李明
- 作品数：10 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：湖南省卫生厅科研基金湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Nrf2在烧伤脓毒症肺中的动态表达研究
- 2011年
- -目的探讨Nrf2在烧伤脓毒症大鼠肺组织中的表达规律。方法将Wistar大鼠分为正常对照组、单纯烫伤组、烫伤复合金葡菌脓毒症组和烫伤复合绿脓杆菌脓毒症组。依不同时相（2、8、24h），分为三个亚组，检测肺脏组织中Nrf2mRNA、Nrf2的蛋白质表达情况。结果正常大鼠肺组织中Nrf2mRNA较高表达（74．0±7．0）；单纯烫伤大鼠肺组织中Nrf2mRNA表达明显下调，分别为34．5±1．9、50．4±2．2、32．1±1．4（t=5．69～14．63，P〈0．01）；金黄色葡萄球菌所致烫伤脓毒症大鼠肺组织中Nrf2mRNA明显下调，分别为53．1±5．0、14．4±1．6、48．5±1．9，其中伤后8h达峰值（t=5．59-29．3，P〈0．01）；绿脓杆菌所致烫伤脓毒症大鼠伤后2hNff2mRNA表达无明显下降（71．0±8．1，P〉0．05），但伤后8、24h均明显下调（24．8±2．1、4．1±2．0，t=21．33，68．1，P〈0．01）。结论Nrf2直接参与了烧伤后免疫应答反应。
- 周勇陈继业陈孜孜李明周建大
- 成人成肌细胞的分离与体外培养
- 2009年
- 目的建立一种优化的体外成人成肌细胞分离与原代培养方法。方法首先用两步消化法对取自成人骨骼肌组织进行消化获取相对较纯的成肌细胞，通过差速贴壁法进行进一步的纯化，并对获取的成肌细胞进行细胞形态学观察、免疫组织化学、透射电镜鉴定及生长曲线的绘制与分析。结果该方法可获取高纯度的成肌细胞，且在体外可快速稳定增殖。结论该方法所获取的成肌细胞可为Duchenne肌营养不良的治疗、血友病、血栓闭塞性脉管炎（伯格氏病）、心肌梗死和慢性心衰的基因治疗的研究提供一种充足、可靠的实验靶细胞。
- 陈勇周建大李文邹永华殷照初陈继业李明
- 关键词：细胞分离细胞培养技术
- 成人成肌细胞的分离与体外培养
- 目的：建立一种体外成人成肌细胞分离与原代培养的方法。方法：首先用两步消化法对取自成人骨骼肌组织进行消化获取相对较纯的成肌细胞，通过差速贴壁法进行进一步的纯化，并对获取的成肌细胞进行细胞形态学观察、免疫组织化学、透射电镜鉴...
- 周建大罗成群贺全勇李文波陈继业李明
- 关键词：成肌细胞分离纯化体外培养
- 文献传递
- Let-7b和miR-199a对B16F10细胞增殖生长的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究let-7b和miR．199a对黑色素瘤增殖生长的影响。方法设计靶向let-7b和miR．199a基因的过表达质粒和inhibitor干扰片段，将同一株系B16FIO细胞分为七组：空白组、let-7b质粒组、miR-199a质粒组、空质粒组、let-7binhibitor组、miR-199ainhibitor组、inhibitor对照组，运用基因转染技术将对应组别的外源基因导人B16F10细胞中，从RNA水平、蛋白水平和细胞水平三方面检测let-7b和miR-199a基因对B16F10细胞的影响。结果let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FIO细胞中对应基因的表达为3．8776±0．1372和2．8660±O．2821，明显高于空白组（P〈0．05）；let-7binhibitor组和miR-199ainhibitor组B16F10细胞中对应基因的表达为0．2057±0．0263和0．2656±0．0253，明显低于空白组（P〈0．05）；B16F10细胞中cyclinDl的表达let-7b质粒组（2．023±0．315）和let-7binhibitor组（1．857±0．377）明显高于空白组（0．997±0．041）（P〈0．05），而B16F10细胞中Met的表达中miR．199a质粒组（5．19±0．309）和miR-199ainhibitor组（4．87±0．044）明显高于空白组（2．2±0．198）（P〈0．05）；let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FIO细胞的生长趋势较空白组缓慢，尤其到转染后第3天，此生长趋势下降至最低值（P〈0．05），此后又缓慢趋近正常；此外，let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FlO细胞凋亡率分别为（11．8-4-1．19）％和（11．3±1．59）％，明显高于空白组（5．77±1．74）％（P〈0．05）。结论let-7b和miR-199a可负调控黑色素瘤细胞的增殖生长。
- 周建大谭建湘谢慧清蒋碧梅周鸣刘海航李明张彦文徐丹陈继业李雄罗成群
