熊鸣 作品数:17 被引量:38 H指数:3 供职机构: 中国人民解放军海军总医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
小型猪在肾脏疾病研究中的应用 2013年 随着对小型猪研究的不断深入,其作为人类疾病模型的优势日益明显,在生物医学研究中的应用也日趋增多。比较解剖学和生理学研究表明,小型猪的诸多生物学特性均与人类极为相似,尤其在肾脏的解剖和功能方面几乎是人类的复制品,使其在复制肾脏疾病模型,研究疾病发病机制和评估治疗策略等中具有无可替代的作用。本文将综述小型猪作为疾病动物模型在肾脏疾病研究中的应用。 熊鸣 王大鹏关键词:小型猪 动物模型 肾脏 疾病 长航对人体外周血细胞因子表达水平的影响 被引量:2 2012年 目的探讨执行海上编队长航任务对舰员外周血细胞因子表达水平的影响。方法采用多抗体芯片化学发光法定量比较海上任务人员(实验组)和岸基人员(对照组)外周血120种细胞因子的表达差异。结果与岸基人员相比,执行海上长航任务舰员外周血34.17%(41/120)人体细胞因子表达水平改变,其中13种细胞因子表达升高,涉及Janus激酶-信号转导及转录活化因子、有丝分裂原活化蛋白激酶等细胞信号通路,参与细胞趋化、免疫调节(尤其是细胞免疫调节)、炎症反应和细胞凋亡等重要生物学过程。结论执行海上编队长航任务124 d,部分舰员外周血多种细胞因子表达水平改变,提示海上综合作业环境在一定程度上影响长远航任务人员机体免疫功能。 熊鸣 赵晓航 朱智明 解鹏 乔媛媛 安怀杰 曲佳 何立东关键词:细胞因子 抗体芯片 免疫调节 长航 地西他滨对K562/A02细胞阿霉素耐药性的影响 被引量:1 2016年 目的:观察地西他滨(DAC)对人慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02阿霉素(ADR)耐药性的影响,探讨其作用的可能机制。方法:分别或联合应用不同浓度ADR和DAC作用于K562/A02细胞和其亲本细胞株K562,采用CCK-8法检测药物细胞毒性,Sequenom Mass ARRAY系统结合比色法评价DNA甲基化程度,流式细胞术检测K562/A02细胞细胞周期分布和细胞凋亡率。结果:K562/A02细胞较K562细胞具有显著ADR耐药性,前者ADR作用24 h的IC50约为后者的50倍。而对DAC,在0.5~8μmol/L作用浓度范围内,K562/A02细胞则较K562细胞更敏感。在相同ADR作用浓度(4.31和17.24μmol/L)下,联合1μmol/L DAC处理24 h能显著提高K562/A02细胞对ADR的敏感性,细胞存活率下降(P〈0.05)。DAC和ADR均能影响K562/A02细胞的细胞周期进程和细胞凋亡率。1μmol/L DAC的影响与作用时间相关,在作用24 h时以S期阻滞与细胞早期凋亡率升高为主,48 h时以G2/M期阻滞与细胞晚期凋亡和坏死率升高为主。ADR则主要表现为浓度依赖性G2/M期阻滞并诱导细胞晚期凋亡和坏死。两者联用使ADR对细胞周期分布的作用进一步加强,即表现为G2/M期阻滞更加明显,但对细胞凋亡率的影响并无显著差异。而在基因组甲基化程度上,2种细胞没有显著差异,DAC作用前后也没有显著改变。结论:DAC能增强K562/A02细胞对ADR的敏感性,具有逆转耐药作用,其机制可能与调节K562/A02细胞细胞周期进程、促进细胞凋亡和坏死有关。 熊鸣 王立新关键词:地西他滨 阿霉素 K562/A02细胞 耐药性 人源性抗食管癌细胞单链抗体的表达纯化及活性鉴定 被引量:2 2018年 目的研究噬菌体抗体库中筛选得到的抗食管癌细胞的单链抗体的功能,对单链抗体进行包涵体表达纯化。方法将从噬菌体抗体库中筛选到的2个单链抗体基因分别连接到pET-28a、pET-SUMO原核表达载体中,分别构建原核表达重组载体pET-NFC20b、pET-NFC70a,将其转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化。