谈智
- 作品数：37 被引量：167H指数：7
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- L-茶氨酸局部给药抑制皮肤神经末梢的异常生长缓解小鼠银屑病瘙痒被引量：1
- 2021年
- 【目的】观察L-茶氨酸是否在咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠中具有止痒作用并初步探讨机制。【方法】将IMQ软膏局部应用于小鼠背部皮肤建立银屑病模型;L-茶氨酸经口服(10 mg/kg·d)或病损皮肤局部涂抹(50、125、250 mmol/L,2次/d)进行防治处理。采用抓挠等自发性行为学测试检测治疗效果;并运用免疫荧光染色(IF)、Western Blot(WB)及原代背根神经节(DRG)神经元培养技术探讨相关机制。【结果】口服L-茶氨酸对IMQ诱导的瘙痒无明显作用,但病损皮肤局部应用明显改善银屑病模型小鼠皮肤不舒适感诱发的舔或咬及畏缩等自发性行为,并呈浓度依赖性。IF和WB结果显示,L-茶氨酸不仅能抑制模型小鼠皮肤TNF-α过表达,还能阻止β3-tubulin神经纤维的异常生长和瘙痒相关分子瞬态受体电位香草酸1(TRPV1)的上调。体外实验进一步证实L-茶氨酸能浓度依赖性地直接抑制IMQ引起的CGRP+、β3-tubulin+神经突起异常生长。【结论】局部应用L-茶氨酸通过抑制皮肤神经纤维的异常生长缓解小鼠银屑病模型的皮肤瘙痒不适感。因此,L-茶氨酸局部给药可成为治疗银屑病慢性瘙痒的一种潜在方法。
- 揭英桃林震嘉张珺谈智许雅南熊媖唐源周利君
- 关键词：银屑病瘙痒肿瘤坏死因子-Α
- 膜雌激素受体介导的NO途径对EPCs增殖和凋亡的影响被引量：5
- 2010年
- 【目的】观察一氧化氮(NO)信号途径在膜雌激素受体介导的内皮祖细胞(EPCs)增殖和凋亡中的作用。【方法】在培养的EPCs上,分别使用E2-BSA、或加雌激素受体阻断剂ICI182,780、PI3K抑制剂LY294002和NOS抑制剂l-NAME,利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性(10组,n=9),利用化学比色法测定NO的含量(6组,n=6),Hoechst33258染色观察EPCs凋亡(8组,n=5)以及免疫印迹法检测EPCs磷酸化eNOS蛋白表达的情况(4组,n=4)。【结果】与对照组相比,E2-BSA可以促进EPCs的增殖,ICI182,780可以抑制其增殖作用,表明膜雌激素受体介导的信号通路参与雌激素对EPCs的增殖作用;NO合成和细胞凋亡结果显示,E2-BSA可以促进一氧化氮的合成和抑制血清撤退诱导的凋亡,PI3K抑制剂LY294002、NOS抑制剂l-NAME以及和ICI182,780可以抑制上述作用;免疫印迹结果显示,E2-BSA可以促使eNOS的磷酸化,而LY294002可抑制上述作用。【结论】膜雌激素受体可通过PI3K/Akt/eNOS信号途径抑制EPCs的凋亡从而促进其增殖。
- 谈智崔雨虹向秋玲林桂平王庭槐
- 关键词：雌激素内皮祖细胞一氧化氮
- 一种手动解离、免疫磁珠分选加TIC培养液改良的小鼠原代海马小胶质细胞培养法
- 2019年
- 本文旨在研究手动解离、免疫磁珠分选加TIC培养液改良原代小胶质细胞的培养方法,获得高活性、高纯度且与在体状态更接近的小鼠海马原代小胶质细胞,以用于小胶质细胞的相关研究。选取2~4周龄SPF级C57BL/6J小鼠,PBS灌注后取海马组织剪碎,使用成年鼠脑组织解离试剂盒手动解离海马组织,获得单细胞悬液,再经去碎片试剂去除髓鞘等组织碎片。在4℃孵育CD11b免疫磁珠15 min后,细胞悬液经免疫磁珠细胞分选(magnetic activated cell sorting, MACS)两次过柱提高小胶质细胞纯度。将分选后细胞离心重悬,种在多聚赖氨酸包被后的24孔培养板中,用完全培养基或TIC培养液(以TGF-β、IL-34和胆固醇为主要营养成分的无血清培养基)培养4 d后进行其他检测。结果显示:(1)使用成年鼠脑组织解离试剂盒手动解离可得到含有(56.03±2.10)%活细胞的单细胞悬液;(2)与免疫抗体包被筛选法(immunopanning)相比,经过MACS两步分选后,可得到更多且纯度高达(86.20±0.68)%的小胶质细胞;(3)使用TIC培养液培养4 d后,可获得分枝状、形态类似静息状态的原代小胶质细胞;(4) q RT-PCR检测显示,与完全培养基培养相比,TIC培养液培养的小胶质细胞在4 d和7 d后TNF-α、IL-1β及CCL2 m RNA表达水平更接近急性分离后的小胶质细胞。上述结果提示,采用手动解离海马组织,经MACS两步分选及TIC培养后,可以获得高纯度、高活性且接近在体静息状态的小胶质细胞。
