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全局转录工程法构建产S-腺苷蛋氨酸重组酿酒酵母的研究被引量：5: 2012年; 利用全局转录工程(global transcription machinery engineering,gTME)方法对酿酒酵母RNA聚合酶II中的转录因子SPT15和TAF25编码的基因进行克隆并结合易错PCR随机突变,将SPT15和TAF25的易错PCR产物连接改造的pYES2.0表达载体。并用醋酸锂转化的方法转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2846中,研究了SPT15和TAF25的定向进化对酿酒酵母产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)的影响。经过筛选分别获得了重组酿酒酵母菌株spt15-81和taf25-36。对其发酵性状分别进行了初步研究,在28℃、200 r/min条件下,250 mL摇瓶(50 mL O-medium)发酵48 h时,SAM的产量分别比对照菌株提高了2.0倍和1.8倍。由此表明。; 曹喜涛陈凯李扬窦洁王慧周长林奚涛; 关键词：酿酒酵母易错PCR S-腺苷甲硫氨酸

酿酒酵母单倍体菌株分离筛选及其产腺苷甲硫氨酸的初步研究被引量：1: 2015年; 获得产腺苷甲硫氨酸的二倍体酿酒酵母CGMCC 2842遗传育种单倍体亲本。采用不同产孢培养基考察了酿酒酵母的产孢率,并对酿酒酵母CGMCC 2842进行了生孢培养分离子囊孢子得到单倍体菌株,确定单倍体配型,测定不同单倍体菌株腺苷甲硫氨酸含量。从分离的七株单倍体菌株(6株a型和1株α型)中筛选出一株产腺苷甲硫氨酸较高的a配型的单倍体菌株,经250 m L摇瓶发酵48 h后产腺苷甲硫氨酸1.10 g/L。筛选得到了一株产腺苷甲硫氨酸较高a型的单倍体菌株,为菌株的进一步遗传育种改良和腺苷甲硫氨酸微生物发酵法规模化生产奠定了基础。; 曹喜涛陈凯李扬窦洁王慧周长林奚涛; 关键词：酿酒酵母单倍体产孢腺苷甲硫氨酸

产腺苷甲硫氨酸酿酒酵母半胱氨酸补料工艺的研究: 对酿酒酵母生物合成腺苷甲硫氨酸发酵过程进行工艺优化，研究了半胱氨酸添加量、半胱氨酸添加时间、碳源对菌体浓度和SAM产量的影响。结果表明,在10 L发酵罐中,发酵16h时,补加半胱氨酸至浓度2mmol/L,发酵36h时菌体...; 夏毅杨依顺李扬袁超窦洁王慧周长林; 关键词：腺苷甲硫氨酸酿酒酵母发酵工艺优化设计; 文献传递

一株海洋放线菌次级代谢产物抗真菌活性的研究被引量：1: 2013年; 随着真菌感染的发病率及抗药性的逐年上升,筛选新的抗真菌活性物质已成为临床治疗系统性真菌感染的迫切需要。以双层琼脂扩散法测定抗真菌活性,研究10株海洋放线菌的发酵液及其菌体甲醇提取液对白色念珠菌的抑制作用。结果筛选到一株胞内含有抗真菌活性物质的海洋放线菌Actinomycete A9,经10 L发酵罐发酵,将菌体甲醇提取物及发酵液乙酸乙酯萃取液浓缩合并,利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析Sephadex LH-20等分离纯化手段,最终获得1 mg浅黄色针状晶体的单一化合物,纯度为99.9%。同时,以ConA、LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖为模型,发现Actinomycete A9经硅胶柱层析分离后的抗真菌组分(10μg/mL)能够抑制ConA、LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖,表明海洋放线菌Actinomycete A9的胞内活性物质具有抗真菌及免疫抑制活性,为后续研究奠定了基础。; 李扬杨依顺窦洁王慧杨岱琳周长林; 关键词：海洋放线菌抗真菌活性免疫抑制柱层析 HPLC

一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法: 本发明公开了一种含组成型启动子pPGK和G418抗性基因的酿酒酵母表达载体及其构建方法，其目的是解决目前酿酒酵母表达载体多以营养缺陷为筛选标记，难以在工业酵母菌株进行基因工程改造过程中使用这一难题。其构建方法步骤如下：克...; 周长林曹喜涛陈凯窦洁王慧李扬奚涛; 文献传递

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李扬