王溪 作品数:9 被引量:20 H指数:3 供职机构: 吉林大学第二医院 更多>> 发文基金: 吉林省科技发展计划基金 吉林省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
自噬对口腔鳞状细胞癌CAL-27和KB细胞放疗敏感性的影响及其机制 被引量:5 2016年 目的:利用自噬抑制剂联合放射疗法作用于口腔鳞状细胞癌CAL-27和KB细胞,探讨自噬对口腔癌放射治疗敏感性的影响及其作用机制。方法:选择人口腔鳞状细胞癌CAL-27和KB细胞,分为对照组、氯喹(CQ)组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、放射组(IR组)及联合放射组(CQ+IR组和3-MA+IR组)。应用MTT法检测细胞生存率,采用免疫荧光法激光共聚焦显微镜观察CAL-27细胞自噬水平(即LC3Ⅱ免疫荧光强度),Western blotting法检测自噬相关蛋白LC3和beclin-1表达水平,AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:与IR组比较,联合放射组细胞生存率明显降低(P<0.05)。IR组细胞自噬水平明显高于对照组、CQ组、3-MA组和联合放射组(P<0.05)。IR组LC3和beclin-1蛋白表达水平明显高于对照组和联合放射组(P<0.05)。与对照组比较,IR组和联合放射组细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与IR组比较,联合放射组细胞凋亡率也明显升高(P<0.05)。结论:放射疗法可以诱导口腔鳞状细胞癌细胞自噬水平升高。自噬抑制剂可以通过对口腔鳞状细胞癌细胞的增殖抑制及促凋亡作用,提高其对放射治疗的敏感性。 徐召南 毕也 王溪 张泽兵 王舒煜 姜斯文 贾杰关键词:自噬 氯喹 口腔肿瘤 辐射后A549细胞上清外泌体磷脂酰肌醇蛋白聚糖-1表达与细胞增殖的相关性 被引量:1 2017年 目的观察辐射后肺腺癌A549细胞的增殖情况,探讨其与细胞上清外泌体中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-1表达的相关性。方法培养肺腺癌A549细胞,分别给予0、0.5、1.0、1.5、2.0 Gy剂量(剂量率1.75 Gy/time,300 Mu/min)辐射,辐射后培养6、12 h。采用CCK8法检测细胞增殖情况,收集细胞上清液,超速离心法提取外泌体,Western blot法检测外泌体膜蛋白GPC1的表达情况。结果辐射后A549细胞增殖能力减弱,与0 Gy组相比,各剂量组A450均减小,且随辐射剂量的增加,A450越来越小;各剂量组上清外泌体GPC1蛋白表达均减少(P<0.001)。结论放疗可抑制A549细胞的增殖,且随辐射剂量增加抑制作用越明显;随着增殖受抑制,肺腺癌A549细胞上清外泌体中GPC1蛋白表达减少。 王溪 贾硕 佟志敏 胡媛媛 金鹏 张红梅关键词:肺腺癌细胞 外泌体 细胞增殖 乳腺癌术后胸壁电子线放射治疗的剂量分布 被引量:4 2006年 目的:对乳腺癌术后胸壁放射治疗时不同能量电子线照射不同厚度组织等效膜产生的剂量进行测量及分析。方法:以射线选用6及9MeV电子束的电子直线加速器对仿真人体组织等效模型所拟的典型成年女子左侧乳腺癌术后患者进行模拟照射,用热释光剂量仪进行实际测量。结果:在无膜及体表加盖0·5及1·0cm组织等效膜后,6MeV电子线照射时皮肤表面的剂量提高,分别为184·7,217·8和220·4cGy,肺受照剂量减少,分别为63·7,30·7和13·4Cgy;9MeV电子线照射时皮肤表面的剂量提高,分别为163·8、170·7和191·5cGy,肺受照剂量减少,分别为173·9、101·7和86·9cGy。结论:不同能量电子线照射时,在体表加盖0·5及1·0cm厚的组织等效膜后,皮肤表面剂量提高,肺前缘受照剂量减少,电子线能量增加,高剂量坪区加宽;电子线能量相同时随着等效膜厚度的增加,高剂量坪区向表皮移动;可以通过增加一定厚度的等效膜来提高整个靶区治疗的剂量要求。 丛也彤 陈大伟 白岚 周银行 朴永峰 王溪 曲雅勤关键词:乳腺肿瘤 放射疗法 乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响 被引量:1 2009年 目的构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)(shTRAIL)基因表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察其对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响。