李晓红
- 作品数：107 被引量：130H指数：6
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- 用三七总皂苷与卡维地洛治疗AMI后大鼠改善心功能作用的疗效比较与评价
- 2011年
- 目的研究三七总皂苷与卡维地洛对心肌梗死后大鼠左室心功能改善作用的疗效并比较评价。方法手术法结扎左冠状动脉前降支建立SD大鼠AMI模型36只,将模型鼠随机分为心梗对照组(AMI组),三七总皂苷治疗组(PNS组,80 mg·kg^(-1)·d^(-1))和卡维地洛治疗组(CARV组,6 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组12只;另设假结扎组(Sh组,12只)。术后24小时开始灌胃给药,4周后对各组大鼠进行超声心动图心功能和血浆脑钠肽(NT-proBNP)浓度检测。结果 (1)与Sh组比较,AMI组左室射血分数(EF)和左室收缩百分率(FS)、室间隔舒张、收缩末期厚度(IVSd、IVSs)与左室前壁收缩末期厚度(LVAWDs)均明显降低(P<0.01),左室舒张、收缩末期内径(LVIDd、LVIDs)显著增加,且左室后壁收缩末期厚度(LVPWDs)明显增加(P<0.05)。而二尖瓣血流E/A比值下降明显;心肌运动应变率(Radial Strain Rate)减小,达峰时间(TPK,ms)明显延长;NT-proBNP浓度显著增高(P<0.01)。(2)与AMI组比较,PNS组和CARV组的EF、FS、IVSd、IVSs与LVAWDs明显增加,而LVIDd、LVIDs和LVPWDs明显降低(P<0.01);且心肌运动应变率明显增加,达峰时间明显缩短;NT-proBNP浓度明显降低。(3)PNS组与CARV组比较,PNS组的EF、FS和LVAWDs增加显著,LVIDd、LVIDs减小明显;而IVSd、IVSs、和LVPWDs无明显差异(P>0.05)。并且,PNS组的二尖瓣血流E峰、A峰和E峰下降速率均明显增大(P<0.05),而E/A比值和心肌应变率、达峰时间与NTproBNP浓度两组无明显差异。结论心肌梗死后大鼠的左心室收缩和舒张功能异常严重;用三七总皂苷和卡维地洛治疗4周后均能明显改善其心功能,防止心衰;但PNS在提高EF、LVAWDs和二尖瓣血流方面更优于卡维地洛。
- 符永恒单志新杨敏李晓红刘晓颖林秋雄谭卫萍张梦珍余细勇
- 关键词：卡维地洛三七总皂苷二尖瓣血流左室心功能心肌运动
- 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法被引量：3
- 2013年
- 目的:建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法:通过混合酶消化法从少量成年大鼠骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团,批量扩增骨骼肌干细胞;用qRT-PCR和免疫细胞化学染色检测干细胞标志物Nanog、Oct4和骨骼肌干细胞标志物肌源性因子5(myogenic factor 5,Myf5)、配对盒蛋白7(paired box protein 7,Pax7)的表达;成脂或成骨分化诱导培养基诱导检测骨骼肌干细胞的多功能性。结果:采用混合酶消化法可获得骨骼肌干细胞单细胞,在悬浮的培养条件下能快速克隆成骨骼肌细胞团,贴壁培养后能看到骨骼肌干细胞从细胞团中爬出来,和传统的差速贴壁方法相比悬浮培养法获得的骨骼肌干细胞纯度更高,细胞状态更好,干性因子Nanog、Oct 4和骨骼肌干细胞标志物Myf5、Pax 7的表达更高(P<0.05);在不同培养基的诱导下能向骨骼肌、成骨和脂肪细胞系分化。结论:悬浮培养法能获得大批量干性好、纯度高、具有多向分化潜能的骨骼肌干细胞,从而为肌肉相关疾病的细胞治疗提供优良的种子细胞。
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通余细勇
- 关键词：成年大鼠骨骼肌干细胞
- 骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的潜能与调控机制研究
- ＜正＞人们一直渴望利用细胞来修复、替代受损的心脏。尽管许多研究支持骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）具有向心肌分化的潜能,但诱导分化的效率比较低。目前,已...
- 余细勇李晓红
- 文献传递
- 微环境中人骨髓间充质干细胞向心肌细胞表型分化的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨人骨髓间充质干细胞（hBMSC）在非接触共培养的微环境中向心肌细胞分化的能力。方法密度梯度离心法分离培养hBMSC，用流式细胞仪鉴别其表面标记特征。采用transwell按1：10的比例共同培养hBMSC和SD乳鼠心室肌细胞。用聚合酶链反应检测心肌转录因子GATA4的基因表达水平。免疫细胞化学、免疫荧光检测横纹肌仅一辅肌动蛋白、结蛋白、肌钙蛋白（cTn）T和cTnI等心肌细胞标志蛋白的表达。结果hBMSC的标志物主要为CD29（98．64％±0．80％）和CD44（96．70％±1．50％），而极少表达CD105（2．21％±0．600k）、CD11b（0．80％±0．05％）、CD45（1．39％±0．13％）和CD34（1．73％±0．08％）。与心肌细胞共培养后第7天可在hBMSC细胞中观察到少量搏动的细胞，随着诱导时间的增加，细胞的搏动更规则、有力。与心肌发育有关的转录因子GATA4基因在诱导后1、2、3周均有表达。共培养后2周，检测的心肌标志蛋白均有阳性表达，分别是结蛋白，仅一辅肌动蛋白，cTnI和cTnT。荧光标记也检测到cTnT和cTnI的阳性表达。结论hBMSC具有向心肌细胞分化的潜能，在共培养的微环境中，可以分化成心肌细胞表型，其机制是通过心肌细胞的旁分泌作用，而不需要hBMSC与心肌细胞的直接接触。
- 李晓红余细勇林秋雄单志新张光峰张晓邓春玉符永恒邝素娟黄薇杨敏林曙光
- 关键词：肌细胞间质干细胞细胞分化微环境
- 用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告分子筛选有效的siRNA被引量：13
- 2007年
- 建立一种利用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告分子筛选能有效抑制目的基因表达的siRNA的方法.以巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因为研究对象,筛选能有效沉默MIF表达的质粒载体介导的siRNA.构建拥有同一Kozak共有翻译启始序列、翻译启始密码子ATG的MIF-GFP融合表达载体pEGFP-MIF.分别将3个靶向MIF的siRNA表达质粒与pEGFP-MIF共转化HEK293细胞,在荧光显微镜下观察HEK293细胞中GFP的表达,并用荧光定量PCR检测HEK293细胞中MIF mRNA的表达水平.同时,将MIFsiRNA表达质粒分别与MIF表达载体共转化HEK293细胞,用荧光定量PCR检测HEK293细胞中MIF mRNA的表达水平.定量PCR结果显示,GFP表达低的细胞中,MIF mRNA的表达也明显降低;利用pEGFP-MIF和MIF表达载体筛选到的有效MIFsiRNA的结果一致.因此,建立了目的基因与GFP融合表达,以GFP作为报告分子来筛选抑制目的基因表达siRNA的方法,并为进行多个基因的有效siRNA的筛选提供解决方案.
