李洁
- 作品数：57 被引量：116H指数：6
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省卫生厅重大招标项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 含表皮干细胞组织工程皮肤的构建研究
- 目的:用表皮干细胞和成纤维细胞作为种子细胞研制一种增殖能力强的具有表皮、真皮的组织工程化人工复合皮肤。方法:从幼儿包皮中分离表皮干细胞,用胶原Ⅳ纯化、富集表皮干细胞,接种在3T3细胞滋养层上,将体外传代培养的表皮干细胞和...
- 胡葵葵戴育成李剑雷英袁敬东李洁吴琼
- 关键词：表皮干细胞成纤维细胞种子细胞免疫组化
- 文献传递
- 一例不典型新生儿猫叫综合征的遗传学分析被引量：6
- 2018年
- 目的对1例仅表现为哭声无力，声音嘶哑，无特殊面容，不伴有先天性心脏病等其他症状或体征的不典型新生儿猫叫综合征患儿的临床及遗传学特点进行分析。方法对患儿及其父母外周血淋巴细胞G显带染色体核型分析，对患儿用应荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization, FISH）进行验证，之后用染色体微阵列法（chromosome microarray analysis, CMA）进一步精确遗传学分析。结果患儿染色体核型分析结果为46，XX，del（5）（p14p15），其父母外周血染色体核型分析未见异常。FISH结果证实了此缺失的存在。染色体微阵列检测结果显示患儿chr5p15．33p14．1区域存在25．7Mb片段缺失。结论猫叫综合征患者个体表型可存在较大差异，尤其是对于新生儿易导致漏诊、误诊。应用细胞遗传学与分子遗传学技术相结合的综合分析有利于弥补单一方法的不足，更加精确地对缺失片段进行定位。
- 贺文凤陈贺牟海燕李洁
- 关键词：猫叫综合征染色体核型分析荧光原位杂交
- 含表皮干细胞组织工程皮肤的构建研究被引量：8
- 2007年
- 目的用表皮干细胞和成纤维细胞作为种子细胞研制一种增殖能力强的具有表皮、真皮的组织工程化人工复合皮肤。方法从幼儿包皮中分离表皮干细胞，用胶原Ⅳ纯化、富集表皮干细胞，接种在3T3细胞滋养层上，将体外传代培养的表皮干细胞和真皮成纤维细胞分别接种在经冷冻干燥及戊二醛交联的Ⅰ型胶原基质网架的两侧，在液面下培养3周后，改为气-液界面培养，构建含表皮干细胞的复合皮肤，并进行组织学、免疫组织化学及电镜观察。结果表皮干细胞呈克隆状生长，G0/G1期细胞和a6^briCD71^dim细胞百分率明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），实验组K19免疫细胞化学染色呈阳性，对照组呈阴性。光镜下观察可见体外培养的含表皮干细胞的人工复合皮肤，具有表皮和真皮，表皮层由基底至浅层可见3—5层细胞，角蛋白免疫组化染色阳性。结论表皮干细胞种植于胶原海绵膜上，可生成全层组织工程皮肤，具备了同正常皮肤类似的结构，表明其具有在体外分化成表皮的能力。
- 胡葵葵戴育成李剑雷英袁敬东李洁吴琼
- 关键词：表皮干细胞
- 白细胞介素2激活的骨髓细胞增殖及抗瘤活性观察
- 1998年
- 采用ＭＴＴ法和３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测白介素２激活的骨髓细胞增殖及抗瘤活性。结果显示：骨髓细胞初始培养浓度以１×１０６／ｍｌ，白介素２浓度为１０００ｕ／ｍｌ，细胞培养时间３ｄ时骨髓细胞增殖活性最好、抗瘤活性最强。激活后的骨髓细胞表型以ＣＤ＋１６、ＣＤ＋５６比例升高为主。单用白介素２时ＣＦｕ－ＧＭ形成率下降。白血病患者停化疗药后７ｄ以内的骨髓体外培养时增殖活性受抑制。
- 陈国安袁利亚李洁王茹萍戴育成王晓莉罗敏智漆映辉张水生温美琨
- 关键词：白细胞介素骨髓细胞增殖抗肿瘤
- 冻存前后脐带间充质干细胞生物学特性的比较被引量：6
- 2014年
- 目的比较冻存对脐带间充质干细胞生物学特性的影响,为其更广泛的应用提供基础。方法实验于2009年至2010年在南昌大学第二附属医院分子医学实验室、血液病研究所完成。(1)实验材料:剖宫产胎儿脐带取自自愿捐献者,实验经医学伦理委员会批准。(2)采用胶原酶消化法从脐带中分离培养间充质干细胞。(3)将传至第3代的细胞冻存半年后复苏。(4)通过显微镜观察细胞形态,通过流式细胞仪检测细胞的表面标志,体外诱导分化为软骨及脂肪细胞检测其多向分化能力,比较复苏前后上述指标的差异。结果脐带经胶原酶消化法所获得的细胞培养至第3代细胞呈长梭形,排列有明显方向性,细胞排列成网状、辐射状,冻存复苏后期形态学无明显改变。培养至第3代的细胞高表达CD29、CD54、CD166,不表达CD13、CD34、CD45、CD31、HLA-DR,冻存复苏后的细胞表达与未冻存的细胞无统计学差异。MSC在体外分别向脂肪细胞及软骨细胞诱导分化,以油红O染色后可见染为红色的阳性细胞为脂肪细胞,经阿新兰染色后可见为蓝色的阳性细胞为软骨细胞,冻存复苏后的脐带间充质干细胞细胞也可向脂肪及软骨细胞分化。结论脐带作为一种新的MSC来源,可成为脐血和骨髓MSC的替代来源,并且冻存对MSC的生物学特性无明显改变,使其能更广泛地用于科研和临床前试验。
