蛋白分子结构、生物学活性等方面做了详细的介绍;接下来,又从基因转录水平和转录后水平两个方面对hGM-CSF的表达调控做了介绍;最后,对比了利用基因工程技术将hGM-CSF基因在不同生物中的表达情况,详细讲解了优缺点。
- 王清路李俏俏张玉军张锐徐寿增
