梁瑜
- 作品数:40 被引量:145H指数:6
- 供职机构:南华大学更多>>
- 发文基金:湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金湖南省卫生厅重点课题更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 日本血吸虫核苷二磷酸激酶基因的获得和序列分析
- 2004年
- 目的 从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)成虫cDNA文库中筛选日本血吸虫新基因 ,为日本血吸虫病的防治提供药物靶标或候选疫苗。方法 筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,随机挑取重组阳性克隆进行DNA测序 ,再对新基因序列进行步移法测序获取全长cDNA ,并利用生物信息学技术对其进行分析。结果 获得了 1个编码日本血吸虫核苷二磷酸激酶新基因的cDNA序列(AY2 2 6980 ) ,全长 5 94bp ,编码 1 5 7个氨基酸 ,编码蛋白与人类或鸽、鸡、鼠及果蝇的核苷二磷酸激酶高度同源。结论 利用表达序列标签法、步移法测序和生物信息学技术三者相结合 ,成功获得了编码日本血吸虫核苷二磷酸激酶基因的cDNA序列。
- 张愉快肖建华梁瑜曾桥万志刚廖力
- 关键词:日本血吸虫二磷酸核苷激酶CDNA文库表达序列标签生物信息学
- 日本血吸虫黏蛋白样蛋白部分基因的扩增及测序被引量:2
- 2004年
- 目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株黏蛋白样蛋白 (SjMLP)抗原的部分基因序列。 方法 利用PC GENE软件查找SmMLP的抗原决定簇 ;特定寡核苷酸引物的设计与合成 ;Trizol抽提日本血吸虫成虫总RNA ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增目的基因 ,测序后与SmMLP进行同源性分析。 结果 RT PCR特异性扩增出SjMLP编码区基因序列 ,其片段大小为 75 6bp ,测序结果与SmMLP具有高度同源性。 结论 RT PCR扩增的SjMLP抗原编码区基因序列与预期相符合。
- 刘彦肖建华廖力曾谷清张愉快杨胜梁瑜
- 关键词:日本血吸虫基因扩增抗原逆转录聚合酶链反应
- 日本血吸虫磷酸甘油酸激酶基因T/A克隆及序列分析被引量:2
- 2005年
- 目的获取日本血吸虫磷酸甘油酸激酶(SjPGK)编码基因片段,分析其核苷酸序列,为日本血吸虫病疫苗研制提供候选抗原分子。方法根据曼氏血吸虫磷酸甘油酸激酶(SmPGK)cDNA序列设计1对引物,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法,从日本血吸虫成虫总RNA中扩增SjPGK基因片段。利用T/A克隆法,将其克隆入pMD18T载体,经双酶切分析和PCR鉴定,将阳性克隆进行脱氧核糖核酸序列测定;运用Blast程序,将测序结果及其推导的编码氨基酸序列与NCBI数据库在核苷酸水平和氨基酸水平进行同源性比较。结果RTPCR特异性扩增出1条长约830bp大小的条带;经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pMD18TSjPGK中含有所扩增的基因序列;脱氧核糖核酸序列测定和分析,SjPGK基因片段长为830bp,与SmPGK的核苷酸同源性为85%,分值为672;氨基酸同源性为94%,分值为473。结论成功克隆SjPGK编码基因片段,为进一步实验提供了条件。
- 梁瑜肖建华廖力伍和平张愉快刘传爱杨秋林
- 关键词:血吸虫
- 多层次综合性医学虚拟仿真实验教学中心的建设与成效分析被引量:34
- 2016年
- 虚拟仿真实验教学在医学教育中发挥着重要作用。建立开放、资源共享的综合性医学虚拟仿真实验教学平台,是培养医学创新人才的主要途径。南华大学医学院通过建设医学虚拟仿真实验教学中心,开展了虚拟仿真实验教学,促进了学生实践创新能力的培养,提高了教学质量。
- 李忠玉刘良专梁瑜周文化何战胜陈熙
- 关键词:医学教育
- 浅谈手机文化在高校课堂教学中的利与弊
- 2016年
- 科技给人们的生活带来了重大影响,其中最为显著的表现是目前盛行的科技产品——手机。手机已成为人们日常生活中必不可缺的交流工具之一,手机文化也逐渐融入校园文化。然而,它是一把“双刃剑”,它给我们带来许多便利的同时,也带来了许多困扰,我们要找到消除手机文化对高校学生的校园生活的消极影响的方法。
- 肖国华梁瑜何战胜洪丽陈文昭
- 关键词:大学生手机文化
- 日本血吸虫感染小鼠的髓源抑制细胞对T细胞的免疫抑制被引量:3
- 2019年
- 目的:研究日本血吸虫感染小鼠模型中的髓源抑制细胞(MDSCs)的免疫抑制功能及对T细胞的作用机制。方法:构建日本血吸虫感染BALB/c小鼠模型,流式细胞术检测MDSCs动态比例变化,免疫磁珠分选小鼠骨髓中单核系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G-)和粒系MDSCs (CD11b^+Gr1^+Ly6G^+)亚群细胞,Write-Giemsa染色进行形态学鉴定; CFSE法检测单核系和粒系MDSCs亚群对CD4^+T、CD8+T细胞增殖的抑制作用,Real-time PCR方法检测细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-13、TGF-β和精氨酸酶(ArgⅠ)、一氧化氮合酶2(NOS2)的表达。结果:血吸虫感染模型小鼠的MDSCs较对照组小鼠明显增多,以粒系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G+)亚群增多为主。两个亚群细胞均能降低CD4+T、CD8+T细胞的增殖活性,粒系亚群MDSCs的抑制作用更显著; Real-time PCR结果显示两个亚群细胞的细胞因子IL-4、IL-10、IL-13、TNF-α、IFN-γ以及ArgⅠ、NOS2的表达水平均不同程度升高。结论:血吸虫感染模型小鼠体内的MDSCs显著增高,单核系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G-)和粒系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G+)亚群均能抑制CD4^+T、CD8^+T细胞增殖,其作用机制可能与两亚群细胞均能上调相关细胞因子IL-4、IL-10、IL-13和ArgⅠ、NOS2的表达有关。
