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李明: 作品数：10 被引量：14H指数：3; 供职机构：滨州医学院更多>>; 发文基金：山东省高等学校科技计划项目山东省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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miRNA-486-5p对结肠癌细胞株SW620生物学行为的影响被引量：3: 2015年; 目的探讨微小RNA-486-5p(miRNA-486-5p)对结肠癌细胞SW620增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法构建miRNA-486-5p过表达质粒,采用脂质体法瞬时转染结肠癌细胞株SW620,实时定量PCR(qRT-PCR)检测转染细胞后miRNA-486-5p的表达丰度,MTT法及流式细胞仪检测细胞的增殖及凋亡情况,Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力。结果 SW620转染miRNA-486-5p过表达质粒后,miRNA-486-5p表达明显上调(8.72±0.52 vs 1.02±0.06),细胞增殖能力降低(0.92±0.02 vs 1.40±0.03)、凋亡率增高[(15.30±2.60)%vs(4.70±1.30)%],迁移能力降低(75.20±10.60 vs 142.50±11.30),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-486-5p可抑制结肠癌细胞SW620的增殖和迁移能力,促进其凋亡,有望成为结肠癌治疗的新靶点。; 刘成霞李明连海峰史宁; 关键词：结直肠癌转染

结直肠锯齿状腺瘤、传统腺瘤及结直肠癌中鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1和促红素人肝细胞蛋白表达差异比较: 2014年; 结直肠癌是严重威胁人类健康的消化道恶性肿瘤之一，有研究表明缺乏对锯齿状病变的正确认识是结直肠癌发病率持续增加的原因之一。据报道，2007年仅10％～15％的结直肠癌来自锯齿状病变，但2011年 Snover提出35％的结直肠癌来自锯齿状病变。本研究检测鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体 B1（v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1，BRAF）、促红素人肝细胞（erythropoietin-producing hepatoma cell line B2，EphB2）蛋白在锯齿状腺瘤（serrated adenomas，SA）、传统腺瘤、结直肠癌中的表达量，观察各蛋白的表达部位，并与传统腺瘤及结直肠癌比较，旨在加强对 SA 的认识，提高诊断的正确率。; 贾兴芳刘成霞沈媛媛李明王爱丽; 关键词：锯齿状腺瘤肝细胞蛋白结直肠癌滤过性病毒促红素

胃肠道肿瘤中EphrinB2和淋巴管密度的表达及临床意义: 2013年; 目的探讨胃肠道肿瘤中EphrinB2的表达与淋巴管密度、淋巴结转移及临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学、蛋白质印迹两种方法检测EphrinB2在45例胃腺癌、57例大肠腺癌和正常胃大肠黏膜组织(各15例)中的表达。检测D2-40标记的淋巴管并计数淋巴管密度(LVD)。结果 (1)Eph-rinB2阳性反应主要定位于肿瘤细胞胞质内;D2-40标记的LVD为棕黄色管腔样结构,阳性反应主要位于淋巴内皮的胞膜上。(2)免疫组织化学:EphrinB2在肿瘤组织中阳性表达率明显高于正常组织的阳性表达率(胃82.2%vs.26.7%,大肠75.4%vs.33.3%,P均<0.05);肿瘤组织LVD显著高于正常组织(P均<0.05)。蛋白质印迹:胃和大肠肿瘤组织的表达分别为2.30±0.86和1.89±0.89,高于正常组织的表达0.90±0.41和0.87±0.56(P均<0.05)。(3)EphrinB2的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及临床分期有密切关系(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。肿瘤组织中LVD与肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移及临床分期相关(P<0.05),Spearman秩相关分析发现EphrinB2的表达与LVD呈正相关性。结论 EphrinB2在肿瘤中高表达,与胃肠道肿瘤的转移和进展密切相关,并与LVD呈正相关性,Eph-rinB2可能诱导LVD的形成参与淋巴结转移的调控。; 岳文静刘成霞连海峰高方美朱玉红李明; 关键词：胃肠肿瘤印迹法 EPHRINB2 淋巴管密度