方法利用化学合成HRE上、下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,MTT法检测A549细胞增殖的变化,流式细胞术检测A549细胞周期的变化。结果BamHI和SmaI酶切,所得片段大小分别为1284bp和4998bp、2292bp和3990bp;以载体为模板,Egr1和shTRAIL引物进行PCR扩增,可得到469bp和820bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧与辐射能够降低细胞增殖能力,增加G0/G1和S期细胞百分比,降低G2/M期细胞百分比(P<0.05,P<0.01),二者联合作用更明显。结论乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因在乏氧和/或辐射条件下能够延长细胞G0/G1和S期,缩短G2/M期,并且抑制肺腺癌A549细胞增殖能力,二者协同作用更明显。 杨艳明 王志成 王铁君 王溪 曲雅勤关键词:增殖 CXCR4 shRNA对U87胶质瘤细胞周期和凋亡的影响 被引量:2 2015年 目的探讨下调CXCR4的表达对U87胶质瘤细胞周期和凋亡的影响,为CXCR4 sh RNA治疗胶质瘤提供实验依据。方法设计合成CXCR4的特异性sh RNA,采用脂质体转染U87细胞株。实验将细胞分为空白对照组(A组),阴性对照组(转染非特异载体p GPU6/GFP/NC组)(B组),实验组(转染CXCR4-sh RNA组)(C组)共三组,用RT-PCR检测各组细胞CXCR4基因表达情况,用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞的凋亡情况。结果成功构建了CXCR4的特异性sh RNA。C组的U87细胞CXCR4 m RNA为(42.5±4.6)%,显著低于B组的(65.4±5.9)%和A组的(69.6±7.4)%(P<0.05),G0/G1期细胞比例增加(39.4±1.7)%与(25.8±1.3)%和(20.3±1.2)%,G2/M期细胞比例相应下降(20.2±1.6)%与(30.1±1.2)%和(26.4±1.3)%;S期细胞比例相应下降(46.5±2.7)%与(55.7±2.8)%和(54.9±2.6)%,凋亡细胞率为(18.68±0.44)%明显高于A组(5.14±0.23)%和B组(4.87±0.16)%(P<0.05)。结论 CXCR4 sh RNA能够有效下调U87细胞CXCR4基因表达,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制细胞的增殖,提示CXCR4在胶质瘤发展过程中具有重要作用。 袁宏 冯虎 家秀秀 姚晓晴 王溪关键词:CXCR4基因 U87细胞 细胞周期 辐射后A549细胞上清外泌体TMEM88蛋白表达与细胞周期的相关性 2017年 目的探讨辐射对肺腺癌A549细胞细胞周期的影响,观察其细胞上清外泌体TMEM88蛋白(transmembrane protein 88)的表达情况。方法取对数生长期肺腺癌A549细胞,按0、0.5、1、1.5、2 Gy剂量(剂量率1.75 Gy/min,300 Mu/min)照射细胞,培养6和12 h后,流式细胞术检测不同辐射剂量对细胞周期的影响;收集细胞上清,超速离心提取外泌体蛋白,Western blot法分析外泌体TMEM88蛋白的表达情况。结果 G2期细胞6 h检测结果显示,与0 Gy组相比,各剂量组细胞比例显著增加(P<0.001),且随照射剂量增加,细胞比例增加越明显,除0.5 Gy组与1 Gy组外,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.001);12 h检测结果显示,G2期细胞比例随照射剂量增加而显著增加,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。S期细胞6 h检测结果显示,与0 Gy组相比,0.5、1.0、1.5 Gy组S期细胞比例显著增加(P<0.05);12 h检测结果显示,与0、0.5 Gy组相比,1.0、1.5 Gy组S期细胞比例显著增加(P<0.05)。