綦柯
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Dishevelled 2对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞血管内皮生长因子表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的 对RA成纤维样滑膜细胞（FLS）体外分离培养方法进行优化,观察Dishevelled 2 （Dvl 2）在RA-FLS中对血管内皮生长因子（VEGF）分泌的影响.方法 将行膝关节置换的RA患者滑膜剪碎,利用优化的组织块法进行RA-FLS体外分离培养.构建Dvl 2慢病毒过表达质粒,转染后利用Q-PCR及ELISA检测VEGF mRNA及蛋白表达情况.然后再将转染后RA-FLS予TNF-α重组蛋白10 ng/ml刺激24h,再次检测VEGF mRNA及蛋白表达情况.采用两独立样本t检验进行统计分析.结果 成功将RA-FLS分离并进行体外培养.当感染复数为30并配合使用适当浓度的polybrene促进转染即可满足实验要求,Dvl 2的mRNA较空病毒对照组升高79倍.与空病毒对照组相比,Dvl 2对RA-FLS分泌VEGF有轻度抑制作用;TNF-α刺激后,Dvl 2达表达组VEGF的mRNA[（2.15±0.10）倍,（2.92±0.47）倍,t=-3.924,P=0.003]及蛋白[（285±100） pg/ml,（155±61） pg/ml,t=-2.714,P=0.022]均低于空病毒对照组.结论 Dvl 2可抑制TNF-α对RA-FLS分泌VEGF的促进作用,具体机制有待进一步研究.
- 刘兴振綦柯范洁徐卫东施冶青张兰玲赵东宝
- 关键词：WNT通路滑膜细胞血管内皮生长因子DISHEVELLED
- 改良经皮球囊导管法建立山羊急性脊髓损伤模型被引量：2
- 2013年
- 目的 探讨应用经皮穿刺技术向椎管内置入球囊导尿管致急性脊髓压迫性损伤动物模型的方法.方法 12只崇明山羊分为对照组（A组）、0.5 ml压迫组（B组）和1 ml压迫组（C组）.选择腰-骶椎板间隙体表投影处为穿刺点,局麻后使用血管经皮穿刺鞘管,将5Fr球囊导尿管输送至硬膜外腔,透视下确认导尿管头端到达T6水平.1周后分别以0.5和1 ml容量扩张B、C组导尿管球囊,持续压迫脊髓30 min后撤除.各组动物均在穿刺操作及球囊扩张前后接受CT和MRI检查,计算球囊导管的椎管侵占率,并采用改良Tarlov评分评估神经功能.分别于球囊扩张后48 h及72 h处死每组各2只动物,取压迫节段脊髓送检病理.结果 所有动物均顺利置管.CT测得置管后A～C组椎管侵占率依次为6.8％±0.7％、6.7％±0.7％和6.6％±0.6％.扩张球囊后B、C组椎管内侵占率分别增加到43.4％±2.5％和88.1％ ±2.3％;MRI提示球囊扩张后对脊髓腹侧右侧半形成压迫.置管后各组动物神经功能无明显受损,球囊扩张后B、C组出现后肢运动障碍.除A组外,病理检查显示球囊扩张压迫48 h后,相应节段脊髓呈现灰质内神经元胞体缩小,数量减少,胞体周围间隙增大,白质轻度脱髓鞘,部分轴突空泡样变;压迫72 h后病理改变明显加重.结论 球囊扩张后神经、影像和病理学的评估结果符合急性脊髓压迫性损伤的特点.经皮穿刺置管技术能够避免破坏脊髓正常生理环境,模拟符合临床实际的闭合损伤机制,是一种可行性较高的脊髓损伤建模方法.
- 黄轩陈智王琨何平李凤宁张帆綦柯宋庆鑫汤译博唐沂星侯藏龙沈洪兴
- 关键词：脊髓损伤球囊压迫
- 骨关节炎关节软骨自然退变过程中Dvl2及β-catenin表达变化被引量：7
- 2016年
- 目的探讨Dishevelled(Dvl)和β-catenin在骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨细胞自然退变中的表达情况。方法将膝关节置换的OA患者关节软骨细胞进行体外分离培养,采用自然传代的方法建立关节软骨退变模型。倒置显微镜观察P2、P6代关节软骨细胞的形态,流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡情况。利用Q-PCR及Western blot法检测Dvl2和β-catenin基因和蛋白的表达情况。结果成功分离并进行体外培养OA患者关节软骨细胞。P2代关节软骨细胞呈三角形或多角形;P6代时形态则变为梭形,并出现明显的纤维化。P6代时凋亡率(16.34%)显著高于P2代的凋亡率(8.63%)。P2代Dvl2的m RNA相对表达量为P6代的3.629倍(P=0.004),蛋白表达量为P6代的2.548倍(P=0.03),β-catenin的m RNA相对表达量为P6代的5.087倍(P=0.001),蛋白表达量为P6代的4.4倍(P=0.003)。结论 OA关节软骨细胞在体外自然退变过程中,凋亡增多,Dvl2及β-catenin表达则呈下降趋势。Dvl及Wnt/β-catenin在软骨细胞中的功能有待进一步研究。
- 刘兴振范洁李甲綦柯李大河徐卫东赵东宝
- 关键词：WNT通路骨性关节炎软骨细胞Β-CATENIN
