李步高
- 作品数：183 被引量：404H指数：9
- 供职机构：山西农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- MYNN基因在猪不同组织及肌肉中的表达规律被引量：3
- 2017年
- 试验旨在研究myoneurin(MYNN)基因在猪不同组织中的表达特征及其在肌肉(背最长肌、股二头肌和腰大肌)、小脑、肝脏、胰脏、肾脏、胃、脾脏、肺脏组织中的发育性表达规律。采用实时荧光定量PCR技术研究猪MYNN mRNA在90日龄大白猪和马身猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小脑、小肠、胰脏、胃、股二头肌及脂肪共11个组织中的表达谱,以及在大白猪和马身猪1、90、180日龄3个发育阶段的肌肉、小脑、肝脏、胰脏、肾脏、胃、脾脏、肺脏组织中的发育性表达规律。结果表明,MYNN在猪的各种组织中广泛表达,且各组织间表达差异显著或极显著(P<0.05;P<0.01);MYNN在大白猪和马身猪的肌肉、小脑、肝脏、胰脏、肾脏、胃、脾脏、肺脏组织中的不同发育阶段表达差异显著或极显著(P<0.05;P<0.01),并具有特定规律,由此推测其可能在猪的这几种组织中发挥重要作用。MYNN基因的表达与组织、日龄及品种的遗传背景有关。本试验为研究猪MYNN基因的生物学功能提供了依据,但还需要深入的研究来探索其作用的具体机制,尤其是在骨骼肌发育中的调节机制。
- 李萌靳玉舒张旗成志敏张宁芳乐宝玉高鹏飞曹果清李步高郭晓红
- 关键词：表达谱发育性表达
- miR-186-5p调控猪原代前体脂肪细胞增殖和分化的研究被引量：3
- 2021年
- 旨在探究miR-186-5p对猪原代前体脂肪细胞增殖和成脂分化的调控作用及机制。本研究采集7日龄健康马身猪公猪的颈部皮下脂肪,分离培养马身猪原代前体脂肪细胞;猪原代前体脂肪细胞分为4组,分别转染miR-186-5p模拟物(mimics)及其对照组(mimics NC),miR-186-5p抑制剂(inhibitor)及其对照组(inhibitor NC),用CCK8和划痕试验分析猪原代前体脂肪细胞的增殖效果,油红O染色检测其成脂分化能力,qPCR检测其增殖和成脂分化相关基因的表达水平;预测miR-186-5p的靶基因,用双荧光素酶报告试验检测miR-186-5p与靶基因的相互作用。结果,当猪原代前体脂肪细胞中转染mimics时,miR-186-5p的表达量极显著升高(P<0.01),细胞增殖能力和增殖相关基因:增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinases 4,CDK4)的表达量以及预测靶基因去乙酰化酶2(sirtuins 2,SIRT2)的表达量都极显著降低(P<0.01),而细胞成脂分化能力和成脂分化相关基因:过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)、固醇调节元件结合转录因子1(sterol regulatory element binding transcription factor 1,SREBF1)、CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)的表达量都极显著升高(P<0.01);当猪原代前体脂肪细胞转染inhibitor时,miR-186-5p的表达量极显著降低(P<0.01),细胞增殖能力以及增殖相关基因PCNA和CDK4的表达量、预测靶基因SIRT2的表达量都显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01),而细胞成脂分化能力以及成脂分化相关基因PPARγ、SREBF1、C/EBPβ、FABP4、LPL的表达量都极显著降低(P<0.01)。转染miR-186-5p mimics可以显著抑制SIRT23′UTR野生型双荧光素酶报告载体(SIRT2-Wt-psiCHECK-2)中荧光素酶的活性,但不影响SIRT23′UTR突变型�
- 蔡春波刘敏杨阳张万锋高鹏飞曹果清李步高郭晓红
- 关键词：增殖成脂分化靶基因
- 一组影响母猪繁殖性能的基因及其筛选方法
- 本发明提供了一组影响母猪繁殖性能的基因及其筛选方法，属于母猪繁殖性能影响因素研究技术领域。本发明提供的影响母猪繁殖性能的基因为14个，分别为：PALM2、C9orf152、TXN、SVEP1、LPAR1、NUCB2、RP...
- 高鹏飞李咏诗李步高曹果清郭晓红路畅
- UCP3基因调控C2C12细胞增殖的研究被引量：2
- 2021年
- [目的]本文旨在探究UCP3基因对C2C12成肌细胞增殖的调控作用。[方法]构建慢病毒包被的UCP3基因过表达和干扰载体,转染C2C12细胞,分别促进和抑制UCP3基因的表达;通过CCK-8和EDU染色试验检测C2C12细胞的增殖效果,采用qRT-PCR技术检测细胞增殖和凋亡的相关基因表达量的变化,利用Western Blot方法检测细胞增殖关键蛋白PCNA的变化。[结果]CCK-8和EDU染色试验结果发现,与过表达对照组(OE-NC)相比,UCP3基因过表达组(OE-UCP3)细胞的增殖速度极显著降低(P<0.01),细胞增殖相关基因PCNA和Ki67的mRNA表达量极显著降低(P<0.01),细胞凋亡相关基因Bax和caspase3的表达量极显著升高(P<0.01);细胞增殖关键蛋白PCNA的含量也极显著降低(P<0.01)。与干扰对照组(Sh-NC)相比,UCP3基因干扰组(Sh-UCP3)细胞的增殖速度显著增加(P<0.05),细胞增殖相关基因PCNA和Ki67的mRNA表达量极显著增加(P<0.01),细胞凋亡相关基因Bax和caspase3的表达量显著降低(P<0.05),细胞增殖关键蛋白PCNA的含量也显著升高(P<0.05)。[结论]UCP3基因可能通过抑制细胞增殖基因PCNA和Ki67的表达,促进细胞凋亡基因Bax和caspase3的表达而抑制C2C12细胞的增殖。该结果为骨骼肌中UCP3的功能研究提供基础数据。
- 何志强黑伟张万锋张燕伟吴怡琦蔡春波杨阳高鹏飞李步高郭晓红
- 关键词：C2C12细胞细胞增殖细胞凋亡
- 猪用液态发酵全价饲料及其制备方法与应用
- 本发明提供一种猪用液态发酵全价饲料及其制备方法与应用。发酵所用菌种配方包括植物乳杆菌、戊糖片球菌、枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌，各菌液以1:1:1:1的比例混合得到复合菌液；发酵所用饲料为全价饲料，菌液添加量为6～8％。本...