随照射剂量的增加,外泌体TMEM88蛋白的表达逐渐降低,6 h检测结果显示,0 Gy组与1.5、2.0 Gy组以及0.5 Gy组与2.0 Gy组相比,差异均有统计学意义(P<0.05));12 h检测结果显示,0.5、1.0、1.5、2.0 Gy组与0 Gy组相比,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论辐射能够诱导肺腺癌A549细胞细胞周期阻滞,并能抑制细胞上清外泌体TMEM88蛋白的表达。 王溪 贾硕 张心馨 佟志敏 胡媛媛 金鹏 张红梅关键词:外泌体 肺癌细胞 细胞周期 热疗联合^(125)I粒子治疗复发性直肠癌的近期疗效评价 被引量:5 2017年 目的:通过比较复发性直肠癌患者治疗前、后影像学和血清中癌胚抗原(CEA)以及术后随访结果,评价热疗联合^(125)I放射性粒子治疗直肠癌的有效性。方法:手术且放疗后行CT引导下^(125)I放射性粒子植入术(20例手术治疗患者,1例患者无法耐受热疗退出),术前应用放射性粒子治疗计划系统(TPS)制定粒子植入计划,粒子间距为1.0cm,植入后立即复查CT,再行剂量验证,植入粒子数量为12~58颗,每颗粒子放射性活度为0.5mCi,肿瘤周边匹配剂量为90~140Gy。射频热疗,每次60min,维持温度43℃,每周2次,连续3周。治疗后随访3个月,通过影像学结果和血清中CEA水平变化评价有效率,并评估尿频、尿痛、血尿和直肠出血等并发症。结果:与治疗前比较,随访6个月后影像学结果显示肿瘤缩小;患者治疗后血清中CEA水平由治疗前(30.25±8.32)mg·L^(-1)降低到(11.89±5.22)mg·L^(-1)(t=13.158,P<0.01);局部有效率94.7%(18/19),疼痛缓解率为94.4%(17/18);治疗前NRS评分中位数为6(4,7)分,治疗后NRS评分中位数为1(0,3)分,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.01)。随访期间患者未出现尿频、尿痛、血尿和直肠出血等并发症。结论:热疗联合^(125)I放射性粒子植入对复发性直肠癌具有较好的临床效果,是复发性直肠癌有效的综合治疗手段。 王溪 韩今华 李云峰 杨艳明关键词:热疗 直肠肿瘤 复发 X线辐射对A549肺腺癌细胞周期和增殖的影响 2017年 目的探讨X线不同放射剂量对A549肺腺癌细胞周期和增殖的影响。方法培养A549肺腺癌细胞,分别用0Gy、0.5Gy、1Gy、1.5Gy、2GyX线照射细胞,并继续培养6h和12h后收集细胞,用PI法检测细胞周期,CCK8法检测细胞增殖。结果 G2期细胞6h检测结果显示,与0Gy组相比,各剂量组G2期细胞比例均显著增加(P<0.001),与0.5Gy、1Gy、1.5Gy相比,2Gy组G2期细胞比例也显著增加(P<0.05);12h检测结果显示,1Gy、1.5Gy、2Gy组G2期细胞比例均高于0Gy、0.5Gy组(P<0.05);1.5Gy、2Gy组G2期细胞比例高于1Gy组。S期细胞6h检测结果显示,各剂量组S期细胞比例均高于0Gy组(P<0.05),但各剂量组之间无明显差异;12h检测结果显示,各剂量S期细胞比例随辐射剂量增加而增加,除0Gy组与0.5Gy组、0.5Gy组与2Gy组外均具有统计学意义(P<0.05)。6hCCK8结果显示,与0Gy、0.5Gy组相比2Gy组细胞增殖能力显著减弱(P<0.05)。12hCCK8结果显示,与0Gy、0.5Gy组相比,1Gy、1.5Gy、2Gy组细胞增殖能力显著减弱(P<0.05)。结论辐射能够诱导细胞周期阻滞从而抑制细胞增殖,且在一定剂量范围内呈剂量依赖性。 王溪 佟志敏 胡媛媛 金鹏 李宁 李诗扬 崔营营 张红梅关键词:细胞周期 增殖 ^(60)Co放射治疗过程中膀胱的受照剂量 被引量:2 2004年 目的 :研究几种条件下 6 0 Co放射治疗恶性肿瘤时膀胱受照剂量 ,以便改进治疗方案 ,减少和预防放射性膀胱炎的发生。方法 :采用热释光方法配以仿真人体模型模拟 6 0 Co放射治疗过程 ,对患者膀胱受照剂量进行监测。结果 :在 1个根治性治疗疗程内 ,盆腔前后位、后前位和胸腔前后位、后前位及下颈前野照射所致膀胱受照剂量分别为 4 2 .8、 2 5 .9、 0 .33、 0 .1 7和 0 .0 6 Gy。结论 :盆腔前后位、后前位 6 0 Co照射所致膀胱受照剂量较大 。 贺强 陈大伟 杨晓光 王溪 刘东 曲雅勤 吴镇凤 龚守良关键词:放射疗法 剂量效应关系