王恒樑 作品数:136 被引量:303 H指数:8 供职机构: 上海海洋大学食品学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
蛋白质TolC在制备免疫制剂及疫苗中的用途 本发明公开了TolC蛋白质的医疗用途,具体地说为该蛋白质在制备免疫制剂及疫苗中的应用。本发明通过实验,用免疫蛋白质组学技术发现TolC具有极强的血清学反应,因其位于胞外,很可能是中和性抗原,可用作痢疾感染的检测诊断制剂或... 王恒樑 黄留玉 应天翼 冯尔玲 苏国富文献传递 驱除侵袭大质粒pINV对福氏2a志贺氏杆菌2457T影响的比较蛋白质组学研究 被引量:1 2005年 将福氏志贺氏杆菌2a 2 4 5 7T及其驱除侵袭大质粒pINV的菌株培养至对数生长中期,制备了全细胞蛋白质。用双向电泳分离两种细胞蛋白质混合物并进行比较,找出差异点,这些点经过胶内酶切后进行MALDI_TOF质谱鉴定。每个蛋白质点的肽指纹图谱都在福氏志贺氏杆菌2a 2 4 5 7T株的蛋白质数据库用Mascot进行检索,共发现了10个差异表达的蛋白质。结果显示驱除大质粒后几个参与核酸代谢途径的酶表达量有所上升。其中胞啶脱氧胞啶脱氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶和尿嘧啶核苷磷酸化酶表达量的上升可能造成尿嘧啶和尿(嘧啶核) 李明珠 应天翼 王恒樑 张部昌 冯尔玲 王军军 黄留玉关键词:比较蛋白质组学 双向电泳 质谱 一种驱除炭疽杆菌毒力大质粒pXO1的方法 本发明公开了一种驱除炭疽杆菌毒力大质粒pXO1的方法。本发明提供了的重组载体,为将DNA分子插入穿梭质粒pKSV7的SmaI位点得到的载体;所述DNA分子的核苷酸序列为序列表中的序列1。本发明的实验证明,本发明根据质粒不... 王恒樑 刘先凯 王东澍 王华贵 冯尔玲文献传递 蜡样芽胞杆菌BC307的分离鉴定及其RsiP蛋白的抗体制备 被引量:2 2021年 蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)是一种常见的食源性致病菌。从食物中毒病人的食物残渣中分离到1株产呕吐毒素的蜡样芽胞杆菌BC307,其对青霉素类抗生素具有较强的抗性。抗SigP因子RsiP是蜡样芽胞杆菌族(Bacillus cereus sensu lato)细菌青霉素耐药的重要调控因子。该实验利用原核系统表达RsiP蛋白并利用亲和层析法进行纯化,免疫小鼠后获得高效价多克隆抗体。结果表明,RsiP蛋白在炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌中高度同源,在Western Blotting实验中RsiP抗血清与这3种菌的全菌蛋白均能发生特异性免疫反应。研究结果为探究RsiP对蜡样芽胞杆菌群细菌的青霉素耐药性调控打下了良好的基础。 郑庆芳 刘丽娜 刘先凯 吕宇飞 王恒樑 王东澍 邱泽武关键词:蜡样芽胞杆菌 青霉素耐药 RSIP 抗体制备 L-天门冬酰胺酶II的表达与纯化 被引量:3 2001年 依据发表的大肠杆菌天门冬酰胺酶II基因序列 ,合成引物 ,利用PCR技术获得天门冬酰胺酶II的结构基因 ,插入高效表达载体pBV2 2 0 ,并转化大肠杆菌菌株DH5α ,获得高效表达天门冬酰胺酶II的基因工程菌株。通过对包涵体的提取与纯化 ,结合离子交换层析获得天门冬酰胺酶II的蛋白质纯品。检测结果表明得到的天门冬酰胺酶II具有较高的比活性 ,与商品化的同类产品比活相近。 