采用盐酸胍稀释滴定复性方法对抗食管癌肿瘤细胞表面抗原的抗体进行复性,并用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果成功构建了重组载体pET-NFC20b、pETNFC70a,对重组菌株pET-NFC20b、pET-NFC70a蛋白表达进行鉴定,诱导条件为0.5 mmol/L IPTG、时间3 h、温度18℃,重组蛋白均以包涵体形式表达,经滴定复性后均获得了相对分子量为30 k D和40 k D的重组蛋白。细胞ELISA实验鉴定2种蛋白NFC20b、NFC70a能与KYSE-170、KYSE-150、SMMC7721、A549等细胞结合,具有生物学活性。结论噬菌体抗体库中筛选得到的抗食管癌细胞的单链抗体NFC20b和NFC70a,可以成功地构建到pET28a和pET-SUMO载体内进行包涵体表达,纯化后具有蛋白活性,可为后续实验及检测试剂的研发奠定基础。 乔媛媛 熊鸣 瞿秀华 王欲晓 周丽君 张达矜关键词:蛋白纯化 活性鉴定 高性能战斗机飞行员的PERIOD3基因多态性频率及与睡眠的关系 2011年 目的鉴定高性能战斗机飞行员的PERIOD3(PER3)基因型频率,并分析其与睡眠分型的关系。方法获取104名高性能战斗机飞行员的外周静脉血样本各2m1,提取基因组DNA样本。应用PCR扩增基因片段,鉴定个体的PER3基因型。根据Horne-Ostberg生理时钟问卷调查,进行睡眠类型分类。结果104名高性能战斗机飞行员的PER3基因型频率为:PER3^4/4基因型频率占70.2%(73/104);PER3^4/5基因型频率占26.9%(28/104);PER3^5/5频率占2.9%(3/104)。高性能战斗机飞行员与普通汉族人PER3基因型频率比较,差异无统计学意义(X^2=2.737,P〉0.05)。Horne-C)stberg生理时钟问卷调查结果显示:高性能战斗机飞行员PE船的3种基因型在睡眠分型上没有差别。结论高性能战斗机飞行员与普通汉族人PER3基因型频率分布相似。飞行员睡眠分型中,未提示PER3^5与昼行睡眠偏好相关。 安怀杰 李鸣皋 熊鸣 何立东 赵晓航关键词:昼夜节律 睡眠剥夺 生物钟 基因型 基因频率 海水诱导血管内皮细胞株304细胞凋亡的实验研究 2013年 目的探讨海水诱导的细胞死亡特点及其分子机制。方法海水与生理盐水按照不同比例稀释以及处理不同时间条件下,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色并在荧光显微镜下观察血管内皮细胞株(endothelial cell of vessels,ECV)304细胞形态和生存改变,采用膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素和碘化丙啶双染色结合流式细胞术观察ECV304细胞凋亡比例,采用实时定量聚合酶链式反应陈列芯片杂交分析凋亡相关基因表达水平的变化。结果海水刺激早期,ECV304细胞脱水皱缩,随时间延长,细胞凋亡与坏死逐渐增多。荧光显微镜和流式细胞术分析结果显示,海水∶生理盐水=1∶1稀释不仅导致细胞坏死,还能够诱导细胞凋亡,两者比例相当。实时定量聚合酶链反应陈列芯片杂交分析结果显示,有4个凋亡相关基因[半胱天冬酶-6、脂肪酸合成酶配体基因、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)和BCL-2样蛋白1(BCL-2 like 1,BCL-2L1)]RNA水平发生明显改变。结论海水可以诱导细胞凋亡,可能与其诱导的凋亡相关基因表达改变有关。 张达矜 曲佳 熊鸣 乔媛媛 赵晓航关键词:细胞凋亡 细胞坏死 不同温度海水浸泡对腹部开放伤大鼠生存时间的影响 被引量:3 2009年 目的:观察腹部开放伤伴随不同温度海水浸泡条件下对大鼠生存时间及其伤情进展的影响。方法:建立腹部开放伤大鼠模型,健康雄性Wistar大鼠随机分为单纯腹部开放伤组和腹部开放伤伴随生理盐水或海水浸泡组。与单纯腹部开放伤相比,观察腹部开放伤合并10℃、15℃、22℃、26℃和33℃不同温度生理盐水或海水浸泡条件下大鼠的生存时间。结果:在相同温度下,与单纯腹部开放伤或腹部开放伤合并生理盐水浸泡组相比,腹部开放伤伴随海水浸泡大鼠生存时间明显缩短;与单纯腹部开放伤相比,腹部开放伤伴随10℃生理盐水浸泡大鼠生存时间明显缩短,而腹部开放伤伴随15℃、22℃、26℃和33℃生理盐水浸泡组大鼠生存时间没有显著差异;腹部开放伤合并海水浸泡条件下,大鼠在10℃、26℃和33℃水温浸泡较在15℃和22℃水温浸泡条件下生存时间明显缩短。