樊松 作品数:236 被引量:915 H指数:14 供职机构: 安徽医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家临床重点专科建设项目 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 建筑科学 机械工程 更多>>
人PKD2基因慢病毒的构建及其对常染色体显性遗传性多囊肾病小鼠肾脏上皮细胞多囊蛋白-2和Wnt/β-catenin信号通路的修复作用 被引量:2 2018年 目的构建携带人PKD2基因的重组慢病毒载体,并探讨该载体对Pkd2缺失小鼠肾脏上皮细胞中多囊蛋白-2(PC2)的表达,以及对下游Wnt/β-catenin信号通路的作用。
方法2016年8月至2017年2月采用XbaⅠ和XhoⅠ酶将PKD2基因从已有pcDNA3.1-TM-PKD2质粒中切出,并插入慢病毒空载体pLV-sfGFP_2A_Puro,测序验证后获得重组慢病毒载体pLV-sfGFP-PKD2。然后,将重组慢病毒载体与包装质粒共脂质体转染293T细胞,包装病毒,获得病毒浓缩液。按照实验组(pLV-sfGFP-PKD2病毒感染)、对照组(pLV-sfGFP病毒感染)和空白组(未感染)进行分组,分别处理携带Pkd2基因的B3、D3细胞(Pkd2+/-)和Pkd2缺失的B2、E8细胞(Pkd2-/-),采用蛋白质印迹法、免疫荧光染色法检测PC2表达情况。最后,选取B3和B2细胞,利用增殖细胞核抗原(PCNA)荧光染色检测细胞增殖活性,实时荧光定量PCR检测PKD2下游Wnt/β-catenin信号通路的变化。
结果重组慢病毒载体酶切后凝胶电泳结果显示插入片段与PKD2基因一致,基因测序结果显示PKD2插入方向正确。经pLV-sfGFP-PKD2病毒感染后,实验组B2和E8细胞的PC2表达量分别为0.668±0.013和0.763±0.021,空白组B3和D3细胞的PC2表达量分别为0.687±0.015和0.776±0.008,差异均无统计学意义(P=0.164,P=0.409)。实验组B2细胞增殖活性(0.573±0.010)明显低于空白组(0.848±0.031),差异有统计学意义(P〈0.01);与空白组B3细胞(0.585±0.017)比较差异无统计学意义(P=0.369)。实时荧光定量PCR检测结果显示,实验组B2细胞中的Wnt7a和β-catenin基因表达量分别为0.037±0.005和0.554±0.008,与空白组B3细胞的0.037±0.004和0.571±0.013比较差异均无统计学意义(P=0.969,P=0.640)。
结论本研究成功构建携带人PKD2基因并具有感染能力的重组pLV-sfGFP-PKD2慢病毒,慢病毒可重建PKD2基因缺失的小鼠肾脏上皮� 孟佳林 徐雨辰 沈旭峰 李奥 樊松 郝宗耀 吴冠青 梁朝朝关键词:多囊肾 常染色体显性 WNT/Β-CATENIN信号通路 慢病毒 可视穿刺辅助经皮肾镜与输尿管软镜治疗肾盏憩室结石的比较 被引量:2 2021年 目的比较可视穿刺辅助经皮肾镜碎石取石术(PCNL)与输尿管软镜钬激光碎石治疗治疗肾盏憩室结石的有效性及安全性。方法回顾性分析2018年4月至2020年7月收治的9例行可视穿刺辅助PCNL(可视穿刺组)及9例行输尿管软镜(输尿管软镜组)手术共18例(男7例,女11例)肾盏憩室结石患者的临床资料。首先提取两组患者的年龄、性别、BMI、结石直径、肾盏憩室结石位置、术前尿路感染情况等;手术完成后,比较两组患者的手术时间、术后住院时间、视觉模拟量表(VAS)评分、结石清除率、术后症状缓解率和并发症发生率等。结果两组的基线数据比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。18例患者顺利完成手术。可视穿刺组中2例先由输尿管软镜检查未发现憩室口,后转入该组经可视穿刺手术顺利完成碎石取石;输尿管软镜组1例因术中憩室内出血,一期未完全碎石,二期完成碎石。两组在平均手术时间、术后症状缓解率、术后结石残留率、术后并发症发生率方面差异无统计学意义(P均>0.05)。输尿管软镜组术后住院时间[(2.33±1.00)d vs(5.44±1.01)d,P<0.01]和VAS评分[(2.00±1.00)分vs(3.56±1.13)分,P<0.01]优于可视穿刺组。