王娟
- 作品数：12 被引量：49H指数：5
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
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- 亚低温对大鼠颅脑外伤后脑组织AQP-4和Caspase-3表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的观察亚低温治疗对实验大鼠颅脑外伤后水通道蛋白4(AQP-4)和半胱天冬酶3(caspase-3)的影响,探讨亚低温对颅脑外伤后可能的脑保护分子生物机制。方法健康成年雄性Wistar大鼠45只,采用Feeney法建立脑外伤动物模型,随机分为对照组、创伤组和亚低温组,每组15只,亚低温组在损伤后立即给予亚低温暴露,用干湿重法测定脑组织含水量、免疫组织化学法及图象分析技术检测AQP-4和caspase-3及双重染色免疫组织化学法检测AQP-4和S-100。结果与假手术组比较,大鼠颅脑外伤后脑组织AQP-4和caspase-3的表达及脑组织含水量明显升高(P<0.05);亚低温治疗后,大鼠脑组织AQP-4和caspase-3的表达及脑组织含水量较脑创伤组明显降低(P<0.05)。结论亚低温对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与减轻胶质细胞介导的脑水肿,减少神经细胞凋亡有关。
- 裘孝忠王娟刘建张允旭刘隆熙
- 关键词：亚低温水通道蛋白4半胱天冬酶3
- 过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞功能变化及黄芪的体外干预被引量：3
- 2009年
- 背景:树突状细胞在过敏性紫癜发病机制中可能具有重要的地位。已有报道黄芪在体内可以纠正过敏性紫癜患儿的Th1/Th2失衡,但目前关于黄芪在树突状细胞水平对过敏性紫癜病免疫功能调节的影响尚不清楚。目的:观察过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞功能变化及黄芪对其的影响。设计、时间及地点:病例对照分析,于2005-10/2007-12在青岛大学医学院附属医院儿科研究所完成。材料:急性期过敏性紫癜患儿外周静脉血28份作为过敏性紫癜组,以门诊体检的健康同龄儿童外周静脉血18份作为正常对照组。黄芪水提剂由四川百利药业有限公司提供。方法:采用密度梯度离心法获取过敏性紫癜患儿及健康儿童外周血单个核细胞,获取的外周血单个核细胞体外经重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子、重组人白细胞介素4、重组人肿瘤坏死因子α以诱生树突状细胞,并培养8d,其中过敏性紫癜组又分成2组:对照组和黄芪干预组。主要观察指标:ELISA法检测过敏性紫癜患儿及健康儿童血浆γ-干扰素和白细胞介素4水平及培养上清液中白细胞介素10,12,18水平,流式细胞仪检测树突状细胞表面CD83、CD86(B7-2)和CD80(B7-1)的表达率。结果:过敏性紫癜患儿急性期外周血中Th1型细胞因子γ-干扰素水平减少,Th2型细胞因子白细胞介素4水平增加,γ-干扰素/白细胞介素4比值明显降低。过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞经诱导培养的树突状细胞表面CD86表达率较正常对照组明显升高,且两组CD86表达率与血浆白细胞介素4水平皆呈显著正相关,与γ-干扰素/白细胞介素4比值皆呈显著负相关;CD80表达率明显低于正常对照组,且两组CD80表达率与血浆γ-干扰素水平及γ-干扰素/白细胞介素4比值均呈显著正相关。过敏性紫癜患儿树突状细胞分泌白细胞介素12水平低于正常对照组(P<0.05),而白细胞介素10,18水平均高于�
- 陈永兴张秋业王娟卫海燕董增义张迎辉
- 关键词：树突状细胞白细胞介素12白细胞介素18CD86CD80
- 人血清~1H-NMR在临床诊断上的初步应用被引量：6
- 1999年
