管宏伟
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡朊蛋白序列分析及结构特征探究被引量：2
- 2010年
- 目的分析罗曼鸡朊蛋白高级结构,探讨朊蛋白病种间屏障形成机制和朊蛋白构象转变机理。方法根据Gen-Bank提供的鸡朊蛋白基因序列设计特异性引物,扩增出8只罗曼鸡朊蛋白基因的完整开放阅读框(ORF)。结果序列分析表明8只罗曼鸡朊蛋白基因ORF有两处发生碱基置换(243C→T,296A→G),其中243位点为同义码替换。应用生物信息学工具分析罗曼鸡和已知的68个物种的朊蛋白基因,获得基于PrP氨基酸序列的遗传进化信息,进一步依据同源建模法构建人和鸡朊蛋白三维结构模型。结论不同物种朊蛋白构象同源性在很大程度上决定了朊蛋白病种间屏障的形成,多种因素共同作用导致正常朊蛋白转变为致病型构象。
- 刁小龙吴润刘磊王川赵春林王雄管宏伟
- 关键词：罗曼鸡朊蛋白
- 韭菜挥发油成分的气相色谱-质谱分析及抗常见病原菌活性研究被引量：10
- 2012年
- 采用水蒸气蒸馏法提取韭菜挥发油,通过体外抑菌试验检测其抑菌活性,确定体外最小抑菌浓度(MIC);并采用气相色谱-质谱(GC-MS)法分离检测韭菜挥发油成分。结果显示,韭菜挥发油具有广谱的抑菌活性,且对不同细菌的MIC不同。在韭菜挥发油中鉴定出17个组分,主要为二丙烯基-双硫醚(39.308%)、甲基-丙烯基-双硫醚(32.763%)、甲基-丙烯基-三硫醚(12.157%)、二丙烯基-三硫醚(7.330%)。结果表明,韭菜挥发油具有研发成新型抗菌药物与食品防腐剂的潜力。
- 王雄吴润张莉刘磊管宏伟罗鹏
- 关键词：韭菜挥发油常见病原菌体外抑菌气相色谱-质谱
- 禽白血病病毒多重PCR检测法的建立及初步应用
- 2013年
- 根据GenBank中登录的禽白血病病毒A、B、J亚群的核苷酸序列设计合成了3对引物，各对引物可分别扩增出大小约为195、260、924bp的核苷酸片段：经优化建立禽白血病病毒多重PCR检测法，并进行其敏感性试验及对马立克病病毒（MDV）、
- 范广习陆红仙管宏伟吴润赵春林
- 关键词：禽白血病病毒多重PCR检测法GENBANK核苷酸序列马立克病病毒
- 韭菜抗常见病原菌活性成分初步筛选被引量：2
- 2011年
- 以韭菜为试材,采用水蒸汽蒸馏提取法与有机溶剂萃取法分别提取韭菜抑菌成分,并通过体外抑菌试验检测不同提取成分的抑菌活性,确定其体外最小抑菌浓度.结果表明:韭菜乙酸乙酯萃取物与韭菜挥发油都具有广谱的抑菌活性,且对不同细菌的最小抑菌浓度不同.
- 呼志斌王雄吴润张莉赵春林刁小龙管宏伟
- 关键词：韭菜提取液常见病原菌体外抑菌
- 禽白血病病毒的多重PCR检测引物及其应用
- 本发明公开了一种禽白血病病毒的多重PCR检测引物，包括检测禽白血病病毒A亚群、B亚群和J亚群的检测引物，同时，公开了多重PCR的反应体系和反应条件。本发明所提出的检测方法具有快速、准确、廉价的优点。
- 吴润管宏伟万学瑞张小丽刘磊贾晓蕊刁小龙罗鹏何轶群
- 文献传递
- 兰州市及周边地区禽白血病病毒的分子流行病学调查被引量：6
- 2012年
- 为了解兰州市及周边地区禽白血病的流行情况及流行毒株的分子特征,从该地区11个鸡场和2个屠宰场采集抗凝鸡血1 294份,应用自建的禽白血病病毒(ALV)A、B、J亚群多重PCR诊断方法检测了A、B、J亚群的感染率与分布,进行了各亚群流行毒株gp85基因的序列分析。从1 294份样品中,共检出外源性ALV 486份,平均检出率为37.56%。其中检出ALV-A亚群16份,感染率为1.24%;ALV-J亚群383份,感染率为29.60%;ALV-A/J亚群68份,感染率为5.26%;ALV-B/J亚群19份,感染率为1.47%。序列分析表明,J亚群流行株gp85基因的核苷酸序列的同源性介于98%～100%,与J亚群英国毒株HPRS-103、美国毒株ADOL-7501、国内分离株SD9902、本实验室保存毒株(JX1、JX2、AH2和GZ1)间的同源性分别为97%～98%、86%～88%、96%～97%、98%～100%。在J亚群流行株中,发现gp85基因有13个核苷酸突变型,在共104个碱基置换中71个为异义突变、33个为同义突变,可区分为8个氨基酸突变型,突变位点主要集中在第200～400bp、第500～600bp范围的核苷酸之内和第120～240aa内。gp85基因进化关系分析表明,本地区J亚群流行株的8个氨基酸突变型均与英国毒株HPRS-103及国内分离株JX1、JX2、AH1和GZ1处于同一进化树分支。调查结果表明,兰州市及周边地区外源性禽白血病病毒感染现象较为严重且以J亚群为主,部分鸡场也可同时检出A、B亚群。