- 许雅南周利君揭英桃麦春林张珺林震嘉谈智
- 关键词：小胶质细胞海马磁珠分选原代培养
- 大鼠含抗肝纤维化中药的血清对肝星状细胞的作用被引量：7
- 2003年
- 目的 :观察抗肝纤维化中药复方“肝纤方”(本单位自拟科研方 )对体外培养的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及其胶原合成的影响 ,并探讨中药抗肝纤维化研究中的一些血清药理学实验方法。方法 :以 16倍、8倍、4倍成人剂量肝纤方水煎液给大鼠灌胃 ,于 0 5、1、2、4h后制备两类血清 -门静脉血清和下腔静脉血清 ,将之作用于从SD大鼠肝脏分离培养的HSC ,以 [3 H]TdR和 [3 H]Pro同位素掺入试验测定其对HSC增殖、胶原合成量的影响。结果 :灌胃 0 5、1、2h后制备的门静脉和下腔静脉含药血清均能减少 [3 H]TdR的掺入量 (P <0 0 5 ) ;以 16倍和 8倍成人剂量灌胃制得含药血清的作用强于 4倍者 (P <0 0 5 ) ,但前二者间无明显差异 (P >0 0 5 ) ;灌胃给药后 1h制得的含药血清作用最强 (P <0 0 5 )。门静脉含药血清亦能减少 [3 H]Pro的掺入量 ,情况类似于上述对 [3 H]TdR的作用 (P <0 0 5 ) ;但下腔静脉含药血清无此作用 (P >0 0 5 )。结论 :肝纤方能抑制HSC增殖、减少其胶原合成 ,可能是其抗肝纤维化的一些具体作用。
- 凌云彪许瑞云邱万寿褚中华杨宏志谈智区庆嘉
- 关键词：肝硬化肝星状细胞胶原中草药
- 雌激素调控ET<,A>R表达在抑制ET-1诱导的血管反应和VSMC增殖中的作用
- 流行病学调查显示雌激素(estrogen,E)具有心血管保护作用.该研究重点从ET<,A>R受体亚型出发,利用生理、生化和分子生物学方法,从整体、细胞和分子水平研究雌激素对ET受体的影响,为深入探讨雌激素抗AS作用的机制...
- 谈智
- 关键词：雌激素雌激素受体血管平滑肌细胞内皮素内皮素受体
- 文献传递
- 皮下注射巨噬细胞集落刺激因子诱导机械痛超敏的性别二态性
- 2023年
- 【目的】通过正常小鼠皮下注射巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)来研究其对疼痛行为的影响是否存在性别差异,并初步探讨其机制。【方法】将30只10周龄C57 BL/6J小鼠随机分为三组(每组10只,雌雄各半):牛血清白蛋白对照组(BSA,0.3μg)、低剂量M-CSF组(L M-CSF,0.075μg)、高剂量M-CSF组(H M-CSF,0.3μg)。分别于左大腿内侧皮下注射50μL BSA或M-CSF,每日1次,连续3 d。给药前后采用von-Frey机械敏感性测试检测各组小鼠的机械撤足阈值(PWT)。再用免疫荧光染色法观察皮肤离子钙结合衔接蛋白1(Iba1),L5-L6 DRG及腰段脊髓背角中降钙素基因相关肽(CGRP)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的表达变化。【结果】在雌性小鼠中,只有高剂量M-CSF引起显著的机械痛超敏,而在雄性小鼠中两个剂量都引起明显痛觉异常。机制上,高剂量M-CSF诱导雌性小鼠皮下巨噬细胞大量聚集(Iba1标识);雄性小鼠巨噬细胞呈浓度依赖性增多,但没有雌性小鼠明显。在DRGs中,p-ERK与CGRP表达增多也存在类似的性别差异。值得注意的是,CGRP在雄性小鼠DRG的神经纤维中显著升高。相应地,脊髓背角浅层的p-ERK与CGRP+末梢在M-CSF处理后显著增多,且雄性小鼠多于雌性小鼠。【结论】皮下注射M-CSF诱发的机械性痛觉超敏存在性别二态性,并与外周巨噬细胞扩增和伤害性通路敏化的差异性变化有关。
- 彭湘格林震嘉张辉冷世泽唐源郑钰凡谈智周利君
- 关键词：痛觉超敏巨噬细胞巨噬细胞集落刺激因子降钙素基因相关肽
- 一种慢性原发性疼痛小鼠模型的构建方法及应用
- 本发明公开了一种慢性原发性疼痛(CPP)小鼠模型的构建方法及应用，涉及实验动物模型技术领域。本发明慢性原发性疼痛小鼠模型的构建方法包括以下步骤：(1)通过测定小鼠机械痛阈基线水平筛选纳入模型构建的小鼠；(2)采用低频经皮...