NRP2在胃癌中的表达及其临床意义被引量：1: 2014年; 目的探讨神经纤毛蛋白-2(NRP2)在胃癌(GC)组织中的表达及其临床意义。方法收集65例胃癌组织及其配对癌旁正常黏膜组织,采用Western blotting、实时定量PCR(qRT-PCR)检测组织中NRP2蛋白及mRNA的表达,统计分析NRP2的表达与胃癌临床病理资料的关系。结果无论是在基因水平还是在蛋白水平,NRP2在癌组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.05);临床病理分析统计显示,NRP2的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及远处转移密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、组织学分型无明显关系(P>0.05)。结论 NRP2在胃癌中高表达,并与胃癌转移及进展密切相关,有望成为胃癌生物治疗的靶点。; 连海峰李明刘成霞贾兴芳李丹; 关键词：胃肿瘤免疫印迹法

结肠癌中相关miRNA对NRP2调控的预测及鉴定被引量：2: 2014年; 目的:预测可能调控神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2)的微小RNA(microRNA,miRNA),鉴定其对NRP2的调控作用及可能的调控机制.方法:使用生物信息学软件预测可能调控NRP2的miRNA,选择可能性最大的miRNA-486-5p进一步研究,构建miRNA-486-5p过表达质粒,采用脂质体法将质粒转染入人结肠癌细胞株SW620,实时定量PCR(qRT-PCR)验证miRNA-486-5p的表达丰度,Western blot检测NRP2的表达,双荧光素酶实验验证miRNA-486-5p对NRP2的调控机制.结果:生物信息学技术预测共有25条miRNA可能调控NRP2的表达,结合文献选择miR-486-5p进一步研究;miR-486-5p过表达质粒转染SW620细胞后,表达丰度升高,NRP2蛋白表达明显下调,双荧光素酶实验证实miRNA-486-5p可与NRP2 mRNA 3'非转录区(3'untranslated region,3'UTR)直接结合,从而发挥对NRP2转录后翻译的抑制作用.结论:miRNA-486-5p可调控的NRP2的表达,其作用机制是通过结合NRP2 3'UTR而抑制NRP2 mRNA的正常翻译.; 李明连海峰刘成霞马锋振谢书阳; 关键词：转染生物信息学技术

大肠癌中NRP2表达调控相关miRNA的预测及鉴定: 目的：生物信息学技术预测大肠癌中可能调控神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2)表达的相关微小RNA (microRNA, miRNA),鉴定其对NRP2的调控作用,初步阐明其调控机制。方法：1.生物信息学技...; 李明; 关键词：结直肠癌 MIRNA 转录后调控; 文献传递

NRP2及miR-486-5p在胃癌中的表达及临床意义被引量：4: 2015年; 目的:检测神经纤毛蛋白-2(neuropilin-2,NRP2)和mi R-486-5p在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌淋巴结转移的关系。方法:收集65例胃癌组织及其配对癌旁正常粘膜组织,免疫组织化学法检测组织中NRP2的表达,real-time PCR检测mi RNA-486-5p的表达,免疫组织化学法检测D2-40标记的微淋巴管密度(microlymphatic density,MLD),统计分析NRP2、mi R-486-5p的表达与MLD相关性。结果:免疫组化提示NRP2在肿瘤中表达增高(78.5%vs.29.2%,χ2=16.046,P=0.000),且与淋巴结转移密切相关(χ2=7.222,P=0.007)。real-time PCR结果显示肿瘤组织mi R-486-5p表达明显下调(0.39±0.16 vs.1.00±0.06,P=0.000),NRP2的表达水平与MLD呈正相关(r=0.384,P=0.015),mi R-486-5p的表达水平与MLD呈负相关(r=-0.755,P=0.000)。结论:NRP2和mi R-486-5p与胃癌发生发展密切相关,有望成为胃癌治疗的新靶点。; 连海峰李明刘成霞贾兴芳李丹吴小翎; 关键词：胃癌微淋巴管密度