- 管宏伟吴润刁小龙罗鹏张莉何轶群艾文娜
- 关键词：禽白血病病毒多重PCR分子流行病学
- 鸡朊蛋白的原核表达及其抗血清的制备
- 2012年
- 运用分子生物学方法分别构建了pGEX-4T-ChPrP1、pGEX-4T-ChPrP2、pGEX-4T-ChPrP3重组表达载体,经转化大肠杆菌BL21(DE3)和IPTG诱导表达,并对融合蛋白诱导表达时间、IPTG浓度进行优化,诱导表达的GST-ChPrP(25～247)融合蛋白经GST-trap FF柱亲和层析纯化,用纯化后的GST-ChPrP(25～247)融合蛋白免疫新西兰雄兔,以探究鸡朊蛋白的结构与功能。结果表明,本试验成功构建了pGEX-4T-ChPrP1、pGEX-4T-ChPrP2、pGEX-4T-ChPrP3重组表达菌,SDS-PAGE分析结果显示,得到大小为50、42和32ku左右的融合蛋白GST-ChPrP(25～247)、GST-ChPrP(96～247)、GST-ChPrP(174～247),与预期结果基本相符,在最适条件下每升pGEX-4T-ChPrP1菌液通过GST-trap FF层析柱获得的GST-ChPrP(25～247)融合蛋白达10mg,制备的抗血清经琼脂糖凝胶扩散试验检测到较高的多克隆抗体效价(1∶32);Western-blot分析结果显示,融合蛋白GST-ChPrP(25～247)、GST-ChPrP(96～247)和GST-ChPrP(174～247)及鸡脑组织蛋白均可与该抗血清发生特异性免疫反应。证实,鸡重组朊蛋白具有良好的抗原性,与鸡脑组织朊蛋白具有相同的抗原成分。
- 罗鹏吴润刁小龙管宏伟张莉
- 关键词：朊蛋白原核表达抗血清抗原性
- 禽白血病病毒多重PCR检测法的建立及初步应用被引量：3
- 2012年
- 根据GenBank中登录的禽白血病病毒A、B、J亚群的核苷酸序列设计合成了3对引物,各对引物可分别扩增出大小约为195、260、924bp的核苷酸片段;经优化建立禽白血病病毒多重PCR检测法,并进行其敏感性试验及对马立克病病毒(MDV)、火鸡疱疹病毒(HVT)、新城疫病毒(NDV)、传染性囊病病毒(IBDV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和DF-1细胞基因组的特异性试验;应用该方法对1 294份临床样品进行禽白血病病毒检测,对阳性检出样品抽样进行测序鉴定.结果表明:该方法的最小检出拷贝数为103,特异性试验均为阴性,检出临床样品中的核苷酸片段与参考毒株核苷酸序列的同源性达98%以上,符合率100%,具有良好的特异性、敏感性和符合率,可为禽白血病病毒感染的临床诊断及流行病学调查研究提供有效借鉴.
- 管宏伟吴润赵春林刁小龙罗鹏何轶群
- 关键词：禽白血病病毒多重PCR检测核苷酸
- 兰州市部分地区鸡马立克病流行病学调查被引量：2
- 2013年
- 旨在了解兰州市及其周边地区鸡马立克病的流行情况及流行毒株meq基因的分子特征,对该病的进一步预防及控制提供参考。随机采集集约化养殖场950份羽髓和950份血液样品,进行琼脂免疫扩散试验、PCR检测及meq基因的检测和序列比对。结果表明,马立克的平均抗原阳性率为1.47%,PCR检测阳性率为2.52%,meq基因检测阳性率为1.37%,此位点4株突变株与MDV各参考毒株同源性为98.8%～100.0%。可见,所得突变株都具有强毒株的特征,突变与毒力强弱存在一定相关性。
- 艾文娜吴润刁小龙李叙涟何轶群管宏伟罗鹏
- 关键词：马立克病流行病学琼脂免疫扩散PCRMEQ基因
