王秀敏
- 作品数：95 被引量：87H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院饲料研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项天津市科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 一种植物蛋白犬粮
- 本发明公开了一种植物蛋白犬粮，包括玉米、麸皮、豆粕、鸭油、风味剂、大豆分离蛋白、面粉、磷酸氢钙、钙粉、啤酒酵母粉、鸡肝粉、预混料、腐殖酸钠。以植物为主要原料，作为蛋白质的主要来源，通过其余料的混合复配，使其具有良好的采食...
- 陶慧王金全王秀敏韩冰王振龙刘杰
- 噬菌体裂解酶Lysep3的毕赤酵母重组表达和活性分析被引量：2
- 2020年
- 试验以突破噬菌体裂解酶Lysep3应用瓶颈为切入点,采用酵母表达系统对其进行重组表达以期降低生产成本,同时初步探究其体外抗菌活性和安全性,以期为临床试验提供数据参考。根据毕赤酵母密码子偏爱性优化并合成Lysep 3基因,将其连接至表达载体pPICZαA。经菌落PCR和测序验证后,将线性化重组载体pPICZαA-Lysep3电转化巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris X-33。重组酵母转化子经菌落PCR和摇瓶水平甲醇诱导重组蛋白初筛后,在5 L发酵罐中高密度发酵,发酵上清液经His-trap HPGE纯化柱纯化。通过抑菌试验和浊度试验进行rLysep3的抑菌活性分析,通过测定rLysep3对巨噬细胞RAW264.7细胞毒性和小鼠血红细胞溶血性进行rLysep3的安全性分析。结果显示,重组菌在5 L发酵罐中甲醇诱导120 h后Lysep3的表达量达749.2 mg/L。抑菌活性分析发现,rLysep3对肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪葡萄球菌及无乳链球菌均具有抑菌活性,且rLysep3可与EDTA联合作用使肠炎沙门氏菌菌落数下降1.6~1.7个数量级。此外,细胞毒性试验发现,rLysep3在1024μg/mL浓度下细胞存活率仍可达78.75%;溶血性分析显示,1024μg/mL浓度下溶血率仅为1.58%。上述结果证明,通过毕赤酵母表达系统实现了Lysep3的重组表达,rLysep3具有体外抑菌活性,且具低细胞毒性和低溶血性。从抗菌活性、产业化制备及安全性等方面初步显示出rLysep3具有开发为临床治疗禽肠炎沙门氏菌感染的新型抗菌药物的潜力。
- 闫伟杨娜毛若雨王秀敏王秀敏马炫炫郝娅王建华
- 关键词：毕赤酵母肠炎沙门氏菌抗菌活性
- 噬菌体裂解酶Lysep3在制备广谱抗菌药物中的应用
- 本发明提供噬菌体裂解酶Lysep3在制备广谱抗菌药物中的应用。本发明首次发现Lysep3对革兰氏阳性菌具有较好的抑制效果，同时在外膜渗透剂的联合作用下对多种细菌具有明显的抑制作用，且具有较低的对小鼠红细胞的溶血活性以及对...
- 王建华闫伟滕达毛若雨杨娜王秀敏郝娅马炫炫
- 文献传递
- 抗菌肽MP1106、其制备方法及应用
- 本发明提供一种基于Plectasin而设计的新型抗菌肽MP1106(Seq ID No.1)，并提供其在毕赤酵母中高效表达的方法。通过酵母密码子的偏好性优化抗菌肽MP1106编码基因，构建重组质粒后转入毕赤酵母中，实现5...
- 王建华曹鑫涛张勇滕达王秀敏毛若雨
- 文献传递
- 在重组毕赤酵母中高效表达抗菌肽NZ2114的方法
- 本发明提供一种在重组毕赤酵母中高效表达抗菌肽NZ2114的方法，通过构建含有经过酵母偏爱密码子优化编码抗菌肽NZ2114的DNA序列的表达载体，并转化毕赤酵母，获得的重组毕赤酵母经过发酵培养，分泌产生抗菌肽NZ2114。...
- 王建华张勇滕达王秀敏毛若雨
- 抗菌肽NZ2114在制备无乳链球菌抗菌药物中的应用
- 本发明提供抗菌肽NZ2114在制备无乳链球菌抗菌药物中的应用。本发明首次发现抗菌肽NZ2114对无乳链球菌及其生物膜具有抑制作用。实验表明，NZ2114对无乳链球菌具有高效、快速杀菌作用。同时，NZ2114对生物膜具有高...
- 王建华单玉雪滕达毛若雨杨娜王秀敏郝娅马炫炫
- 文献传递
- 在Pichia pastoris中组成型表达靶向抗菌肽AgPlectasin的方法
- 本发明提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达靶向抗菌肽AgPlectasin的方法。本发明利用GAP启动子替换载体pPICAgPlectasin中的AOX启动子，构建组成型重组表达载体pGAPAgPlectas...
- 王建华毛若雨滕达王秀敏张勇
- 文献传递
- 嵌合穿膜抗菌肽T11N2及其应用
- 本发明公开了一种新型的嵌合穿膜抗菌肽T11N2，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其是在高活性抗菌肽N2的基础上连接具有11个氨基酸的细胞穿膜肽Tat形成的嵌合多肽。抗菌肽T11N2结构简单、低毒安全、成本较低、合...
- 王建华王秀敏李占占毛若雨滕达郝娅王潇
- 一种用于转基因大豆检测的五基因标准质粒分子及其构建
- 本发明公开了一种转基因作物检测中必要的标准质粒分子及其构建方法。一种转基因大豆检测用标准质粒分子及其构建方法，所述标准质粒分子包含大豆内源基因Lectin特异性片段、35S启动子和NOS终止子特异性片段、转基因大豆品系A...
- 王建华王秀敏滕达杨雅麟
- 文献传递
- 防腹泻布拉酵母培养条件的响应面法优化被引量：4
- 2013年
- 在摇瓶水平上对布拉酵母(Saccharomyces boulardii)培养基及培养条件进行优化。先通过单因子法筛选最优碳源、氮源及无机盐,再利用响应面法优化发酵培养基组分及培养条件,采用Plackett-Burman法筛选影响布拉酵母生长的主要因素,用最陡爬坡试验及Box-Benhnken设计进一步优化选定的主要因素。得出最佳发酵培养基为:麦芽糖2%,蛋白胨2%,酵母浸提取物2.08%,培养基初始pH值为6;最佳发酵条件为:温度29.6℃,转速250 r/min,250 mL三角瓶培养基装量29 mL,接种量为5%,培养时间为24 h。优化后的布拉酵母菌体湿重达到32.2 g/L,比优化前(20.9 g/L)提高了54.1%;优化后活菌数达8.3×108CFU/mL,比优化前(5.5×108CFU/mL)提高了50.9%。
- 胡小媛滕达张勇毛若雨王秀敏黄建忠王建华
- 关键词：响应面法
