王蓓
- 作品数：106 被引量：279H指数：10
- 供职机构：广东海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗的制备及免疫效果评价被引量：1
- 2014年
- 为了研究无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗对罗非鱼链球菌病的免疫保护作用,本研究通过PCR和重叠延伸拼接技术(SOEing)获得融合基因Sip-GAPDH,连接至真核表达载体pcDNA3.1(+)制备DNA疫苗,通过背鳍肌肉注射方式免疫吉富罗非鱼,免疫后第7、28天取样,采用PCR及RT-PCR方法检测pcDNA-Sip-GAPDH在各个组织(包括肌肉、脑、头肾、脾脏、鳃和肝脏)中的表达情况。采用ELISA、Real-time PCR法和体外攻毒法分别分析各实验组不同时间血清抗体效价、免疫基因(IgM、IL-1β和CD8)表达变化规律和相对保护率,研究该嵌合性疫苗对吉富罗非鱼的保护效果。结果显示,实验组在免疫接种第7和第28天时,注射点周围的肌肉、脑、头肾、脾脏、鳃和肝脏均能检测到嵌合性质粒,实验组罗非鱼血清抗体效价均高于对照组并于21 d时达到峰值(1∶4 096);qPCR数据表明,实验组鱼体胸腺、头肾和脾脏的IgM、IL-1β和CD8基因的mRNA表达量均出现了上调,并且在胸腺、头肾和脾脏中的表达量分别在免疫后第12和第48 h达到峰值;免疫后42 d进行人工攻毒后计算免疫保护率为93.3%。以上研究结果表明,本研究构建的无乳链球菌Sip-GAPDH嵌合核酸疫苗在罗非鱼链球菌病防治中具有潜在的应用价值。
- 王蓓李桂欢鲁义善汤菊芬汤菊芬吴灶和
- 关键词：无乳链球菌嵌合基因核酸疫苗
- 中草药与抗生素联用对罗非鱼源无乳链球菌的体外抑菌作用被引量：15
- 2016年
- 采用琼脂扩散法测定16味中草药水提物和19种抗生素的抑菌活性,筛选出抑菌作用较佳的3味中草药水提物和3种抗生素并测定其最小抑菌浓度(MIC),用常量棋盘稀释法测定3味中草药水提物和3种抗生素联用对罗非鱼无乳链球菌的微量抑制浓度指数(FIC index),研究中草药与抗生素联用对罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的体外抑菌效果。结果表明,16味中草药水提物和19种抗生素中,五倍子水提物、黄连水提物对无乳链球菌的体外抑菌作用最强,MIC均为3.9μg/m L;其次为板蓝根,MIC为250μg/m L;对无乳链球菌抑菌效果较好的抗生素依次为头孢唑林和头孢曲松(MIC 0.125μg/m L)、羧苄西林(MIC 0.5μg/m L)。联用实验中,黄连与头孢曲松、头孢唑林和羧苄西林联合用药的抑菌作用均表现为协同;五倍子与羧苄西林联合用药的抑菌作用表现为拮抗;板蓝根与3种抗生素联合用药的抑菌作用均为无相关。
- 李焯新蔡小辉黄瑜王蓓
- 关键词：罗非鱼无乳链球菌中草药抗生素
- 罗非鱼免疫学研究进展被引量：11
- 2014年
- 罗非鱼是我国主要的养殖鱼类之一,近年来频繁爆发的罗非鱼病害给罗非鱼产业造成了巨大的经济损失。鉴于免疫防治技术在水环境保护、食品安全等方面的优势,探讨鱼体免疫系统特性和免疫应答机制逐渐成为学术界的热点。就罗非鱼的非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫等方面的研究成果作一综述,旨在为今后深入研究罗非鱼病害的免疫防治技术提供一些可行的思路和有效的依据。
- 甘桢王蓓鲁义善汤菊芬简纪常吴灶和
- 关键词：罗非鱼非特异性免疫体液免疫细胞免疫
- 一种尼罗罗非鱼星形胶质细胞系及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种尼罗罗非鱼星形胶质细胞系及其构建方法和应用，涉及生物细胞模型技术领域。本发明针对尼罗罗非鱼脑组织，采用胰酶消化法分离脑组织细胞，再利用差速贴壁法能进一步减少成纤维细胞的干扰，能更大程度保留脑组织中的胶质细...