结论对于肾盏憩室结石,软镜可作为首选治疗方案;若软镜无法探寻肾盏憩室,可转为可视穿刺手术,可视穿刺术亦是一种安全有效的治疗方式。 王伟 郝宗耀 王建忠 樊松 赵磊 刘明 徐雨辰 梁朝朝关键词:肾盏憩室结石 碎石术 输尿管软镜 178例膀胱结石成分结果分析 张翼飞 梁朝朝 郝宗耀 张贤生 周骏 樊松 江长琴关键词:膀胱结石 结石分析 性别 年龄 2种方法治疗输尿管上段结石的比较 被引量:7 2013年 目的比较后腹腔镜输尿管切开取石术和输尿管镜结合钬激光碎石治疗输尿管上段结石的疗效。方法统计分析2009年3月至2011年6月治疗单纯输尿管上段结石331例,其中应用后腹腔镜治疗134例。应用输尿管肾镜治疗197例。结果 134例应用后腹腔镜治疗患者中,有体外冲击波碎石史57例,合并输尿管息肉94例,同时行息肉清除,清石率100%;平均手术时间(45±23)min,时间耽搁主要在于置双J管和输尿管缝合;平均出血量3 ml,术后平均留置腹膜后引流管2.6 d,留置导尿管6.5 d,平均住院时间7.8 d。双J管留置时间4~6周,术后随访3~6个月,结石无复发,肾积水程度有不同程度减轻。197例应用输尿管肾镜钬激光治疗患者中,有ESWL史64例,合并输尿管息肉56例,术中结石残片上移至肾盂37例,清石率81.2%,平均手术时间(43±19)min,手术时间耽搁主要在于清除输尿管息肉后出血视野不清;平均出血量<2 ml,平均留置导尿管时间4.3 d,平均住院时间5.6 d。双J管留置时间4~6周,拔管前常规摄KUB平片,有结石残片残留者再次行ESWL治疗。两者比较,手术时间、出血量等无明显差异,后腹腔镜手术清石率较输尿管镜钬激光治疗高,但平均住院时间延长。结论后腹腔镜及输尿管肾镜治疗输尿管上段结石均有较好疗效,后腹腔镜清石率较高,清除输尿管息肉效果好,并可松解ESWL后输尿管瘢痕包裹;对于结石位置较高、有体外冲击波碎石史、输尿管息肉及结石部位以上输尿管扩张较为明显患者,首选后腹腔镜治疗。 张翼飞 梁朝朝 郝宗耀 张贤生 周骏 樊松 江长琴关键词:后腹腔镜 输尿管肾镜 钬激光 泌尿系结石 体外冲击波碎石术后严重并发症的处理方法 被引量:19 2014年 目的 探讨体外冲击波碎石术(ESWL)后严重并发症的处理方法. 方法 回顾性分析2008年1月至2013年6月收治的21例ESWL术后严重并发症患者的临床资料,男10例,女11例.年龄34~71岁,平均47岁.21例曾行ESWL治疗1~21次,平均3次.肾脏ESWL 14例,输尿管ESWL 7例,其中双侧同时行ESWL 1例.14例伴有发热,体温最高42.1℃.尿常规:WBC(+~+++),血常规:WBC 10.5~ 23.4× 106/L.6例SCr 230~1 110 μmol/L.21例均行B超、KUB和泌尿系CT平扫检查,5例行增强扫描.临床诊断为肾包膜下血肿3例,尿外渗伴腹膜后感染6例,肾积脓5例,急性肾功能不全6例,肾萎缩1例. 结果 3例肾包膜下出血经保守治疗3个月后血肿吸收.6例尿外渗伴腹膜后感染中,2例经留置双J管及抗感染治疗1周后体温及血象正常,症状消失,4例肾周脓肿患者经切开引流治疗后,脓腔消失,体温及血象正常.5例肾积脓中4例行输尿管镜手术或肾穿刺,解除梗阻后,症状缓解,1例重度积水肾功能丧失行肾切除术.6例肾功能不全行输尿管镜手术或逆行置双J管治疗后,4例肾功能恢复正常,2例处于氮质血症期.1例肾萎缩,肾功能丧失行肾切除术. 结论 ESWL引起的严重并发症可导致严重后果,明确诊断后应积极采取有效的措施进行处理. 周骏 梁朝朝 叶元平 刘明 施浩强 郝宗耀 张贤生 樊松关键词:体外冲击波碎石术 并发症 外科治疗 低强度体外冲击波对慢性前列腺炎模型大鼠治疗作用的研究 被引量:4 2020年 目的:探讨低强度体外冲击波(Li-ESW)对慢性前列腺炎模型大鼠的治疗作用及其最佳参数。方法:2019年4—8月取90只8周龄健康雄性SD大鼠,按随机数字表法分为对照组(C组)15只,为未建模的大鼠;模型组(M组)15只,为建模后未治疗的大鼠;不同能量密度冲击波治疗组(T组)60只,为建模后进行Li-ESW治疗的大鼠。T组采用聚焦式体外冲击波治疗仪,大鼠平卧位,探头置于前列腺解剖位置上方。治疗方案:频率3 Hz,脉冲次数500次,每周1次共4周。