miRNA-486-5p对胃癌细胞SGC7901中NRP2表达的影响被引量：1: 2014年; 目的:预测并鉴定miRNA-486-5p在人胃癌细胞SGC7901中的靶基因及其表达。方法:采用生物信息学技术预测miRNA-486-5p的作用靶点,构建miRNA-486-5p过表达质粒(GV214-miR)并转染入SGC7901细胞(SGC7901-miR)中,以空质粒转染SGC7901细胞(SGC7901-miR-NC)为阴性对照,以SGC7901细胞为空白对照。Real-time PCR检测转染细胞中miRNA-486-5p及其靶基因神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2)mRNA的表达,Western blotting检测NRP2的表达,双荧光素酶实验验证miRNA-486-5p对NRP2基因的调控机制。结果:经生物信息学预测,选择与胃癌生物学行为密切相关的NRP2作为miRNA-486-5p的靶基因。与空白组相比,GV214-miR转染后的SGC7901细胞miRNA-486-5p表达显著上调[(8.21±1.18)vs(1.02+0.26),P<0.01],NRP2 mRNA表达无明显变化(P>0.05),而NRP2蛋白表达则明显下调[(0.36±0.06)vs(0.76±0.05),P<0.05],双荧光素酶实验证实miRNA-486-5p可与NRP2 mRNA 3'-UTR直接结合,从而发挥对NRP2转录后翻译的抑制作用。结论:miRNA-486-5p在胃癌细胞SGC7901中可直接作用于NRP2 mRNA 3'UTR,从而抑制其表达。; 连海峰李明刘成霞李锟李丹; 关键词：胃癌生物信息学技术转染

miR-486-5p对胃癌细胞株SGC7901生物学行为的影响被引量：2: 2014年; 背景与目的:既往研究表明微小RNA-486-5p(miR-486-5p)在多种肿瘤的进展中起重要作用,但其在胃癌中作用的研究较少,本研究旨在探讨miR-486-5p对胃癌细胞株SGC7901增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法:使用实时定量PCR(quantification real-time PCR,qRT-PCR)检测胃癌细胞株SGC7901及胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-486-5p的表达,构建miR-486-5p过表达质粒,使用脂质体法瞬时转染胃癌细胞株SGC7901,qRT-PCR检测转染细胞后miR-486-5p的表达丰度,噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测细胞的增殖及凋亡情况,Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力。结果:miR-486-5p在SGC7901细胞中表达明显下调,SGC7901细胞转染miR-486-5p过表达质粒后,miR-486-5p表达明显上调,细胞增殖、迁移能力降低,凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-486-5p可抑制胃癌细胞株SGC7901的增殖和迁移。; 李明连海峰刘成霞胡营滨李有杰; 关键词：胃癌增殖凋亡

miR-486-5p对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用被引量：3: 2016年; 目的:探讨miR-486-5P对裸鼠皮下人胃癌移植瘤生长的影响及其可能的作用机制。方法:建立胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型,经miR-486-5P过表达质粒处理后,观察裸鼠皮下移植瘤生长情况,采用Western blotting及免疫组织化学法检测miR-486-5p靶基因神经纤毛蛋白-2(NRP2)的表达水平。结果:成功构建胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型;实验组移植瘤内miR-486-5p的表达水平明显高于对照组(P<0.05),miR-486-5p可明显抑制裸鼠皮下胃癌移植瘤的生长;与阴性及空白对照组相比,实验组平均瘤体质量明显下降[(0.404±0.080)vs(0.748±0.122)、(0.788±0.176)g,均P<0.05];移植瘤平均体积明显减小[(0.333±0.039)vs(0.597±0.175)、(0.594±0.216)cm^3,均P<0.05],实验组的抑瘤率达46.99%;实验组经miR-486-5p过表达质粒处理后,免疫组化检测结果显示,NRP2蛋白主要定位于胃癌细胞质内,呈棕黄色颗粒;实验组NRP2蛋白的IHS得分显著低于阴性及空白对照组[(2.2±0.84)vs(6.4±0.89),(6.2±1.48),均P<0.01];阴性对照组与空白对照组的得分差异无统计学意义(P>0.05);Western blotting检测结果显示,实验组移植瘤组织中NRP2蛋白的相对表达量显著低于阴性及空白对照组[(0.04±0.006)vs(0.70±0.03),(0.68±0.02),P<0.01]。阴性和空白对照组间的IHS得分值、抑瘤率及NRP2蛋白表达水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-486-5p可明显抑制裸鼠皮下胃癌SGC-7901细胞移植瘤的生长,其作用机制可能与抑制NRP2的表达有关。; 张冉冉连海峰史宁胡营滨李明刘成霞; 关键词：胃癌移植瘤模型

李明

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