- 高勇强黎丽胡丽梁瑜曹劲松肖建华
- 关键词:日本血吸虫免疫抑制T细胞
- 医学留学生人体寄生虫学全英文教学体会被引量:6
- 2015年
- 留学生教育已经成为高等医学院校教育事业中的一项重要工作,人体寄生虫学是医学留学生教学的必修科目。文章从教学对象、教师素质、教学内容、教学方法及实践基地等方面,分析和总结医学留学生人体寄生虫学全英文教学的经验及体会,进一步提高医学留学生的教学质量,为医学院校开展留学生教育提供参考。
- 刘彦张愉快邹菊梁瑜
- 关键词:人体寄生虫学留学生教育全英文教学
- 乙型肝炎病毒对HepG2细胞IL-17R信号通路的影响
- 2012年
- 目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)重组腺病毒对HepG2细胞的IL-17R和接头蛋白Act1表达的影响,以及HBV对IL-17诱导NF-B活化的影响.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测HepG2细胞的IL-17、IL-17R和Act1的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IL-17R和Act1的蛋白表达;免疫荧光检测NF-B核移位;ELISA检测上清的IL-17含量.结果:各组HepG2细胞培养上清液中均未检测到IL-17且亦未检测HepG2细胞有IL-17的mRNA表达;HBV重组腺病毒组的IL-17R mRNA和蛋白的表达明显低于相应浓度对照组(0.68±0.02vs0.89±0.03,0.33±0.06vs0.81±0.01,0.12±0.01vs0.86±0.05,P<0.05;蛋白:0.84±0.12vs1.01±0.13,0.56±0.09vs1.01±0.08,0.24±0.08vs0.98±0.05),且呈剂量和时间依赖性.但HBV重组腺病毒组与对照组比较,对HepG2细胞接头蛋白Act1的mRNA和蛋白表达水平无明显影响;同时HBV重组腺病毒能抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化.但HBV重组腺病毒与对照组比较,对接头蛋白Act1在mRNA和蛋白表达水平上影响无明显变化;同时HBV重组腺病毒能抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化.结论:HBV重组腺病毒可降低HepG2细胞的IL-17R mRNA和蛋白的表达,抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化,对HepG2细胞的IL-17R信号通路发挥抑制作用.
- 李映菊汪煜华高勇强梁瑜刘俊彭莉肖建华
- 关键词:乙型肝炎病毒重组腺病毒HEPG2细胞
- 检测日本血吸虫感染性钉螺环介导等温扩增方法的建立被引量:8
- 2009年
- 为建立检测日本血吸虫感染性钉螺的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,利用PrimerExplorer V3软件设计4条扩增血吸虫尾蚴钙结合蛋白基因的LAMP引物,酚氯仿法提取血吸虫感染性钉螺、阴性钉螺及肝吸虫感染豆螺基因组DNA进行LAMP反应,LAMP产物经显色、电泳、酶切及DNA序列分析鉴定。在100个阴性钉螺中分别加入20、10、8、6、4、2、1个阳性钉螺,提取DNA后进行LAMP扩增来检测该法的群体检测效果。结果显示,感染性钉螺检测管经显色后呈绿色(阳性),对照组呈棕色(阴性);感染性钉螺LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性钉螺及感染肝吸虫豆螺无扩增产物;酶切及序列分析结果显示扩增产物为目的基因;LAMP可检测到100个阴性钉螺中含有阳性钉螺的最低数为2。结果表明,检测日本血吸虫感染性钉螺的LAMP方法特异、简便及具有较好的群体检测效果。
- 邓鹏程张如胜梁瑜张愉快杨秋林
- 关键词:日本血吸虫湖北钉螺环介导等温扩增技术
- 日本血吸虫乳酸脱氢酶基因的获得和序列分析被引量:2
- 2004年
- 目的 从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)成虫cDNA文库中筛选日本血吸虫新基因 ,为日本血吸虫病的诊断或防治提供靶抗原。 方法 筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,随机挑取重组阳性克隆进行DNA测序 ,再对新基因序列进行步移法测序获取全长cDNA ,并利用生物信息学技术对其进行分析。 结果 获得了 1个新基因 ,其cDNA全长 12 5 1bp(AY2 2 5 190 ) ,编码 3 3 1个氨基酸 ,编码蛋白与人类或螈、蟾蜍、鸡、鼠及猪等其它生物的乳酸脱氢酶高度同源。 结论 利用表达序列标签法、步移法测序和生物信息学技术三者相结合 ,成功获得了编码日本血吸虫乳酸脱氢酶基因的cDNA全长序列。
- 刘传爱肖建华梁瑜曾桥万志刚杨秋林
- 关键词:日本血吸虫乳酸脱氢酶表达序列标签生物信息学