根据能量密度将T组分为T1(0.09 mJ/mm^2)、T2(0.20 mJ/mm^2)、T3(0.30 mJ/mm^2)、T4(0.40 mJ/mm^2)组,每组各15只。建模前各组使用von Frey纤维丝于大鼠阴囊处分别采用2、4、6 g压力测试,记录阳性反应次数,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。测痛实验1周后麻醉下采用3%卡拉胶注射大鼠前列腺两侧叶,构建慢性前列腺炎大鼠模型。建模1周后各组大鼠再次进行von Frey测痛实验,评估建模效果。然后T组开始治疗。每次治疗前各组均进行von Frey测痛实验。于治疗1、2、4周测痛实验后每组处死5只大鼠,无菌条件下剥离前列腺两侧叶行病理检查,对5个随机视野下前列腺间质的炎症细胞进行计数,每0~50个细胞记为1分,以评估炎症严重程度。结果:建模1周后,M组和各T组阳性反应次数均显著多于C组(P<0.01),M组与各T组间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后各时间点T2组与M组相比阳性反应次数均减少(P<0.05);T1、T3、T4组分别仅在治疗3周后、3周和4周后、2周后阳性反应次数少于M组(P<0.05)。T2组治疗1周后阳性反应次数开始下降,至4周后降至最低,各时间点测痛实验结果差异均有统计学意义(P<0.05)。病理检查结果显示,与C组比较,M组前列腺间质有较多炎症细胞浸润,上皮细胞排列出现紊乱。M、T1、T2、T3、T4组各时间点病理评分分别为:治疗1周后8、7、4、6、9分;2周后8、5、3、4、7分;4周后7、3 金晨 卞子辰 宋正尧 王志平 冯彬 张力 郝宗耀 樊松 杨诚 刘祎 梁朝朝关键词:前列腺炎 慢性前列腺炎 腹腔镜前列腺癌根治术手术并发症的防治 2016年 前列腺癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一,严重威胁男性健康。近年来随着人口老龄化和生活水平的提高,发病率呈现升高的趋势。前列腺癌发病率的增加与人类寿命的增长、人口老龄化、PSA检查的普及及诊断技术的改进有关。前列腺癌根治性手术是治疗局限性前列腺癌的最有效方法,手术主要包括传统的经会阴、经耻骨后及腹腔镜和机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治性术手术。 梁朝朝 樊松关键词:腹腔镜前列腺癌根治术 手术并发症 泌尿系统恶性肿瘤 局限性前列腺癌 癌发病率 根治性手术 腹膜外入路机器人辅助下腹腔镜肾部分切除术的适应症选择及临床疗效分析 目的 探讨腹膜外入路机器人辅助腹腔镜下肾部分切除术的可行性、安全性及临床价值.方法 回顾性分析了201 5年1月至2015年5月6例行腹膜外入路机器人辅助腹腔镜下肾部分切除术患者的临床资料,患者年龄34~72岁,平均年龄... 梁朝朝 周骏 王建忠 邰胜 杨诚 叶元平 施浩强 张贤生 郝宗耀 张翼飞 樊松前列腺神经内分泌细胞结构功能特点及其病理生理意义 被引量:1 2012年 前列腺神经内分泌细胞对前列腺生理和病理多方面有重要的影响,其功能的改变与前列腺疾病发病密切相关。近年来的研究发现,神经内分泌细胞是弥散神经内分泌系统(Amine Precursor Uptake and Decarboxylation,APUD)的重要组成部分。该文将前列腺内神经内分泌细胞的结构功能特点及其病理生理意义进行综述,尤其将神经内分泌细胞在前列腺癌及慢性前列腺炎发病中的作用作为讨论重点,为理解前列腺疾病的发病机制及疾病治疗提供参考。 樊松 梁朝朝关键词:前列腺 神经内分泌细胞 病理生理 输尿管软镜术前留置双J管的疗效观察 被引量:39 2016年 回顾性分析术前留置双J管对输尿管软镜钬激光碎石术手术效果的影响。137例手术患者中84例术前常规留置双J管2周,53例未留置双J管行一期手术。所有患者均顺利完成手术,两组的手术时间、结石寻及率、碎石时间、一次碎石成功率、术后住院时间、并发症发生率等指标差异均无统计学意义,可见术前留置双J管与否对于输尿管软镜钬激光碎石术效果影响不大。对于手术中发现输尿管口狭小及输尿管狭窄的患者,仍然建议通过留置双J管被动扩张增加手术成功率,以提高输尿管软镜碎石术的高效性和有效性。 郝宗耀 刘明 梁朝朝 叶元平 张贤生 施浩强 周骏 张翼飞 樊松 王克孝关键词:上尿路结石 双J管