- 黎源王蓓鲁义善蔡佳黄瑜
- 马氏珠母贝(Pinctada fucata)血细胞转录组测序数据中SNP标记的开发及其功能注释分析被引量：8
- 2018年
- 本文基于马氏珠母贝(Pinctada fucata)血细胞比较转录组学数据进行单核苷酸多态性标记(SNP)的开发和关联基因的功能注释分析,以期为SNP标记的利用提供有效信息。在转录组测序获得的67632条SNP-unigenes中共获得962995个SNP位点,位点平均发生频率约为1个SNP/100bp;转换SNP数目与颠换SNP数目比值约为0.5,与理论比率相符;而6种单核苷酸变异类型中,以A/T颠换SNP最多。SNP-unigene功能注释分析表明,30376条unigenes(44.91%)匹配到GO分类条目;18150条unigenes(26.84%)获得COG注释信息,并以"一般功能预测"类最多;10981条unigenes(16.24%)富集到32条KEGG子集,其中以"信号转导"子集中富集的SNP-unigene最多。进一步富集分析显示629个SNP-unigenes注释到"Platelet activation"等多条免疫防御相关信号通路中;同时,根据SNP位点分布情况筛选到123个溶藻弧菌感染前、后转录组中特异分布的免疫防御相关候选SNP位点。基于标准化的基因表达水平分析,在17个差异表达免疫防御相关基因中共检测到1594个SNP位点。
- 王忠良丁燏丁燏许尤厚王蓓
- 关键词：马氏珠母贝转录组分子标记
- 尼罗罗非鱼CD247基因克隆及其组织表达分析被引量：6
- 2018年
- 【目的】克隆尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)CD247基因(Gen Bank登录号:MF975639;On-CD247),分析On-CD247的生物信息学特征及其在正常和经灭活无乳链球菌注射刺激的尼罗罗非鱼组织中的表达。【方法】设计CD247基因引物并对CD247基因片段进行扩增,运用荧光定量PCR技术分析尼罗罗非鱼CD247组织分布。【结果与结论】CD247基因编码区为453 bp,编码150个氨基酸,理论分子质量为16.9 ku,等电点为6.33,在跨膜区域有保守的ASP27、Asp35残基,胞内具有三段保守的免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)。On-CD247序列与红笛鲷(Lutjanus sanguineus)相似性最高,为74.0%,与其他鱼类的相似性介于35.8%～73.0%之间。On-CD247在健康尼罗罗非鱼各组织中均有表达,其中在胸腺中表达量最高,其次是皮肤、肌肉、鳃,在头肾中表达量最低。经灭活无乳链球菌刺激后,On-CD247的表达量在胸腺、头肾和肠道中均显著上调,而在脾脏中却显著下调,且有明显的时序性。胸腺、头肾和肠道均在3 h表达量最高,脾脏在12 h表达量最低,头肾中的表达量也在12 h回落,表明On-CD247表达可被无乳链球菌所诱导。
- 樊博琳黎源汪志文汪志文王蓓鲁义善
- 关键词：尼罗罗非鱼基因克隆无乳链球菌
- 溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法
- 一种溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法，以溶藻弧菌为材料，用提取总RNA、反转录、应用RD-PCR技术扩增反转录得到的双链DNA、分子克隆及ESTs生物信息学等方法对该菌进行研究。此方法具有质量高，所...
- 吴灶和王蓓简纪常鲁义善
- 文献传递
- 罗非鱼源无乳链球菌培养基及培养条件的优化被引量：7
- 2012年
- 研究无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQGY08的培养与生长特性,探讨脑心浸液(Brian Heart Infusion,BHI)培养基的营养因子、初始pH值、溶氧、温度等因素对无乳链球菌生长的影响,并采用正交实验法对无乳链球菌培养基营养因子添加量进行优化。结果表明,无乳链球菌生长的最适初始pH为7～8,培养温度为28～37℃,振荡转速为180～200 r/min。在BHI培养基中添加20 mg/mL的酵母粉和2 mg/mL的葡萄糖即可在对数期获得最大细菌量。
- 陈贺吴灶和王蓓黄郁葱鲁义善简纪常
- 关键词：无乳链球菌培养基
- 一种罗非鱼抗应激中草药益生菌制剂及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种罗非鱼抗应激中草药益生菌制剂，由以下重量份数的组分组成：鸡血藤10～20份、黄芪5～15份、黑豆20～40份、绿豆10～30份、甘草1～15份、金银花1～10份、板兰根1～10份、山楂5～20份、复合芽孢...
- 汤菊芬简纪常蔡佳黄瑜王蓓鲁义善黄郁葱蔡双虎
- 文献传递
- 超声波平板法检测溶藻弧菌HY9901生物被膜的研究
- 生物被膜存在广泛、难以发现并且具有处理困难等特点,对养殖业具有潜在的危害,并能引起水产品安全问题。本文以溶藻弧菌为研究对象,对定量检测生物被膜的超声波平板法进行条件优化,对优化的超声波平板法与平板擦拭法进行比较,并采用银...
- 王蓓吴灶和简纪常鲁义善汤菊芬黄郁葱
- 关键词：生物被膜溶藻弧菌
- 文献传递