- 目的初步探讨１ＨＮＭＲ法在临床诊断上的应用。方法采用预饱和法对通常强信号峰水峰进行抑制，运用核磁共振技术对正常人、糖尿病人、高血脂病人和肝癌病人的血清或尿样进行分析研究。结果以上血清或尿样的波谱图中水峰都得到了较好的抑制。结论从分子水平阐明了异常的病理生化代谢和反应，为将此法进一步在临床上推广应用，尚需扩大病例测试。
- 刘玉兰李珊王娟王娟
- 关键词：血清诊断
- 过敏性紫癜患儿血树突状细胞共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2平衡相关性被引量：3
- 2007年
- 目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿外周血树突状细胞(DC)共刺激分子表达及其与辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2平衡的相关性。方法HSP患儿40例。健康对照儿童18例。酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血浆IFNγ-、IL-4水平。对其中HSP 28例及18例健康对照儿童外周血单个核细胞(PBMC)体外经细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、rhIL-4和rhTNF-α以诱生DC并培养8 d,流式细胞仪检测DC表面CD86(B7-2)、CD80(B7-1)、CD83表达率。结果1.HSP组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组(t=4.26 P<0.01),IL-4水平显著高于健康对照组(t′=5.09 P<0.01),IFN-γ/IL-4比值显著低于健康对照组(t′=7.98 P<0.01)。2.HSP组外周血DC表面CD83表达率与健康对照组无显著性差异(P>0.05);HSP组外周血DC表面CD86表达率显著高于健康对照组(t=3.94 P<0.01),CD80低于健康对照组(t′=2.60 P<0.05)。3.二组外周血DC表面CD86表达率与血浆IL-4水平均呈显著正相关(r=0.53,0.63 Pa<0.01),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关(r=-0.55,-0.80 Pa<0.01),而与血浆IFN-γ水平均无相关性(Pa>0.05);二组外周血DC表面CD80表达率与血浆IFN-γ水平均呈正相关(r=0.43,0.49 Pa<0.05),与IFN-γ/IL-4比值均呈显著正相关(r=0.49,0.63 Pa<0.05),而与血浆IL-4水平均无相关性(Pa>0.05)。结论HSP患儿存在Th1/Th2失衡,HSP患儿DC表面共刺激分子差异表达直接或间接导致Th1/Th2失衡。
- 陈永兴张秋业董增义王娟李静
- 关键词：TH1/TH2平衡树突状细胞CD86CD80
- RKIP表达下调对宫颈癌细胞增殖的影响
- 2013年
- 目的探讨脂质体法转染Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因对宫颈癌细胞增殖的影响及RKIP在宫颈癌转移中的作用。方法应用脂质体法,将含有人RKIP基因的反义质粒asRKIP及空白质粒pcDNA3.1(-)分别转染宫颈癌Caski细胞,采用G418筛选出稳定转染的宫颈癌Caski细胞。空白质粒转染后Caski细胞即空白对照细胞命名为Caski-(-),asRKIP转染后Caski细胞分为平行的两组分别命名为Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞,应用Western Blotting方法检测各种Caski细胞中RKIP蛋白的表达,建立RKIP表达下调的宫颈癌细胞系(转染细胞系及对照细胞系);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、软琼脂集落形成实验和Transwell小室实验检测RKIP表达下调对宫颈癌细胞增殖的影响。结果成功建立了RKIP表达下调的Caski宫颈癌细胞系。Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞中RKIP的表达水平明显低于Caski-(-)细胞和Caski细胞,Cas-ki-asRKIP#1和Caski-asRKIP#2细胞的增殖速度比Caski-(-)细胞和Caski细胞快,差异有显著性(t=4.98～6.43,P<0.05);而Caski细胞和Caski-(-)细胞的增殖速度无明显差异(t=1.36,P>0.05)。各组Caski细胞均可以在双层琼脂中增殖形成细胞集落,Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞与Caski-(-)细胞、Caski细胞比较,形成的集落大且数目多,差异有统计学意义(F=19.98,P<0.05);Caski-(-)细胞与Caski细胞集落数目比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RKIP表达下调可能对宫颈癌细胞的增殖具有一定的促进作用。
- 王娟纪新强吕庆凤张文卿
- 关键词：脂质体法RAF激酶抑制蛋白宫颈肿瘤
- RKIP基因表达上调对宫颈癌细胞生物学行为影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因表达上调对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法应用脂质体法,将含有正义(ss)RKIP cDNA的真核表达载体转染入宫颈癌Caski细胞,G418筛选阳性克隆,Western-blot方法检测转染前后细胞RKIP的表达,建立RKIP基因表达上调的稳定转染细胞系(ssRKIP)。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、双层软琼脂集落形成实验、体外侵袭实验(Transwell小室)方法,观察RKIP基因对宫颈癌细胞生物学行为的影响。结果建立了RKIP表达上调的稳定转染宫颈癌Caski细胞系。RKIP基因转染后,与未转染细胞比较,对照空载体pcDNA3.1(+)转染细胞的RKIP蛋白表达无明显变化,含正义cDNA的ssRKIP细胞的RKIP蛋白表达水平则上调(t=8.137,P<0.01)。RKIP基因表达上调能够抑制宫颈癌Caski细胞的体外生长增殖、锚定非依赖性生长及体外侵袭能力。结论 RKIP基因对宫颈癌细胞的增殖、锚定非依赖性生长和侵袭等生物学行为均有抑制作用,其在宫颈癌发病中可能起重要作用。
- 吕庆凤纪新强王娟张文卿
- 关键词：宫颈肿瘤肿瘤转移细胞增殖
- 外周血单个核细胞来源树突状细胞分泌细胞因子在过敏性紫癜急性期的变化被引量：3
- 2007年
- 目的:观察外周血单个核细胞来源的树突状细胞分泌白细胞介素水平在过敏性紫癜急性期的变化,分析其与Th亚群平衡的相关性。方法:实验于2006-10/2007-12在青岛大学医学院附属医院儿科研究所完成。①实验对象:取急性期过敏性紫癜患儿外周静脉血28份作为过敏性紫癜组,平均年龄7.53岁;以门诊体检的健康同龄儿童外周静脉血18份作为对照组。儿童家属均知情同意。②实验方法:采血2.0～3.0mL/份,肝素抗凝,离心移取血浆1mL冻存备测。采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,调整细胞悬液浓度为2×109L-1,接种于24孔板向树突状细胞进行诱导培养。每孔加入含终浓度1000u/mL重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、500u/mL重组人白细胞介素4的RPMI-1640完全培养液1mL,隔日添加1/2首次浓度的上述两种细胞因子,半量换液。培养至第6天,每孔加入重组人肿瘤坏死因子α至终浓度200u/mL。③实验评估:倒置显微镜观察树突状细胞的生长情况,以流式细胞仪检测成熟树突状细胞特异性表面分子CD83的表达率。采用ELISA法检测血浆干扰素γ、白细胞介素4的水平及培养上清中的白细胞介素10,12,18水平。结果:①树突状细胞体外诱导培养过程的形态学观察:外周血单个核细胞贴壁3h后获得黏附细胞,加入细胞因子24h后可见悬浮细胞增多,并呈细胞聚集现象,培养至第8天可见到大量具有毛刺状或根须状突起的悬浮细胞,即为树突状细胞。②树突状细胞的表型鉴定:过敏性紫癜组及对照组树突状细胞表面分子CD83均呈高表达,表达率分别为(69.29±16.20)%,(69.26±18.77)%。③Th亚群变化:与对照组比较,过敏性紫癜组白细胞介素4水平明显升高(t’=5.09,P<0.01),干扰素γ、干扰素γ/白细胞介素4水平均明显降低(t=4.26,P<0.01;t’=7.98,P<0.01)。④树突状细胞分泌细胞因子的水平:与对照组比较,过敏性紫癜组树突状细胞