结论:海水浸泡是加速腹部开放伤大鼠致死的重要因素之一。伴随过度低温(10℃)或接近体温(33℃)的海水浸泡都可加速腹部开放伤大鼠死亡。 曲佳 张达矜 熊鸣 乔媛媛 王大鹏 安怀杰 赵晓航关键词:海水浸泡 腹部开放伤 死亡率 社区医院就诊患者的特点研究 被引量:3 2010年 目的研究社区就诊人群的疾病特点,指导社区医疗工作。方法收集2008年8-11月社区门诊就诊患者进行分析。精神评定用Zong焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)。结果社区就诊的患者年龄偏大,有66%的患者年龄在50~79岁,患2种以上慢性病者占11.2%以上,骨关节炎患者占9.2%以上,焦虑抑郁患者占28.7%。结论社区就诊患者以老年人为主,以高血压、糖尿病等慢性病多见,焦虑抑郁状态也不少。社区医疗应以疾病为中心的模式转变为以健康为中心的生物-心理-社会医学模式,关心患者身心健康、进行健康教育至关重要。 陈宇萍 马云涛 孟宪全 熊鸣 曲佳 张达矜 解鹏关键词:老年人 海水浸泡对腹部开放伤大鼠凝血系统影响的研究 被引量:2 2009年 目的:观察海水浸泡对腹部开放伤大鼠凝血系统的影响。方法:Wistar大鼠随机分为腹部开放伤合并海水浸泡组和单纯腹部开放伤组,分别检测实验动物致伤后0、0.5、1、2、3、4 h的血浆凝血酶原时间和部分凝血活酶时间,以及血浆纤维蛋白原、纤溶酶原和D-二聚体含量。结果:与单纯腹部开放伤大鼠相比,腹部开放伤合并海水浸泡大鼠血浆凝血酶原时间延长、血浆部分凝血活酶时间缩短、纤维蛋白原含量减少,提示外源性凝血途径被抑制而内源性凝血途径被激活。在海水浸泡2 h后,血浆纤溶酶原和D-二聚体含量增加,提示伴随继发性纤溶亢进。凝血酶原时间和血浆纤溶酶原含量与海水浸泡时间呈正相关(相关系数分别为0.9361和0.9875),血浆纤维蛋白原含量与海水浸泡时间呈负相关(相关系数为0.9136)。结论:海水浸泡可以激活腹部开放伤大鼠凝血系统。在海水浸泡晚期,致伤大鼠具有弥漫性血管内凝血倾向。 张达矜 曲佳 熊鸣 乔媛媛 王大鹏 马聪 虞积耀 赵晓航关键词:腹部开放伤 凝血 内皮细胞 正交设计优化低温应激诱导IEC-6细胞损伤条件的实验研究 2018年 目的采用正交实验设计法,优化低温应激诱导大鼠小肠隐窝上皮细胞(intestinal epithelial crypt,IEC-6)损伤的条件。方法以温度、处理时间和接种密度为正交优化的3个因素,每个因素设定3个水平,分别为处理温度(4℃,10℃,22℃),低温处理时间(2 h,4 h,6 h),接种密度(1×105/m L,2. 5×105/m L,5×105/m L),根据三因素三水平设计正交实验表,得到9个实验组,按相应条件处理,细胞增殖/毒性检测试剂法分析细胞毒性,在50%<细胞存活率<90%范围内获得最优组合条件。应用最优组合条件处理实验组IEC-6细胞,同时设置正常对照,镜下观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位。结果 (1)在50%<细胞存活率<90%范围内,低温应激诱导IEC-6细胞损伤的最优组合条件为:处理温度4℃,接种密度5×105/m L,低温处理时间4 h。(2)与对照组相比,最优组合条件下实验组细胞失去正常形态,同时线粒体膜电位去极化增强,细胞凋亡显著加重(P<0. 01)。表现为前者以早期凋亡为主,细胞凋亡率为(4. 41±1. 36)%,低强度红色荧光细胞(R2)占比(5. 24±0. 57)%,后者则以晚期凋亡和坏死为主,细胞凋亡率为(23. 70±2. 94)%,低强度红色荧光细胞(R2)占比(31. 12±3. 66)%。结论在50%<细胞存活率<90%范围内,低温应激诱导IEC-6细胞损伤的最优组合条件为处理温度4℃、接种密度5×105/m L、低温处理时间4 h,在该条件下,IEC-6细胞出现明显凋亡。 熊鸣 张达矜 乔媛媛 史成和关键词:IEC-6细胞 细胞毒性 细胞凋亡 线粒体膜电位