李冰
- 作品数:197 被引量:648H指数:13
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- 基于T7RNA聚合酶/启动子的细胞融合报导系统载体的构建被引量:1
- 2010年
- 目的:建立T7RNA聚合酶/T7启动子载体系统,作为观察细胞融合是否成功的报导系统。方法:设计并合成引物从BL21细菌中扩增T7RNA聚合酶序列,并将其克隆进入真核表达载体pRc/CMV2中,作为RNA聚合酶的供体。T7RNA聚合酶特异性识别的r17启动子人工合成,构建于荧光素酶的表达载体pGL3中,利用其荧光素酶基因作为报导基因。两质粒共转染A549细胞和VeroE6细胞,检测荧光素酶的表达。结果:共转染pRc/CMV2。T7RNAP和pGL3-T7的A549细胞和VeroE6细胞的荧光强度分别为57745±7747和43679±8616,转染质粒pGL3-T7的细胞空白对照荧光强度1034±201和1091±157,分别与空白对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:成功构建了T7RNA聚合酶/T7启动子载体的细胞融合报导系统,可应用于细胞融合的相关实验研究中。
- 刘利东朱蔚云黄金水李冰
- 关键词:细胞融合T7启动子荧光素酶
- 宫颈癌、卵巢癌与HLA的关联研究被引量:4
- 2005年
- 目的 探讨HLA抗原与宫颈癌、卵巢癌病因学中发病风险的关系。方法 用标准微量淋巴细胞毒性试验对 2 4例宫颈癌患者、2 2例卵巢癌患者和 2 5例正常妇女进行HLA -A、B、C抗原位点检测。结果 HLA -B5 (RR =3 4 5 9,P =0 0 37)与宫颈癌危险风险呈强的正相关 ,HLA -A1 1 (RR =0 36 4 ,P =0 0 5 5 6 )与卵巢癌危险风险呈负相关。结论 HLA -B5抗原与宫颈癌 ,HLA -A1 1抗原与卵巢癌的发病风险有着密切的关系。
- 李冰梁建容张慧敏孙筱放
- 关键词:HLA抗原宫颈癌卵巢癌
- 医学院校生命科学院科研平台建设举措
- 2021年
- 医学院校的科研平台不单是培养创新型、复合型医学人才的重要基地,也是创建双一流学科、高水平大学的重要支撑。在现代高等教育体制发展的背景下,生命科学学科快速发展,医学院校应持合作进取的态度,在创建一流临床实验室的同时加大力度创立与时俱进的生命科学学科科研平台。我们通过积极引进科研人才,拓展科研合作平台;建立学院科研平台与学校物资中心、资产科联合管理模式;施行生命科学院与基础学院、临床学院的仪器平台共享。创新型、合作型及研究生责任明确性科研平台的建设,有助于研究生全面认识科研工作的安全性与严谨性,有助于全方面提高科研人员学术素养、平台管理效率以及使用效率。
- 高咪洪玮付欣周问渠李冰戴建威李帅
- 关键词:医学院校科研平台建设
- 女孩性早熟患者中检出一种新的雌激素受体基因突变(英文)被引量:5
- 2005年
- 对收集的16例未见血液雌激素水平升高的临床女孩性早熟患者的外周血样本,利用PCR-SSCP方法筛查了雌激素受体基因编码区的可能突变。结果在1例患者发现:其雌激素受体基因8号外显子编码精氨酸的548位密码子,1个C→T转换导致精氨酸残基被半胱氨酸所替代;这一突变使DNA序列中产生1个BtsⅠ酶切位点,通过PCR-RFLP实验证明此患者为Arg548/Cys548杂合体。为证明该突变在性早熟发生中的作用,构建了一个雌激素受体反应元件报道质粒pGL3-promoter-ERE;成功将野生型ESR1基因定点突变,并克隆于PCR3.1真核表达质粒。报道质粒和表达质粒共转染CMF-7细胞,Cys548突变能够增加萤火虫荧光素酶的产生。结果证明该突变雌激素受体在体外具有高活性特征,因而推测在体内也可能具有相应的过高活性,从而导致女孩的性早熟。
- 李冰刘丽付欣周问渠邹东霆赵小媛蔡艳娜涂洪彬刘启才陈耀勇
- 关键词:雌激素受体基因突变女孩性早熟
- NP9对鼻咽癌细胞系CNE1基因表达谱的影响被引量:5
- 2008年
- 目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差异。结果:所分析的14500个基因中,266个检测出有表达差异,其中82个基因呈现表达上调(RA>1),184个基因显示表达下调(RA<1)。显著上调和下调的基因分别为34个(RA>1.5)和75个(RA<1.5)。结论:NP9基因的表达导致了CNE1细胞中与细胞周期调控、细胞增殖和分化、细胞信号转导、细胞黏附相关基因表达的改变,为NP9的功能及分子机制研究提供了新的线索。
- 刘启才李晓艳彭燕李晓岩李冰
- 关键词:鼻咽肿瘤基因基因表达CNE1细胞
- 活细胞荧光探针法实时检测细胞内活性氧与细胞凋亡
- 2015年
- 目的:建立能利用活细胞工作站和荧光探针动态监测细胞内活性氧(ROS)与细胞凋亡的新方法。方法将人支气管上皮细胞16HBE和肺癌A549细胞分别以工作浓度为5μmol/L的ROS活细胞荧光探针C10422和C10444、10 mg/L的线粒体功能探针JC-1孵育30 min、凋亡指示探针AnnexinV/PI孵育15 min后,用活细胞工作站连续记录1 mmol/L H2O2刺激时的特定波长荧光灰度值,评价细胞ROS,线粒体膜电位以及细胞凋亡指数。结果16HBE细胞在1mmol/L H2O2持续刺激下,ROS荧光探针C10422和C10444表现为特定波长灰度值持续增加,分别在80 min后和10 min后ROS水平明显升高(均P〈0.05);线粒体膜电位荧光探针JC-1表现为两种波长荧光灰度值的转化,在H2O2持续刺激下,代表细胞线粒体功能的指标R/G比例在20 min以后明显下降(P〈0.05);凋亡探针AnnexinV主要表现在细胞膜区域荧光聚集增强,但整体视野的荧光灰度变化不明显。A549细胞在相同的实验条件下1 mmol/L H2O2刺激时,ROS水平也升高但低于16HBE(P〈0.05);而JC-1所探测的R/G比值曲线出现一个持续的下降峰后又部分回升。结论以活细胞工作站为基础结合活细胞荧光探针建立的检测方法能更客观地反映细胞的氧化应激行为和细胞凋亡状态。