- 关键词：细胞增殖
- MicroRNA在调控物质代谢方面的作用被引量：4
- 2013年
- MicroRNA通过干预靶基因表达水平构建了复杂的调控网络,调控生命活动的进行。目前已发现microRNA广泛参与葡萄糖、脂类、氨基酸的代谢及生物氧化过程,在一些重要位点上发挥调控作用。在人体摄取和利用葡萄糖过程中,microRNA参与调控胰岛素分泌、胰岛素敏感性、细胞对葡萄糖摄取、细胞内糖酵解途径等,并可影响线粒体功能及有氧氧化。在脂类代谢中,microRNA作用于脂类合成、分解及转运相关的靶基因,调控体内脂类代谢。此外,microRNA还与谷氨酰胺异化代谢有关。
- 李明谢慧清熊武徐丹曹科刘睿周建大罗成群
- 关键词：微小RNA胰岛素糖酵解线粒体
- 内皮抑素基因抗黑色素瘤细胞高转移的动物研究被引量：1
- 2009年
- 目的:验证转内皮抑素基因抑制高转移性黑色素瘤细胞的转移能力。方法:将pcDNA3.1-Endo真核表达载体转染小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16F10,运用RT-PCR和W estern-b lot验证Endo的表达后,进行瘤细胞的粘附实验、体外侵袭和运动实验以及C57BL/6小鼠的皮下种植瘤和肺转移瘤试验,并进一步统计分析。结果:内皮抑素基因能明显抑制B16F10黑色素瘤细胞的粘附、体外侵袭和运动、体内成瘤以及肺转移能力,其中粘附抑制率36.4%,体外侵袭抑制率48.4%,细胞运动功能抑制率52.1%,肺转移抑制率为67.3%。结论:转内皮抑素基因能明显抑制黑色素瘤细胞的高转移能力。
- 周建大李文波罗成群谭建湘汪阳胡媛陈孜孜陈继业李明王少华
- 关键词：黑色素瘤内皮抑素基因转染
- 人VEGF165基因转染成人成肌细胞的实验研究
- 2010年
- 目的:将人血管内皮生长因子165(hVEGF165)导入原代离体成肌细胞,观察该细胞hVEGF分泌情况,探讨成人自体转基因成肌细胞移植的可行性。方法:采用两步消化法对成人骨骼肌组织消化获取相对较纯的成肌细胞,通过差速贴壁法进行进一步的纯化。以脂质体转染法将pcDNA3.1-hVEGF165导入成肌细胞,通过RT-PCR、ELISA和Western-blot进行hVEGF165定量检测,MTT测定和Mile's实验检测VEGF165的生物学活性。结果:转基因细胞经RT-PCR扩增出一条VEGF的特异性泳带,ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度分别达到18.92±1.77 ng/mL、19.04±2.15 ng/mL,Western blot检测转基因成肌细胞上清均检测到VEGF蛋白特异性的杂交带,MTT显示转基因细胞上清明显促内皮细胞增殖,Mile's实验显示转基因细胞上清明显增加毛细血管通透性。结论:质粒pcDNA3.1-hVEGF165能成功转入成人成肌细胞,转基因细胞能分泌有生物活性的VEGF165蛋白。
- 陈勇周建大邹永华殷照初李文波李明陈孜孜李万猛
- 关键词：骨骼肌成肌细胞血管内皮生长因子基因表达
- 胃癌患者根治性胃切除术后的并发症和长期生存的影响因素分析
- 李荣徐灿霞胡婷姿蒋小霞刘晓明张淋芳李明
- 成人成肌细胞的分离与体外培养
- 目的建立一种体外成人成肌细胞分离与原代培养的方法。方法首先用两步消化法对取自成人骨骼肌组织进行消化获取相对较纯的成肌细胞,通过差速贴壁法进行进一步的纯化,并对获取的成肌细胞进行细胞形态学观察、免疫组织化学、透射电镜鉴定及...
- 周建大罗成群贺全勇李文波陈继业李明
- 关键词：成人骨骼肌成肌细胞体外培养
- 文献传递
- Let-7b对人黑色素瘤细胞增殖及有氧糖酵解的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究let-7b对人黑色素瘤细胞增殖及有氧糖酵解的影响。方法将人工合成的microRNA单核苷酸let-7bmimics及inhibitor通过脂质体转染人黑色素瘤细胞株A375，上调或抑制let-7b在细胞内的表达水平，不同时相点检测细胞葡萄糖消耗和乳酸产量，MTT法检测细胞增殖。运用单因素方差分析探讨let-7b表达水平与黑色素瘤细胞有氧糖酵解及增殖的关系。结果let-7bmimics组24、48h时相点检测MTr吸光度值分别为0．396±0．030、0．525±0．037，低于其他组（P〈0．05），提示高表达let-7b抑制细胞增殖；各组黑色素瘤细胞24、48h葡萄糖消耗及乳酸产量差异无统计学意义（P〉0．05），乳酸产量与葡萄糖消耗比值各组间差异无统计学意义（P〉0．05），其中空白组在24h和48h内葡萄糖转化为乳酸效率约为57％和43％。结论黑色素瘤A375细胞具有显著的有氧糖酵解表型，过表达let-7b可抑制人恶性黑色素瘤细胞A375增殖，但对于细胞的有氧糖酵解效率，尚未发现let-7b对其有显著影响。
- 周建大李明李万猛周鸣罗成群尹朝奇陈铁夫李萍陈佳蒋碧梅刘海航刘睿徐丹谢慧清
- 关键词：糖酵解
