王洁琳
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B基因在大肠杆菌中的克隆及表达被引量：5
- 2016年
- 目的扩增金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,并进行诱导、表达,为其应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEB的基因序列,设计一对分别含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增后,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切,并与做相应酶切的pET-28α(+)连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序,用IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot印迹鉴定表达产物。结果成功扩增出SEB基因,基因大小为801bp,重组PET-28α(+)-SEB双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEB在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99%。经IPTG诱导后,pET-28α(+)-SEB/BL21在相应的相对分子质量(35×103)可见融合蛋白以包涵体形式表达,免疫印迹在相应分子量检测到目的蛋白。结论克隆了SEB基因,并成功在大肠杆菌BL21中以包涵体形式表达,为肠毒素B应用研究奠定了基础。
- 李飞周帅董慧黄艳梅梁秉绍李娟龙燕王洁琳谢永强杨镒宇周珍文
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B克隆
- 儿童粪便金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及分析被引量：5
- 2021年
- 目的探讨广州地区就诊患儿粪便分离金黄色葡萄球菌毒素基因的分布状况和临床诊断及各分子分型的关系。方法收集2018年8至11月广州市妇女儿童医疗中心3所院区就诊儿童2059份非重复粪便标本所分离的412株金黄色葡萄球菌,采集相关临床信息。提取菌株DNA后用PCR的方法检测相关的毒素基因,其中包括葡萄球菌肠毒素(SE)基因(sea、seb、sec、sed、see)以及杀白细胞毒素基因(pvl),采用多位点序列分型(MLST)的方法对菌株进行分子分型,最后采用χ^(²)检验对数据进行比较。结果从所分离的412株金黄色葡萄球菌中检测到256株(256/412,62.1%)至少含有1种肠毒素基因,携带率较高的依次为sec(125/412,30.3%)、seb(98/412,23.8%)和sea(66/412,16.0%),并且金黄色葡萄球菌pvl基因的携带率为18.7%(77/412)。其中分离自胃肠炎患者粪便的金黄色葡萄球菌sea基因检出率(58/319,18.2%)明显高于非胃肠炎组(8/93,8.6%)(χ^(²)=4.912,P=0.027),而在住院肺炎患者粪便中的金黄色葡萄球菌pvl基因检出率(8/21,38.1%)高于非肺炎组(6/47,12.8%)(χ^(²)=4.252,P=0.039)。并且金黄色葡萄球菌的毒素基因与特定的ST型密切相关,82.4%(28/34)的ST6携带sea基因,所有的ST338和ST59均携带seb基因,96%(48/50)的ST45携带sec基因,ST338的pvl基因携带率高达5/5。结论ST6型金黄色葡萄球菌产生的SEA毒素可能与儿童患者胃肠炎诊断呈密切相关。PVL毒力基因在社区获得性肺炎住院患儿金黄色葡萄球菌中的携带率高于非肺炎组,且与CC59克隆群密切相关。
- 艾晓兰龙燕梁秉绍姚淑雯刘云锋高飞麦嘉良熊志乐梁珠薇王洁琳陈显堂杨敏龚四堂周珍文
- 关键词：细菌毒素类肠毒素类多位点序列分型儿童
- 女性泌尿生殖道支原体感染及其耐药率分析被引量：1
- 2022年
- 目的探讨女性泌尿生殖道支原体感染(GTMI)的临床特点与采集泌尿生殖道分泌物标本的抗菌药物耐药率。方法选择2014年8月至2020年12月,于广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心进行泌尿生殖道解脲脲原体(UU)和人型支原体(MH)培养的30952例疑似GTMI女性为研究对象。采用回顾性研究方法,根据疑似GTMI女性年龄,将其分为3组,适龄组(n=22863,年龄≥20~35岁),高龄组(n=7786,年龄≥35~60岁)与老龄组(n=303,年龄≥60岁)。采集疑似GTMI女性宫颈拭子分泌物标本,采用液体培养法进行UU和MH及其对抗菌药物耐药率检测。采用χ^(2)检验与线性趋势χ^(2)检验,对3组疑似GTMI女性的GTMI发生率、2014—2020年GTMI发生率逐年变化趋势及单纯UU与UU+MH患者宫颈拭子分泌物标本对抗菌药物耐药率,以及耐药率逐年变化趋势进行统计学比较。本研究遵循的程序符合2013年新修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①本研究30952例疑似GTMI女性中,GTMI总体发生率为39.2%(12130/30952,95%CI:38.7%~39.7%)。2014—2020年,疑似GTMI女性GTMI发生率总体变化呈逐年上升趋势(χ^(2)=191.19,P<0.001)。②12130例GTMI患者中,单纯UU患者占比为82.1%(9956/12130),显著高于UU+MH患者(15.9%,1934/12130),并且差异有统计学意义(χ^(2)=10614.62,P<0.001);单纯UU、UU+MH患者占比,均显著高于单纯MH患者(2.0%,240/12130),并且差异亦均有统计学意义(χ^(2)=15970.82、1449.91,P<0.001)。2014-2020年,单纯UU患者和单纯MH患者占比均呈逐年下降趋势(χ^(2)=124.29、17.46,P<0.001),而UU+MH患者占比,则呈逐年上升趋势(χ^(2)=176.09,P<0.001)。③适龄组疑似GTMI女性的GTMI发生率为41.6%(9505/22863),显著高于高龄组的32.3%(2516/7786)和老龄组的36.0%(109/303),并且差异均有统计学意义(χ^(2)=208.51、3.86,P<0.001、=0.049)。2014—2020年,适龄组和高龄组疑似GTMI女性的GTMI发生率均呈逐年上升趋势(χ^(2)=134.00、84.50,P<0
- 高坎坎钟华敏谢永强邓秋连高飞王洁琳龙燕
- 关键词：泌尿道感染支原体感染人型支原体耐药女(雌)性