- 李熹翀彭燕邓小亮付欣周问渠洪玮邹东霆李冰
- 关键词:活性氧细胞凋亡
- 口服泼尼松在预防中、重度卵巢过度刺激综合征中的应用被引量:5
- 2011年
- 目的:探讨口服泼尼松对中、重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)的预防作用。方法:回顾性分析接受夫精人工授精(AIH)治疗的OHSS高危患者(hCG注射日血雌二醇≥10000pmol/L或双侧卵巢直径≥14mm的卵泡达4个以上者)共647个治疗周期,将其分成A组(334个周期)和B组(313个周期);A组为对照组,未使用任何药物;B组患者于hCG注射日口服泼尼松5mg,每天3次×2d,后改为5mg,每天1次×10d。根据Golan分类标准,对两组中、重度OHSS的发病率及其他相关指标进行统计学分析。结果:A组中、重度OHSS的发病率为3.29%(11/334),而B组为0.32%(1/313)。两组发病率有统计学差异(P<0.05)。两组在妊娠结局上无统计学差异(P>0.05)。结论:口服泼尼松可预防中、重度OHSS的发生,对AIH的临床妊娠率没有影响。
- 蒋亚玲邢福祺李冰全松冯健怀
- 关键词:卵巢过度刺激综合征泼尼松夫精人工授精
- 香烟烟雾暴露对大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的探讨香烟烟雾暴露对大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响。方法20只雌性SD大鼠,按随机数字表分为对照组和模型组,每组10只。模型组大鼠被动吸入香烟烟雾,每天2次,每次45min;对照组大鼠不接触香烟烟雾。100d后处死动物,光镜下观察肺组织的病理形态学改变,免疫组化法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Wnt3a和β-catenin蛋白表达,并测定2组大鼠支气管平滑肌厚度。结果模型组大鼠肺组织呈现慢性炎性反应和肺气肿样改变,小气道壁及平滑肌层增厚明显。α-SMA主要表达于气道和血管的平滑肌层。模型组支气管平滑肌厚度高于对照组[(3.06±0.62)μm比(1.86±0.43)μm,P〈0.05]。Wnt3a和β-catenin主要表达于支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞。模型组与对照组支气管上皮细胞Wnt3a蛋白表达分别为74.54±4.14、89.24±3.02;肺泡上皮细胞Wnt3a蛋白表达分别为91.97±2.50、110.46±3.85,组间比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。模型组与对照组支气管上皮细胞胞质β-catenin蛋白表达分别为86.97±4.87、103.18±3.77;支气管上皮细胞胞核β-catenin蛋白表达分别为95.75±3.91、116.12±5.76;肺泡上皮细胞胞质β-catenin蛋白表达分别为106.24±4.57、128.81±3.96;肺泡上皮细胞胞核β—catenin蛋白表达分别为125.44±4.89、152.90±4.10,组间比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论香烟烟雾可诱导大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达匕调。
- 邹威凤胡国平李冰冉丕鑫
- 关键词:慢性阻塞性WNT蛋白质类气道重构
- VEGFR-3 2-Ig反义多肽的原核表达及生物活性鉴定
- 2003年
- 目的 将VEGFR - 32 -Ig的反义基因在体外进行原核表达 ,并将产物进行生物活性鉴定 .方法 构建VEGFR - 32 -Ig反义基因的原核表达载体 ,经过原核表达、亲和层析及蛋白酶切后获得将VEGFR - 32 -Ig的反义多肽 ,用MTT法进行活性鉴定 .结果 获得VEGFR - 32 -Ig的反义多肽 ,MTT法证明VEGFR - 32 -Ig的反义多肽具有较强生物学活性 .结论 成功获得VEGFR - 32 -Ig的反义多肽 。
- 崔玉梅张雅洁李书华李冰张惠球
- 关键词:原核表达生物活性
- 葡萄胎发病新基因F10在不同肿瘤组织的表达被引量:17
- 2005年
- 目的研究葡萄胎差异表达新基因F10在不同组织的表达情况及其与恶性肿瘤之间的关系。方法采用原位杂交方法检测不同肿瘤组织和正常组织的F10基因mRNA表达。结果F10基因在卵巢腺癌、子宫内膜癌、乳腺癌、肝癌、胃癌等腺癌中阳性表达,不同腺癌之间阳性表达差异无显著性(P>0.05)。子宫内膜、宫颈上皮等正常组织、肝癌癌旁组织中F10基因阴性表达。结论葡萄胎差异表达新基因F10不仅与滋养细胞肿瘤密切相关,可能还在某些腺癌发生发展中起重要作用。
- 周瑾梁卫华李冰陈士岭邢福祺庞战军周问渠付欣丁彦青
- 关键词:肿瘤组织新基因基因MRNA表达原位杂交方法卵巢腺癌阴性表达