李茉
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
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- 发文基金：黑龙江省卫生厅科研项目哈尔滨市科技攻关计划项目黑龙江省青年科学基金更多>>
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- 粗提和纯化的HPV16L1重组蛋白为抗原的ELISA比较
- 2008年
- 为评价真核及原核细胞表达的HPV16L1粗提蛋白代替纯化的16L1蛋白作为ELISA检测抗原的可行性。实验分别用大肠埃希菌表达的HPV16L1纯化蛋白,表达16L1的大肠埃希菌破碎物及表达16L1的昆虫细胞破碎物作为抗原。在ELISA试验中与抗HPV16L1的单克隆抗体进行反应。结果证实3种包被抗原可以得出非常相近的OD值变化趋势。表明用表达16L1的大肠埃希菌破碎物和表达16L1的昆虫细胞破碎物可以代替纯化的HPV16L1蛋白作为抗原进行ELISA试验。
- 李茉王燕陈思佳魏兰兰谷鸿喜
- 关键词：重组蛋白ELISA
- 重组人乳头瘤病毒16型E6蛋白的表达、纯化和动物免疫效果分析被引量：2
- 2008年
- 目的诱导表达人乳头瘤病毒16型（HPVl6）E6蛋白，制备可溶性蛋白，并通过动物免疫进行免疫效果评估。方法采用IPTG诱导pQE30-HPVl6E6／BL21（DE3）重组菌株，表达产物经SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定。提取包涵体进行变性处理，变性蛋白经Ni^2＋金属螯合层析纯化，将纯化产物用复性透析方法处理以获取可溶性蛋白。免疫BalB／c小鼠，检测血清抗体、CD4^＋／CD8^＋和IFN-γ。结果诱导后重组菌有相对分子量18000蛋白质表达，以不溶性包涵体为主要表达方式。目的蛋白可与HPV16E6多克隆抗体识别，纯化和透析处理后得到可溶性的蛋白。小鼠免疫后血清抗体滴度升高，淋巴细胞CD4^＋／CD8^＋升高，IFN-γ未见升高。结论成功表达了HPV16E6蛋白，同时处理包涵体并制备了可溶性目的蛋白。目的蛋白可刺激小鼠体内产生有效的免疫反应，该蛋白的成功制备为患者血清抗体的检测和肿瘤细胞杀伤的免疫研究奠定了坚实基础。
- 商庆龙王燕陈思佳李承刚韩聪邵迪李茉谷鸿喜
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E6蛋白纯化免疫
- 5’-RACE法扩增抗人乳头瘤病毒16型L1蛋白单克隆抗体轻链可变区基因及序列分析
- 2008年
- 目的获得抗人乳头瘤病毒16型（HPV16）L1蛋白单克隆抗体的轻链可变区（VL）基因并分析序列。方法从分泌抗HPVl6L1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA，逆转录形成CD-NA，用5’-RACE策略扩增抗体轻链可变区基因，经琼脂糖凝胶电泳鉴定，并测序及进行序列分析。结果VL基因全长336bp，编码112个氨基酸，基因测序结果符合小鼠抗体轻链可变区特征。结论5’-RACE法成功获得了抗HPV16L1蛋白的单克隆抗体轻链可变区基因的真实序列，为基因工程抗体研究奠定了良好基础。
- 王燕商庆龙陈思佳邵迪韩聪李茉谷鸿喜
- 关键词：人乳头瘤病毒16型轻链可变区单克隆抗体
- HPV16L1VLP纯化、鉴定及血凝抑制实验方法的建立
- 2007年
- 摘要通过昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达HPV16L1 VLP,纯化鉴定后利用其建立血凝抑制实验,检测HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。利用重组杆状病毒感染悬浮培养的昆虫细胞表达HPV16L1蛋白,大量获得VLP;优化扩增蛋白的条件并用SDS-PAGE分析鉴定;经氯化铯密度梯度离心法纯化VLP;利用所得VLP建立血凝抑制试验,鉴定制备的HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制活性。优化蛋白表达条件结果显示,当重组杆状病毒感染细胞的MOI=10时目的蛋白表达量最大;按此滴度感染悬浮培养的昆虫细胞,收获、纯化VLP并鉴定其特异性;利用所得VLP建立了血凝抑制实验,鉴定HPV16L1单克隆抗体的血凝抑制效价为1∶16。建立的血凝实验,可用于鉴定和检测HPV16L1相关抗体,为HPV诊断试剂的开发提供实验基础。
- 邵迪王燕谷鸿喜韩聪李茉商庆龙李承刚
- 关键词：人乳头瘤病毒16型病毒样颗粒血凝抑制
- 模拟器在胃肠内窥镜培训中的应用被引量：7
- 2019年
- 基于模拟器的胃肠内窥镜培训在过去几十年里被广泛地研究并获得了认可,已经验证了几种类型的模拟器,如机械模拟器、虚拟现实(VR)模拟器、离体和体内模型,并且证实了在早期训练中使用模拟器可以缩短学习曲线,快速掌握各种操作手法和技巧。通常机械模拟器和VR模拟器用于初级内镜培训,离体和体内模型用于高级的内镜培训(如ERCP、EUS等)。而用于更多常规干预治疗如息肉切除术、EMR、支架置入和止血的验证模型还很稀缺,应鼓励这些领域的发展。
- 李茉徐洪雨
- 关键词：模拟器培训计算机模拟
- 粗提和纯化的HPV16L1重组蛋白为抗原的ELISA实验比较
- 目的：评价真核及原核细胞表达的人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)16L1粗提蛋白代替纯化的HPV16L1蛋白做为酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent as...
- 李茉
- 关键词：人乳头瘤病毒HPV16L1重组蛋白ELISA抗原血清学检测
- 人乳头瘤病毒16型L1蛋白表达及其单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
- 2007年
- 目的表达并纯化重组人乳头瘤病毒16型（HPV16）L1蛋白，建立分泌抗HPV16 L1单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。方法以基因工程表达HPV16L1蛋白。用Ni—NTA技术进行纯化后免疫BALB／c小鼠，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，经含次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶（HAT）的选择培养基及有限稀释法进行克隆化，用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞，对获得的杂交瘤细胞株染色体进行计数．同时测定细胞培养上清mAb的效价。结果筛选出2株可分泌抗HPV16 L1 mAb的杂交瘤细胞，命名为AE3和AG7，染色体数分别为130条和98条。2株杂交瘤细胞AE3和AG7培养上清的效价分别为1：5120和1：80。结论成功建立了2株可分泌抗HPV 16 L1 mAb的杂交瘤细胞，为进一步研制HPV感染检测试剂盒提供实验基础。
- 王燕商庆龙谷鸿喜韩聪邵迪李茉李承刚
- 关键词：宫颈肿瘤L1蛋白
