董长垣
- 作品数：93 被引量：187H指数：7
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 一种从血清标本中快速提取HBV DNA方法的建立被引量：15
- 2005年
- 目的:建立一种快速提取血清标本中HBVDNA的方法,即裂解液煮沸法。方法:以碱裂解法和经典的苯酚法为对照,比较3种方法提取的HBVDNA纯度和半巢式PCR后的阳性率。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA进行半巢式PCR的阳性率最高,与两种对照方法之间的差异有极显著意义(P<0.01)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。
- 郭龙华董长垣高婧郭淑芳陈晓刘文惠
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA提取半巢式PCR
- 黄芪总多糖对豚鼠皮肤HSV-1 HS-1株感染的治疗作用被引量：2
- 2003年
- 目的 观察黄芪总多糖在活体中的抗人疱疹病毒I型的作用。方法 以阿昔洛韦 (ACV)为阳性对照 ,以磷酸缓冲的盐水 (phosphatebufferedsaline ,PBS)以及含 10 %DMSO (二甲亚砜 )的PBS为阴性对照 ,用HSV - 1HS - 1株感染豚鼠皮肤的动物模型 ,观察了黄芪总多糖抗HSV - 1药效。结果 ACV、黄芪总多糖处理皮区的累积计分分别为 14 2 0± 6 70、 12 75± 3 5 8。ACV、黄芪总多糖处理皮区的痊愈天数分别为 7 70± 1 0 8、 8 5 0± 0 5 0 ;与PBS及含 10 %DMSO的PBS处理皮区之差异 ,有统计学意义 (P <0 0 5 )。HSV - 1HS - 1株感染过程中 ,各处理皮区的大体照片及皮肤样本的病毒滴度检测 ,获得了一致的结果。ACV与黄芪总多糖处理皮区的累积计分、痊愈天数 ,以及两种方法处理皮区皮肤样本的病毒检测结果 ,其差异均无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 黄芪总多糖与ACV药效相近 ,值得开发利用。
- 王志洁黄铁牛刘建军董长垣
- 关键词：皮肤
- 同时携带人血管内皮生长因子和血管生成素基因的内皮祖细胞血管再生研究
- 2007年
- 目的用腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）载体将人血管内皮生长因子165 （vascular endothelial growth factors,VEGF165）和血管生成素-1（angiopoietin-1,Angl）基因同时转入骨髓源性内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）中,观察外源基因的表达并评价其促血管再生的能力。方法用同时携带人VEGF165和Angl基因的AAV载体AAV2-hAngl/VEGF165转染体外培养的兔骨髓源EPCs,用RT-PCR和细胞免疫化学法检测外源基因的表达。实验用新西兰大白兔24只,制作成右下肢缺血模型,随机分成3组：PBS、EPC和EPC/AV组。造模后第10天,向缺血肌组织中分别注射PBS、EPCs和AAV2-hAngl/VEGF165转染的EPCs,用免疫组织化学法评价其血管再生效应。结果EPCs可高效地被AAV2-hAngl/VEGF165转染而表达Angl和VEGF165。细胞移植4周后,EPC/AV组存活的EPCs密度（283±137）/mm^-2明显高于EPC组（191±88）/mm^-2;EPC/AV组的毛细血管密度（856±212）/mm^-2明显高于EPC组（564±177/mm^-2）和PBS组（308±112）/mm^-2;α-SMA阳性血管密度（6.9±3.0）/mm^-2明显高于PBS组（3.6±1.8）/mm^-2,P〈0.05。结论AAV载体可同时将人VEGF165和Angl基因转入EPCs中,转染后的EPCs具有更强的促血管再生能力。
- 陈锋谭最董长垣谢友利吴云陈晓郭淑芳
- 关键词：血管内皮生长因子类血管生成素1腺相关病毒内皮祖细胞
- 蓝舌病毒HbC_3株与蓝舌病毒10型标准株感染人肺腺癌SPC-A-1细胞的生物学特性比较研究被引量：1
- 2004年
- 雷森林肖安涛刘春新陈保平方萍董长垣
- 关键词：溶瘤病毒蓝舌病毒感染性
- 腺相关病毒介导的血管内皮生长因子基因与内皮祖细胞联合治疗肢体缺血被引量：3
- 2007年
- 目的探讨腺相关病毒（AAV）介导的人血管内皮生长因子165（hVEGF165）基因转染的兔骨髓内皮祖细胞（EPCs）自体移植对于移植细胞存活率和缺血肢体血管再生的影响。方法构建、制备携带hVEGF165基因或β-半乳糖苷酶（β-gal）基因的AAV载体AAV-hVEGF165和AAV-LacZ；用AAV-hVEGF165和AAV-LacZ分别转染体外培养的EPCs，得到AAV／VEGF-EPC和AAV／LacZ-EPC，用RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术检测外源基因的表达。分别用AAV／VEGF-EPC、AAV／LacZ-EPC和PBS自体移植于兔右下肢缺血的肌组织，28d后行双侧肢体血流和免疫组织化学检测。结果AAV／VEGF-EPC和AAV／LacZ-EPC内可检测到外源基因的表达。AAV／VEGF-EPC、AAV／LacZ-EPC和PBS组患／健侧血流比值、毛细血管密度分别为0．73±0．21、0.64±0．13、0．45±0．10；（962±291）、（557±132）、（361±69）／mm^2。AAV／VEGF-EPC和AAV／LacZ-EPC组移植成活的EPCs密度分别为（330±81）／mm^2和（204±55）／mm^2。结论AAV能够高效将外源基因转入EPCs，对其进行基因修饰。自体移植从V-hVEGF165酤转染的EPCs可提高其移植存活率和增强其促进缺血肢体血管再生能力。
- 陈锋谭最董长垣陈晓郭淑芳
- 关键词：腺相关病毒内皮细胞血管内皮生长因子缺血
- 人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC_3株超微结构的动态观察
- 2006年
- 目的 探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法 利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成为亚病毒粒子，胞浆内有病毒包涵体及未装配成熟的亚病毒颗粒。随后亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构，形成成熟的病毒粒子。病毒感染细胞12～18h时，细胞以挤出的方式释放病毒并达到高峰。18-48h时，病毒进入超感染期，大量细胞发生病变，出现细胞凋亡和溶解。结论 一旦蓝舌病毒感染Hep-3B肿瘤细胞即可在细胞内增殖并诱导该肿瘤细胞进入凋亡，死亡的肿瘤细胞释放出的病毒粒子并再次感染其他肿瘤细胞，直至将全部肿瘤细胞杀灭，其溶瘤方式为链式反应。
- 汪艳雷森林郭淑芳易有荣董长垣
- 重组1型单纯疱疹病毒及制备方法和应用
- 本发明公开了一种重组1型单纯疱疹病毒及制备方法，重组1型单纯疱疹病毒为rHSVΔrr-34.5/lac，CCTCC-V200601。步骤是：重组质粒pAEB构建，穿梭质粒pSV1-AEB构建，RecA依赖的共整和体的形成...