- 李洁傅勇辉吴琼孙万磊袁铿
- 关键词：脐带间充质干细胞生物学特性冻存
- CD_3AK细胞对烧伤患者免疫功能的影响
- 2000年
- 通过检测患者淋巴细胞转化功能及 NK细胞活性 ,调查 CD3AK细胞对烧伤患者免疫功能的影响。结果发现 :CD3AK细胞使 T细胞转化为母细胞能力增强 ,NK细胞活性升高 ,表明 CD3AK细胞能改善烧伤患者免疫功能低下的状态 ,促进细胞免疫功能的恢复。
- 李光金詹剑华李洁曹勇李国辉
- 关键词：CD3AK细胞烧伤淋巴细胞转化NK活性免疫抑制
- 干扰CHD1L基因对肝内胆管细胞癌细胞系增殖和侵袭的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨沉默CHD1L基因对肝内胆管细胞癌(ICC)细胞系增殖和侵袭的影响。方法采用Western blot和q RT-PCR法检测三种ICC细胞系(RBE、HCCC-9810、HUCCT1)中CHD1L蛋白和mRNA的表达;选择CHD1L高表达的ICC细胞系,将CHD1L-RNAi转染该细胞后,用Western blot法筛选出干扰效果最好的CHD1L-RNAi;应用CCK-8法、平板克隆集落形成实验、细胞划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测转染CHD1L-RNAi后细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果 CHD1L蛋白和mRNA水平在RBE细胞系中明显高于HCCC-9810和HUCCT1细胞系(P=0.003,P=0.012和P=0.008,P=0.015);CHD1L-RNAi1的干扰效果明显优于CHD1L-RNAi2和CHD1L-RNAi3(P=0.003,P=0.008);干扰CHD1L的表达,结果显示CHD1L-RNAi1组的增殖率、集落形成数、迁移率和穿膜的细胞数明显低于未处理组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰CHD1L基因能有效抑制RBE细胞系的增殖、迁移及侵袭能力。
- 李师淼花京文袁汀浩丁炎宝熊虎李洁曹青黄长文
- 关键词：RNAI肝内胆管细胞癌增殖迁移
- CTLL-2细胞的复苏及培养条件的探讨
- 1999年
- 目的:探讨CTLL-2细胞(细胞毒性T淋巴细胞株)的复苏及培养的最佳条件,解决实验室CTLL-2细胞经液氮冻存后复苏难的问题。方法:将从液氮取出复苏后的CTLL-2细胞分为两组,在实验组培养体系中加大IL-2的剂量,使终浓度为1000U/ml;对照组培养体系中IL-2剂量终浓度为300U/ml,培养观察。结果:实验组与对照组比较实验组CTLL-2细胞静止期缩短,细胞折光率强,有增殖现象,细胞形态明显优于对照组。实验组复苏一周后进入正常细胞周期,而对照组细胞数量减少,细胞萎缩最终死亡。值得一提的是实验组进入正常细胞周期后逐渐递减培养体系中的IL-2含量,最后维持在一个恒定的剂量上,CTLL-2细胞仍然稳定增殖传代,这时的CTLL-2细胞可以用来检测IL-2的反应性,这种培养方法的建立解决了实验室CTLL-2细胞复苏难的问题。
- 袁铿袁芳李洁
- 关键词：细胞毒性T淋巴细胞细胞培养白细胞介素2
- 肝素对人髓性白血病细胞系K562生长的影响
- 2003年
- 目的 :探讨肝素对髓性白血病细胞系K5 6 2增殖及凋亡的影响。方法 :采用细胞直接计数法和MTT法检测肝素对K5 6 2细胞增殖的影响 ,应用流式细胞术和Hoechst 33342荧光染色法检测肝素对长春新碱诱导的K5 6 2细胞凋亡的影响。结果 :5～ 2 0 0U/ml的肝素既不促进也不抑制K5 6 2细胞的增殖 ,且能抑制长春新碱诱导的K5 6 2细胞凋亡。抑制长春新碱诱导的K5 6 2细胞凋亡作用 ,并与肝素呈量效关系。结论 :肝素对K5 6 2细胞增殖无影响 ,但具有抑制长春新碱诱导的K5 6
- 李振江文珠戴育成李洁李剑
- 关键词：肝素长春新碱细胞增殖
- 人脐血造血细胞体外扩增与表面标志的关系被引量：2
- 1998年
- 目的：对脐血造血细胞体外扩增及移植的最佳时机选择进行探讨。方法：使用SCF，rIL－3，rIL－1β和rlL－6长期培养人脐血造血细胞，观察其体外扩增与表面标志的变化。结果：培养14天细胞增殖达高峰，28天下降，但仍为第7天的29．88倍。CD细胞第14天达高峰，28天后仍维持一定水平。HLA－DR+细胞培养14～21天达高峰，第35天仍较高。CD细胞培养第7天显著增多，14～21天达高峰，28天后明显下降。结论：此培养体系能够促进脐血造血细胞增殖、扩增，并维持其存活。14天造血细胞数量最多，状态最佳，适于移植。
- 文珠戴育成胡爱国李洁
- 关键词：脐血造血细胞体外扩增
