谢佳芯
- 作品数:9 被引量:9H指数:2
- 供职机构:第二军医大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 慢病毒介导碱性成纤维细胞生长因子在大鼠羊膜上皮细胞中的表达和分泌被引量:2
- 2010年
- 目的探讨以慢病毒作为载体,将带有分泌肽的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因片段转入大鼠羊膜上皮细胞(AECs)中,构建能稳定表达并分泌bFGF多肽的细胞载体。方法取妊娠晚期SD大鼠的羊膜组织进行AECs原代培养,用免疫荧光细胞化学和RT-PCR法鉴定;构建包含人神经生长因子(NGF)分泌肽-bFGF编码基因的慢病毒载体,并行慢病毒包装,用病毒上清对传代大鼠AECs进行感染并筛选,经免疫荧光细胞化学、RT-PCR及酶联免疫吸附法(ELISA)检测基因转染效果,体外培养观察基因转染后的细胞生长活性;用基因转染细胞的培养上清对PC12细胞进行培养,检测所分泌bFGF多肽的生物学活性。结果所培养的大鼠AECs经鉴定能表达上皮特异性标志物CK-19、神经类细胞标志物巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及细胞多能性标志分子SSEA-4、Oct-4、Nanog、Sox2、波形蛋白(vimentin)等;经感染并筛选后扩增培养的大鼠AECs在mRNA水平及多肽水平均能检测到目的基因bFGF的表达,筛选后的转染细胞生长活性较未转染细胞明显提高,其培养上清能明显促进PC12细胞的生长和分化。结论用慢病毒作为载体能成功将bFGF基因转染入大鼠AECs中,所建立的基因修饰AECs能表达并分泌bFGF多肽,具有较强的生长活性及神经营养活性。
- 谢佳芯袁建明郭金萍由振东路长林许家军
- 关键词:羊膜上皮细胞碱性成纤维细胞生长因子慢病毒基因转染酶联免疫吸附
- 羊膜上皮细胞移植修复大鼠视神经损伤
- 许家军谢佳芯郭兵袁建明由振东路长林
- 羊膜上皮细胞修复大鼠视神经损伤
- 本文利用动物实验,在成年大鼠视神经横断伤后,伤区分别移植羊膜上皮细胞、羊膜上皮细胞诱导的神经干细胞、碱性成纤维细胞生长因子转染羊膜上皮细胞、胶原海绵羊膜上皮细胞复合体,能提高视网膜节细胞存活率,引导再生轴突长入伤区,促使...
- 许家军刘芳谢佳芯何俊山齐爱青郭兵袁建明
- 关键词:视神经损伤羊膜上皮细胞神经修复动物实验
- 文献传递
- 早期激素性股骨头坏死的氢气干预研究及机制探讨
- 研究背景: 股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)长期以来一直是骨科领域的一种难治性疾病,其发病机制至今尚未形成定论,多种病因均能引起股骨头局部血运、细胞功能以及骨修...
- 谢佳芯
- 关键词:激素性股骨头坏死氢气髓芯减压氧化应激
- 文献传递
- bFGF转染羊膜上皮细胞的建立及其对视神经再生作用的初步研究
- 目的:视神经损伤后虽然有神经再生的潜力,但由于整个微环境不支持神经再生,所以目前为止因视神经损伤或疾病导致的失明还没有较好的治疗方法,而基因修饰细胞载体的研究可为视神经再生提供新思路。因此,本研究从细胞移植的角度,建立用...
- 谢佳芯
- 关键词:视神经再生羊膜上皮细胞碱性成纤维细胞生长因子慢病毒视神经损伤
- 文献传递
- 哺乳动物神经细胞的去分化及诱导被引量:2
- 2009年
- 去分化是近年来细胞生物学,特别是新兴的干细胞生物学领域一个倍受关注的课题。大量实验证明,哺乳动物神经系统中各类神经细胞(如神经元、Schwann细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等)在适当条件下均可发生不同程度的以细胞幼稚化、重新进入细胞周期和获得多向分化的潜能为主要特征的去分化表现。本文就哺乳动物各类神经细胞的去分化及其诱导条件、对神经再生修复等的作用作一综述。
- 谢佳芯许家军
- 关键词:哺乳动物神经细胞去分化神经再生
- 毛囊神经干细胞促进受损大鼠视神经大胶质细胞去分化被引量:1
- 2009年
- 目的培养毛囊神经干细胞,研究其对受损视神经大胶质细胞去分化的影响。方法取约90g雄性SD大鼠触须垫毛囊隆突区贴块,无血清培养或经15%胎牛血清诱导培养毛囊隆突区细胞,用免疫荧光细胞化学和PCR鉴定;以含增强型绿色荧光蛋白的腺相关病毒(rAAV2-EGFP)稳定转染该细胞。成年雄性SD大鼠54只,分为正常对照组、损伤组、移植组,移植组为视神经损伤后移植上述毛囊神经干细胞。转染细胞移植组术后7d、14d、30d,取视神经荧光显微镜下观察;损伤组和未转染细胞移植组术后7d取术侧视神经行Affymetrix基因芯片及实时荧光定量PCR检测,术后7d、14d取术侧视神经行HE、免疫组织化学检测。结果成功培养出神经前体细胞标记分子阳性的毛囊神经干细胞,诱导后该细胞可表达成熟神经细胞标记分子。毛囊神经干细胞移植到受损视神经30d后,仍能存活和迁移。与损伤组相比,移植组差异表达基因有240条,其中一些与去分化相关,如干细胞、凋亡、增殖、信号转导、转录、分化发育、细胞黏附等相关基因,实时荧光定量PCR与基因芯片结果基本相符。移植组视神经远侧段细胞数较损伤组明显增多,巢蛋白、髓鞘碱性蛋白(MBP)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达增加,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达减少,且视神经近侧段神经丝(NF)表达增加。结论毛囊神经干细胞通过调节受损视神经中的一些基因表达,促进了其大胶质细胞去分化并向有利于神经再生方向变化。
- 郭金萍许家军刘芳蔺海燕袁建明谢佳芯
- 关键词:视神经去分化基因芯片
- 大鼠视神经损伤修复方法的探索及前瞻
- 哺乳动物视神经如同脑和脊髓一样,损伤后难以再生。因此,促进受损视神经再生一直是神经科学和眼科学的研究热点和难点之一,也可为脑和脊髓伤的修复提供一定启示。为此,近年来我们应用物理治疗、因子治疗、细胞治疗、基因治疗、组织工程...
- 许家军孙璟川刘芳蔺海燕郭金萍谢佳芯王若冰何俊山袁建明郭兵
- 羊膜上皮细胞的干细胞样特性被引量:5
- 2010年
- 干细胞移植技术面临的最大问题就是干细胞的选择和来源。羊膜上皮细胞(AEC)具有向一些三胚层(外胚层、中胚层和内胚层)细胞分化的潜能及类似干细胞的特性,免疫原性低且具有抗炎症作用,移植后无致瘤性和排斥反应。羊膜是产后废弃物,来源丰富,无伦理问题。因此,AEC在干细胞移植及再生医学上有广阔的应用前景,正逐步成为干细胞移植的理想来源。
- 汤宇谢佳芯许家军
- 关键词:神经细胞分化上皮细胞干细胞移植羊膜细胞表达