- 一种转糖基α一半乳糖苷酶基因
- 本发明公开了一种转糖基α－半乳糖苷酶基因，所述基因由短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)基因组DNA借助PCR扩增获得高保守DNA片段，然后进行Southern杂交获得。该基因核苷酸序列全长2226碱...
- 肖敏赵晗王勤鹏王鹏
- 文献传递
- 短双歧杆菌Bifidobacterium breve 203 α-D-半乳糖苷酶aga2基因克隆及表达研究
- 王勤鹏
- 关键词：双歧杆菌Α-半乳糖苷酶基因克隆同工酶
- 短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶基因aga1在大肠杆菌中的高效表达被引量：7
- 2005年
- 短双歧杆菌 (Bifidobacteriumbreve 2 0 3)α_D_半乳糖苷酶基因 (aga1)被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒pBV2 2 0中 ,构建重组质粒pBVaga1,转入大肠杆菌进行温度诱导表达 ,得到的重组酶Aga1在大肠杆菌DH5α、DH10B和BL2 1中的比活分别为 2 8 0 8、19 4 4和 13 85U mg ,均高于短双歧杆菌α_D_半乳糖苷酶的比活 1 76U mg。重组质粒pBVaga1在E .coliBL2 1中稳定性较好。重组酶Aga1蛋白亚基分子量约 6 7kD ,最适反应温度为 4 5℃ ,酶在 4 0℃以下稳定 ,6 0℃仅剩余约 5 %的酶活性 ,70℃时酶全部失活 ;最适反应pH为 4 0～ 4 4 ,酶在pH 3 6～ 6 0范围内稳定 ;酶对p_硝基苯酚_α_半乳糖苷的Km =1 4 3mmol L ,Vmax=35 71μmol (L·min) ,对蜜二糖的Km =2 6 1mmol L ,Vmax=6 3 6 9μmol (L·min) ;酶在蜜二糖、棉子糖水解体系中不显示转糖基活性。结果说明Aga1与已经报道的一种短双歧杆菌的α_D_半乳糖苷酶不同 ,是新发现的一种短双歧杆菌的α_D_半乳糖苷酶。
- 陆宇赵晗王勤鹏刘巍峰肖敏陈忠民钱新民
- 关键词：双歧杆菌Α-D-半乳糖苷酶
- 短双歧杆菌两种α-半乳糖苷酶的克隆、表达及性质
- 从短双歧杆菌(Bifidobacterium breve 203)中克隆得到2种不同的α-半乳糖苷酶基因 agal(GenBank AF406640)和 aga2(GenBank DQ267828)。aga1编码的酶只与...
- 赵晗王勤鹏陆宇肖敏
- 文献传递
- 短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶基因（aga2）的克隆及其转糖苷活性研究
- ＜正＞糖类物质作为细胞组成成分和能量来源是众所周知的。更有意义的是,糖类分子在细胞通信和信号传递方面参与了各种不同的分子识别过程,功能涉及细胞分化、细胞发育和调控、细胞识别等等。因此,寡糖结构的分析和寡糖合成技术的发展就...
- 王勤鹏赵晗肖敏
- 文献传递
- 一种转糖基α－半乳糖苷酶基因
- 本发明公开了一种转糖基α-半乳糖苷酶基因，所述基因由短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)基因组DNA借助PCR扩增获得高保守DNA片段，然后进行Southern杂交获得。该基因核苷酸序列全长2226碱...
- 肖敏赵晗王勤鹏王鹏
- 文献传递
- 短双歧杆菌α-D-半乳糖苷酶Aga1在大肠杆菌中的高效表达
- 短双歧杆菌(Bifidobacterium breve 203)α-D-半乳糖苷酶基因(agal)被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒pBV220中,构建重组质粒pBV-agal,转入到大肠杆菌中进行温度诱导表达,得到重组酶...
- 陆宇赵晗王勤鹏陈忠民钱新民肖敏
- 关键词：双歧杆菌Α-D-半乳糖苷酶
- 文献传递