- 杨阳李步高武一帆郭晓红曹果清赵燕巩天野魏强利王连廷
- 利用CRISPR/Cas9系统敲除猪GOT1基因的方法
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及利用CRISPR/Cas9系统敲除猪GOT1基因的方法。本发明提供特异性靶向猪GOT1基因的sgRNA、包含该sgRNA的CRISPR/Cas9基因敲除载体、利用该载体进行猪GOT1基因敲...
- 成志敏蔡春波李步高张宁芳张万锋郭晓红高鹏飞曹果清
- 文献传递
- 仔猪不同发育阶段结肠微生物菌群特征分析被引量：15
- 2019年
- 旨在通过高通量测序技术比较马身猪与晋汾白猪不同生长发育阶段结肠微生物菌群结构与特征的差异。本研究以马身猪和晋汾白猪为试验对象,分别在仔猪1、28和70日龄3个阶段随机挑选体重相近的3头公猪,采用16S rRNA高通量测序技术对结肠微生物多样性进行研究。通过菌群分类学分析发现,两个品种仔猪肠道微生物分布于15个门、28个纲、59个目、100个科、290个属。厚壁菌门和拟杆菌门为优势菌门,平均所占比例分别为49.03%、31.94%。仔猪刚出生时品种间肠道微生物多样性差异不显著,随着仔猪生长发育,各品种微生物多样性出现极显著升高,在晋汾白猪仔猪保育阶段(28~70 d)基本趋于稳定。两品种仔猪不同阶段的特异菌群随着日龄增加出现显著差异。关联分析发现,肠道菌群与血清中内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)浓度之间存在显著相关性(P<0.05),而与二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸(D-LA)浓度相关性不显著(P>0.05)。不同品种间,与LPS、TNF-α、IL-6显著相关的结肠微生物菌群存在差异。综上表明,仔猪结肠微生物菌群结构与组成在不同品种、不同生长发育阶段均存在显著差异,对仔猪免疫性能具有重要作用。
- 郭晓红郭玉龙刘亚丹刘娟史文倩董磊蔡春波曹果清李步高高鹏飞
- 关键词：结肠
- 一种猪舍巡检小车
- 本发明公开一种猪舍巡检小车，包括移动组件、车体、工控机、传输天线、激光雷达、连接杆、环境传感器组件、相机安装座、相机组件、监控云平台和移动终端，所述移动组件用于小车整体的移动，所述移动组件上固定有车体，所述车体内安装有工...
- 李步高张吴平郭昭东尹哲张嘉敏杨杰薛淇元赵其昕陈森连润楠
- 猪肌源性前体脂肪细胞的分离培养和成脂诱导分化研究被引量：10
- 2018年
- 本研究旨在建立猪肌源性前体脂肪细胞的体外培养体系,并探究成脂诱导分化过程中相关基因的表达,为进一步研究调控猪肌内脂肪沉积的分子机制提供试验材料。采集15日龄仔猪的背最长肌组织,使用Ⅱ型胶原酶进行消化,分离获得前体脂肪细胞,进行原代、传代培养以及成脂诱导,观察细胞形态、测定生长曲线、油红O染色鉴定以及检测成脂关键基因PPARγ、FABP4、C/EBPα、C/EBPβ、ZFP423、SREBP1、PRDM16和HSL在诱导分化过程中的表达量。结果表明,分离的猪肌源性前体脂肪细胞在6～7 h,发现少量细胞开始贴壁,贴壁的细胞呈似圆型、小梭型以及其它不规则形状,经传代后细胞形态均一,呈典型的成纤维细胞样,细胞的生长曲线呈S型。添加分化培养基进行诱导后,所有基因在细胞分化的早期均有表达,FABP4、C/EBPα、SREBP1与PPARγ基因在分化早期表达量极显著升高(P <0. 01),在后期表达量极显著下降(P <0. 01),C/EBPβ、ZFP423和PRMD16基因的表达量在分化过程中未见显著变化,HSL的表达量随着分化进行极显著降低(P <0. 01)。在诱导分化12 d左右,油红O染色呈现红色。综上表明,本研究成功建立了猪肌源性前体脂肪细胞的分离与培养体系,进行成脂诱导分化,揭示分化过程中关键基因的表达规律,为进一步研究猪肌内脂肪沉积的分子机制和改善肉质品质奠定基础。
- 张宁芳成志敏乐宝玉秦本源王媛媛王鹤洁高鹏飞郭晓红李步高曹果清
- 关键词：肌内脂肪成脂分化
- 一种猪肌组织发育相关基因MYH7的表达检测方法
- 本发明提供了一种猪肌组织发育相关基因MYH7的表达检测方法，包括引物设计与合成、RNA的提取、cDNA的合成、实时荧光定量PCR反应、PCR产物的鉴定，所述引物设计与合成以18S为内参基因，根据NCBI genebank...
- 王海珍高鹏飞郭晓红曹果清李步高
- 文献传递