- 周利君冯霞谈智刘安然林震嘉
- 17β-雌二醇的快速舒血管效应及其内皮依赖和非内皮依赖的机制被引量：3
- 2007年
- 【目的】本实验旨在观察17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)的快速舒血管效应并探讨其内皮依赖和非内皮依赖的作用机制。【方法】采用MyodapandMyodata血管张力仪进行体外血管灌流实验,测量鼠离体胸主动脉环等长张力。【结果】E2能浓度依赖性地快速舒张血管,浓度为10-9～10-6mol/L时,去内皮的血管环舒张程度明显小于内皮完整的血管环,而当E2浓度增加至10-5mol/L时,去内皮的血管环与内皮完整的血管环舒张程度无差异;在内皮完整的血管环,分别用左旋硝精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)、亚甲蓝(methylene blue,MB)、他莫昔芬(tamoxifen)、甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)预孵育均能显著抑制E2(10-6mol/L)的舒血管效应;而在去内皮的血管环,E2(10-5mol/L)能抑制CaCl2在无钙高钾溶液中诱发的血管收缩。【结论】E2的快速舒血管效应,具有内皮依赖性,与雌激素受体介导内皮释放一氧化氮(nitricoxide,NO)有关,且质膜微囊结构必须完整,而当E2浓度较高时主要是通过抑制细胞外的钙内流直接舒张血管,为非内皮依赖性。
- 王庭槐杨艳芳付晓东谈智向秋玲林桂平
- 关键词：17Β-雌二醇血管舒张内皮
- Caveolin-3在白藜芦醇改善高脂诱导骨骼肌胰岛素抵抗中的作用被引量：1
- 2012年
- 【目的】在高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠模型上,探讨微囊蛋白3(CAV-3)在白藜芦醇改善骨骼肌胰岛素抵抗中的作用及机制。【方法】实验大鼠分3组:正常饮食组(NORM),高脂饮食组(HFD),高脂饮食加白藜芦醇干预组(HFD+RSV)。通过空腹血糖、胰岛素浓度、计算胰岛素敏感指数、腹腔葡萄糖耐量试验以及2-脱氧-[3H]葡萄糖的摄取,从整体上探讨白藜芦醇对胰岛素抵抗的保护作用。再通过免疫印迹检验微囊蛋白3(CAV-3)与葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在以上过程中的表达情况。【结果】HFD能显著诱导胰岛素抵抗,补充RSV能抑制高脂的诱导作用。离体骨骼肌实验证实,RSV的保护作用与其促进胰岛素诱导的葡萄糖摄取有关。免疫印迹证实RSV能够增加骨骼肌CAV-3蛋白表达,促进GLUT4向细胞膜的转运。【结论】白藜芦醇能改善高脂诱导的胰岛素抵抗,其保护作用与其上调CAV-3蛋白表达,促进GLUT4向细胞膜转运,改善骨骼肌葡萄糖的摄取有关。
- 邵明明苏嘉陈泽楷杜雨末金希谈智
- 关键词：白藜芦醇胰岛素抵抗微囊蛋白葡萄糖转运蛋白4
- 一氧化氮信号途径在17β-雌二醇抑制血管平滑肌细胞增殖中的作用
- 目的:探讨一氧化氮(NO)信号途径在17β-雌二醇(E)抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用及其机制,阐明雌激素血管保护作用的细胞内信号转导途径。方法:利用培养大鼠VSMC,用比色法测定NO释放量,同位素法测定诱导...
- 杨丹谈智付晓东王庭槐刘培庆潘敬运
- 文献传递
