李兆学
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 乙肝表面抗体和抗人红细胞单克隆抗体的F(ab′)_2偶联与鉴定被引量：1
- 2010年
- 制备人红细胞非凝集型单克隆抗体,形成双功能抗体试剂,用于临床诊断。用人O型红细胞膜蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,制备非凝集型单克隆抗体,通过化学偶联法将非凝集性单克隆抗体和乙肝表面抗体的F(ab′)2片段偶联,制备出双功能抗体,用直接凝集法检测乙肝表面抗原。获得5株分泌非凝集型杂交瘤细胞,利用戊二醛一步法制备出双功能抗体,形成全血凝集检测试剂,并进行了初步鉴定。
- 王云龙李兆学李恒思李玉林李忠信孙新城
- 关键词：人红细胞单克隆抗体双功能抗体
- 猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达及其免疫原性检测被引量：1
- 2010年
- 以病猪脾脏组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR得到579 bp的猪圆环病毒2型(PCV-2)/ORF2片段,与原核表达载体pET32a重组,通过菌落PCR鉴定、双酶切鉴定及测序鉴定后,证实重组质粒pET32a/ORF2构建成功,将其转化入表达菌Balgold,通过IPTG诱导表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的产物,Western blot验证其免疫原性,重组蛋白免疫Balb/c小鼠,检测小鼠体内中和抗体滴度。获得的重组蛋白包涵体的形式出现,表达量占菌体总蛋白的30%,变性纯化后纯度达90%以上,Western blot证实重组蛋白能与PCV-2阳性血清发生反应,免疫Balb/c小鼠45 d后中和抗体滴度达到1∶22。
- 梁晓艳李玉林李兆学王继美贾丽锋周贺娟王云龙
- 关键词：猪圆环病毒ORF2原核表达免疫原性
- 人红细胞单链抗体的制备与血凝试验方法的初步建立
- 自身红细胞凝集试验(Autologous red cell agglutination assay,AGEN)是一种简便、特异又不需要任何特殊仪器的快速诊断方法。其灵敏性和特异性不亚于ELISA,且可同时检测IgG和Ig...
- 李兆学
- 关键词：人红细胞单克隆抗体双功能抗体
- 文献传递
- Flag标签抗原的偶联及其单克隆抗体的应用研究被引量：1
- 2011年
- 探讨不同免疫原制备抗Flag标签单克隆抗体的效果,以及Flag标签单克隆抗体在融合蛋白纯化中的应用。通过碳化二亚胺分别合成Flag-BSA、Flag-OVA、Flag-KLH3种完全抗原,采用SDS-PAGE和免疫效价对比方法确定偶联效果,选最优者利用杂交瘤技术制备抗Flag标签单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备腹水,并对其纯化、分析和鉴定。制备交联抗Flag-mAb的亲和层析柱,纯化带Flag标签的融合蛋白,经SDS-PAGE电泳后薄层扫描分析纯度,用Western blot检测mAb对融合蛋白的反应性。Flag-KLH偶联效果最好,小鼠免疫效价在104以上,共制备3株抗Flag标签单克隆抗体杂交瘤细胞株2B-7、3C-5、5F-2,分泌抗体均为IgG1类型,与其他融合蛋白标签无交叉反应,经亲和层析纯化融合蛋白纯度达85%,且都可用于融合蛋白的Western blot检测,建立了带Flag标签的融合蛋白纯化和检测方法。成功偶联了Falg完全抗原并制备单克隆抗体,为带Flag标签的融合蛋白纯化提供重要工具。
- 王云龙李忠信李恒思李玉林王继美刘旺根李兆学
- 关键词：偶联单克隆抗体