- 王娟张秋业陈永兴董增义
- 关键词：过敏性紫癜树突状细胞干扰素Γ
- 过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞功能变化及黄芪体外干预研究被引量：6
- 2008年
- 过敏性紫癜（HSP）为常见变态反应性血管炎性疾病，其发病与T、B细胞功能紊乱关系密切。迄今有关HSP患儿树突状细胞（DC）功能变化的研究资料较少，有报道黄芪（AM）可以纠正HSP患儿辅助性T淋巴细胞（Th）亚群失衡，但目前尚无AM在DC水平对HSP患儿免疫功能调节的资料报道。本研究对HSP患儿外周血DC表面共刺激分子CD80（B7—1）、CD86（B7-2）的表达和DC分泌白细胞介素（IL）-10、IL-12、IL-18水平进行检测，同时观察AM的干预效果。
- 陈永兴张秋业王娟曹永献董增义
- 关键词：细胞功能变化过敏性紫癜树突状细胞外周血患儿体外干预辅助性T淋巴细胞
- 小儿亚急性坏死性淋巴结炎的病因及特征被引量：3
- 2007年
- 目的探讨亚急性坏死性淋巴结炎(SNL)的病因及临床特征,提高对儿童SNL的认识,减少误诊。方法回顾分析28例SNL病儿的临床资料。结果本组28例病儿经淋巴结活检确诊为SNL;其中85.7%病儿冬春及初夏季节发病,以学龄儿童为主,男女之比约为3∶1;临床表现均有发热、淋巴结大,可伴有肝大和(或)脾大(31.6%)、多形性皮疹(14.3%);实验室检查多数病儿白细胞总数减少、红细胞沉降率增快、LDH升高;急性期多有病毒及支原体感染;病理特点为淋巴结广泛的凝固性坏死伴组织细胞反应性增生;其中1例发展为系统性红斑狼疮(SLE),复发2例,其余病儿预后良好。结论对不明原因发热伴淋巴结大病儿,除行相关实验室检查外,应早期行淋巴结活检以明确诊断。SNL属自限性疾病,预后多良好,亦有复发,少数发展为SLE,应长期随访。
- 陈永兴董增义王娟张秋业
- 关键词：亚急性坏死性淋巴结炎儿童
- 甲泼尼龙对高血压脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4和S100蛋白表达的影响
- 2015年
- 目的探讨甲泼尼龙对高血压脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4（aquaporin-4，AQP-4）和S100蛋白的影响。方法64只大鼠随机分为假手术组（8只）、生理盐水对照组（8只）和甲泼尼龙组（48只），甲泼尼龙组再根据模型制作至甲泼尼龙干预的时间间隔分为2、4、8、12、24、48h亚组，每亚组8只。甲泼尼龙组在相应时间点腹腔注射甲泼尼龙（首次30mg／kg，然后15mg／kg，1次／6h，共3d），生理盐水对照组腹腔注射等体积生理盐水。甲泼尼龙干预后24h和72h进行神经行为学评分。应用干湿重法检测大脑半球含水量，原位杂交和免疫组化染色法分别检测AQP-4mRNA和蛋白表达。应用免疫组织化学双标法检测AQP-4和S100蛋白表达。结果与假手术组比较，生理盐水对照组AQP-4表达水平和脑组织含水量显著增高（P均〈0．05）。与生理盐水对照组比较，早期给予甲泼尼龙组（2h、4h和8h亚组）神经功能评分、AQP-4mRNA和蛋白表达水平以及脑含水量均显著降低（P均〈0．05）。免疫组织化学双重染色显示，早期给予甲泼尼龙组（2h、4h和8h亚组）AQP-4蛋白和S100蛋白表达也较生理盐水对照组显著降低（P均〈0．05）。结论早期应用甲泼尼龙能下调高血压脑出血大鼠脑组织AQP-4和S100蛋白表达，从而减轻脑出血后脑水肿。
- 裘孝忠王娟张允旭管栋张鸿涛刘隆熙
- 关键词：甲泼尼龙脑出血高血压水通道蛋白4S100蛋白质类