韩照中 王恒樑 冯尔玲 苏国富 黄翠芬关键词:纯化 基因序列 福氏志贺菌ipaB基因的克隆及其在酵母细胞中的表达 2003年 ipaB gene amplified from S. flexneri 2a by PCR was cloned into pGBKT7 vector (Named pGBKT-ipaB) and sequencing indicated that the amino encoded by the cloned gene was the same as the reported; The recombination plasmid pGBKT-ipaB was transformed into the yeast strain AH109, in which the fusion expression of IpaB was analyzed with SDS-PAGE and Western blotting. This provided the basis for screening the interacting protein with IpaB by two hybrid system and understanding the function of IpaB in the pathogenesis of S. flexneri further. 姚潇 王恒樑 闫晓宇 杨伯伦 黄留玉关键词:福氏志贺菌 克隆 酵母细胞 原核生物中小RNA的功能及研究进展 2009年 在原核生物基因组中,除了tRNA、rRNA和mRNA这3种我们很熟悉的RNA以外,目前已经知道还含有许多编码非常规调控的RNA。这些RNA的长度为50~400核苷酸,通常由原核生物的基因间区编码,但并不翻译成蛋白质,因此被称为非编码小RNA(sRNA),简称小RNA或非编码RNA。近年来,随着生物信息学和分子生物学技术的不断发展,在原核生物体内陆续发现了上百种sRNA分子,这些sRNA分子具有多样的生物学功能,作为一类新发现的基因表达调控子已经引起了高度的重视。 李娜 李娜 朱力关键词:小RNA 原核生物 基因表达调控 伤寒糖蛋白的生物制备方法及其应用 本发明公开了一种伤寒糖蛋白的生物制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的蛋白的制备方法,包括将脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL的底物蛋白与脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表... 王恒樑 朱力 彭哲慧 潘超 冯尔玲 刘先凯 吴军 孙鹏 曾明 王斌文献传递 弗氏2a志贺氏菌2457T株yciD基因缺失突变株的构建 被引量:4 2006年 目的:构建弗氏2a志贺氏菌2457T株yciD基因缺失突变体,以研究yciD基因的功能。方法:根据弗氏2a志贺氏菌2457T株基因组全序列,采用Red重组系统对yciD基因进行缺失,并经PCR和SDS-PAGE证实;对野生株和突变株的生长状态及生化反应进行比较研究。结果:构建了弗氏2a志贺氏菌2457T株的yciD基因缺失突变株2457TΔyciD,该突变株外膜蛋白样品中缺失了一条相对分子质量与从yciD基因推导的蛋白相当(约22000)的蛋白带。该突变株比野生株生长快,利用葡萄糖和甘露醇的能力也比野生株大为增强。结论:获得了弗氏2a志贺氏菌2457T株的yciD基因缺失突变株。 张影 朱力 袁静 刘先凯 冯尔玲 王恒樑 朱厚础关键词:外膜蛋白 RED重组系统 基因敲除 甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白质组学参考图谱的建立 被引量:1 2012年 目的建立甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白的蛋白质组学参考图谱。方法甲型副伤寒沙门菌CMCC 50973培养至对数生长末期,收集菌体并破碎提取细菌的外膜蛋白,然后利用双向电泳(2-DE)将蛋白分离。分离后取蛋白点做MALDI-TOF-MS鉴定,根据质谱得到的肽指纹图谱在Mascot数据库中查询出匹配的蛋白。结果在2-DE考马斯亮蓝染色凝胶上取77个蛋白点,鉴定成功了54个点,对应29种蛋白。29种蛋白中定位于外膜为13种,定位未知的有11种,胞质中有5种。结论成功建立了甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白的蛋白质组学参考图谱,为进一步筛选疫苗抗原打下了基础。 王斌 朱力 李娜 梁昊宇 王恒樑 陈薇 曾明关键词:细菌外膜蛋白质类 双向电泳 蛋白质组学