- 齐义鹏祝华斌董长垣肖庚富兰萍薛峰苏越胡宝利肖巍
- 文献传递
- 蓝舌病毒选择性诱导肾癌细胞凋亡的研究被引量：1
- 2015年
- 目的研究蓝舌病毒湖北株（BTV-HbC3）对原代培养二倍体人肾小管上皮细胞（RTECs）、人肾癌细胞（A498）和小鼠肾癌细胞（Renca）的感染特性，并探讨其靶向性杀伤肾癌细胞作用及其机制。方法原代培养二倍体人肾小管上皮细胞（RTECs）并应用透射电镜方法鉴定，以1MOI BTV—HbC3感染RTECs、A498和Renea细胞48h后，观察光镜下细胞病变效应和扫描电镜下超微结构变化；MTT-F检测分别在0．001、0．01、0．1、1和10MOI的病毒感染RTECs、A498和Renca3种细胞48h后的存活率；用流式细胞仪AnexinV／FITC±P1分析1MOI BTV-HbC3感染3种细胞48h后凋亡情况，并检测A498和Renca细胞感染后的DNA ladder条带；流式细胞仪PI单染法分析感染前后细胞周期的变化；荧光显微镜观察感染后A498和Renca细胞核和内质网的变化。结果成功培养出二倍体的原代人肾小管上皮细胞，BTV-HbC3感染细胞A498和Renca细胞48h后均出现显著的细胞病变效应，电镜下胞浆中均出现典型的病毒颗粒；而RTECs对病毒不敏感，电镜下形态无变化，胞浆内未见病毒颗粒；10MOI的BTV-HbC3感染RTECs、A498和Renea细胞48h后存活率分别为：（99．25±3．27）％、（25．69±3．50）％和（22．63±5．85）％，A498和Renca细胞与RTECs比较有显著差异（P〈0．05）；流式细胞仪检测1MOI的BTV．HbC，感染48h后RTECs、A498和Renea早期凋亡率分别为（2．04-0．9）％、（52．04-3．4）％、（40．04-2．4）％（P〈0．01），A498和Renca细胞呈现典型的凋亡条带。细胞周期检测显示感染后A498和Renca细胞出现了s期阻滞，荧光显微镜观察到A498和Renca细胞核染色质固缩，边聚，内质网出现大量空泡，未感染A498及感染A498细胞内质网荧光值分别为56．396±7．658、33．497±5．836（P〈0．01）；而感染后Renea内质网也出现空泡，未感染A498及感染A498细胞内质网荧光值分别为70．146±4．754、42．
- 杜贤进张杰董长垣周晓光王肖周峰
- 关键词：溶瘤病毒蓝舌病毒肾肿瘤
- AVWC生物统计分析方法的建立及其应用研究
- 陈冬娥董长垣应时王圣基
- AVWC-test生物统计方法运用了数理统计学原理，以方差分析的三大基本特性：正态性、齐同性、可加性为主干，融累积、权重法于其中，实现了非参数统计资料用参数检验之目的，从而充分利用了研究资料信息，明显减小了检验误差(Ⅱ型...
- 关键词：
- 关键词：方差分析
- 乙型肝炎病毒X基因真核表达的载体构建及鉴定
- 2007年
- 目的:构建HBV X基因与pCDNA3.1相融合的高效真核表达载体,为进一步研究HBV X基因的功能奠定基础。方法:设计并合成HBV X基因的引物,以HBV DNA阳性血清PCR扩增得到HBV X基因全序列;将X基因连接到真核表达载体pCDNA3.1上后,酶切图谱分析、PCR检测和扩增产物序列分析等,鉴定所构建的真核表达载体。结果:以重组载体为模板扩增得到的片段大小与已知HBV X基因大小相同,酶切也得到目的基因片段,测序结果也显示与已知X基因序列相同。结论:成功构建了HBV X基因的真核表达载体,为进一步研究HBVX基因及其产物的功能奠定了基础。
- 朱珺刘军董长垣郭淑芳陈杰
- 关键词：乙型肝炎病毒X基因真核表达载体PCDNA3.1