- 单志新林秋雄符永恒邓春玉李晓红余细勇
- 关键词：RNA干扰荧光定量PCR绿色荧光蛋白
- SPIO标记骨髓间充质干细胞移植入心肌梗死大鼠的示踪研究
- 2010年
- 目的探讨超顺磁性氧化铁微粒(SPIO)体外标记骨髓间充质干细胞(BMSCs)及体内示踪移植入大鼠心肌梗死心脏的BMSCs的能力。方法使用左旋多聚赖氨酸-SPIO共培养方式标记BMSCs。采用普鲁士蓝染色观察细胞内铁颗粒,流式细胞术检测细胞活力,将经过SPIO标记的干细胞移植入心肌梗死大鼠心脏,应用1.5TMRI系统行磁标记干细胞成像。超声心动图检测各组心脏的左室射血分数(EF),左室舒张末期内径(LVIDd),左室收缩末期内径(LVIDs)及短轴缩短率(FS)。结果普鲁士蓝染色显示,SPIO标记的BMSCs细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒,标记效率为(99.81±1.57)%;与正常未标记细胞相比较,细胞的活力差异无统计学意义(P>0.05)。标记了SPIO的BMSCs体内MRI成像时显示,细胞移植区域信号缺失,对应区域病理切片普鲁士蓝染色可见胞浆内染色阳性的细胞。超声心动图显示,PBS组FS移植前后没有明显变化,BMSC组FS从移植前的(23.1±1.88)%上升到第1周的(31.28±4.15)%。BMSC组EF在移植前是(51.13±5.07)%,第1周时上升到(60.12±8.40)%。结论 SPIO能成功地标记BMSCs,且对BMSCs的活力无明显影响。BMSCs移植后能改善心梗大鼠的心功能。SPIO标记的BMSCs移植后在大鼠体内的分布、迁移过程可用MRI进行检测评价。
- 李晓红符永恒刘再毅单志新林秋雄朱杰宁邓春玉刘晓颖余细勇
- 关键词：干细胞移植示踪超顺磁性氧化铁
- 心脏干细胞可通过旁分泌exosome作用于心肌细胞
- 肖静潘宇李晓红吴岳恒姜霖杨翔宇余细勇
- 不同浓度卡维地洛对AMI后大鼠左室心功能作用的实验研究
- 符永恒杨敏李晓红刘晓颖谭卫萍单志新林秋雄苏健吴岳恒余细勇林曙光
- 关键词：卡维地洛
- 不同浓度卡维地洛对AMI后大鼠左室心功能作用的实验研究
- 目的:利用不同浓度卡维地洛治疗急性心肌梗死(AMI)后大鼠,检测与探讨其对左室心功能作用的量效关系。方法:以手术结扎法结扎大鼠左冠脉前降支(LAD),构建AMI模型共56只(治疗组:K1.5、K2.0、K3.0、K4.0...
- 符永恒杨敏李晓红刘晓颖谭卫萍单志新林秋雄苏健吴岳恒余细勇林曙光
- 关键词：卡维地洛左室心功能超声心动图N端脑钠肽
- 文献传递
- 干扰素γ刺激hUC-MSCs分泌外泌体促进调节性T细胞生成被引量：12
- 2017年
- 目的探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离h UC-MSCs,应用流式细胞术鉴定h UC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到Nor-h UC-exo和IFN-γ-stimulated h UC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用h UC-MSCs、Nor-h UCexo、IFN-γpretreated-h UC-MSCs、IFN-γstimulated h UC-exo与人外周血单个核细胞共培养5 d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 h UC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,h UC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated h UC-exo组Treg比例(11.53±0.88%)与IFN-γpretreated-h UC-MSCs组(7.54±0.50%)(P<0.05)、Norh UC-exo组(6.60±0.56%)(P<0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 h UC-MSCs可通过分泌外泌体来发挥免疫调节作用,在炎症因子刺激下h UCMSCs分泌的外泌体明显促进调节性T细胞的生成,h UC-exo可能是潜在的免疫抑制载体。
- 杨翔宇李晓红肖静胡洁媚冯娟霍然何国东吴岳恒余细勇
- 关键词：脐带外泌体调节性T细胞
