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低分子量鱼精蛋白介导的天花粉蛋白的抗肿瘤应用被引量：2: 2014年; 【目的】研究重组穿膜肽天花粉蛋白的抗肿瘤作用。【方法】利用蛋白重组技术,在天花粉蛋白的C端引入半胱氨酸,并以此作为修饰位点偶联穿膜肽,通过亲和色谱法分离纯化得到目的蛋白。以十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳检测目的蛋白的生成以及其对还原性物质的响应性。通过细胞摄取实验研究穿膜肽介导蛋白内吞摄取效率,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,测定穿膜肽天花粉蛋白修饰物的抗肿瘤活性。【结果】成功制备穿膜肽—天花粉蛋白复合物,此复合物具有一定还原响应性。且经过穿膜肽修饰后,天花粉蛋白在HeLa、MCF-7肿瘤细胞的摄取率明显增强,对HeLa、MCF-7细胞的抗肿瘤作用也显著提高。【结论】穿膜肽修饰天花粉蛋白可显著提高其抗肿瘤作用。; 梁剑铭曾峰陈应之谭娇陶鹏宇徐勤黄永焯; 关键词：天花粉蛋白穿膜肽基因重组细胞培养

泊洛沙姆188-PLGA纳米给药系统对抗耐药肿瘤的研究被引量：7: 2014年; 目的利用泊洛沙姆188对PLGA进行化学修饰,制备包载阿霉素的纳米粒,并评价纳米粒在人耐药乳腺癌细胞中的摄取能力及毒性。方法通过EDC/NHS法合成泊洛沙姆188-PLGA,通过核磁共振对其结构进行表征并测定临界胶束浓度;通过纳米沉淀法制备包载阿霉素的纳米粒,通过粒度仪对纳米粒的粒径及分布进行分析,通过细胞摄取实验及细胞毒性实验对纳米粒的摄取效果及毒性进行评价。结果成功合成了泊洛沙姆188-PLGA,并制备了粒径在140 nm左右的纳米粒,该纳米粒在人耐药乳腺癌细胞中有较好的摄取效果及较强的毒性。结论泊洛沙姆188能够逆转耐药,增强耐药细胞对化疗药物的敏感程度。; 王慧欣王慧媛张梦谭娇王雅萍梁剑铭赵永星黄永焯; 关键词：耐药 PLGA纳米粒泊洛沙姆 MCF-7/ADR

肿瘤微环境双重响应性的智能型蛋白毒素给药系统的构建和表征: 2014年; 目的利用蛋白重组技术和PEG定点修饰技术,制备具有肿瘤微环境双重响应性的智能型蛋白毒素给药系统。方法利用基因重组技术,在天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的C端引入天冬酰胺内肽酶(legumain)的底物天冬酰胺肽段和半胱氨酸残基,将所构建的突变体转化到大肠杆菌中表达目的蛋白并纯化。进一步将重组蛋白末端的半胱氨酸与具有巯基反应性的m PEG-Hz-Mal偶联合成TCS-Asn10-Hz-PEG,采用弱阳离子交换柱纯化TCS-Asn10-Hz-PEG,并在体外考察了TCS-Asn10-Hz-PEG的酸敏感性和酶敏感性。结果成功制备、分离和纯化得到了TCS-Asn10-Cys,完成了m PEG-Hz-Mal与TCS-Asn10-Cys的定点偶联,得到智能型蛋白毒素给药系统TCS-Asn10-Hz-PEG。TCS-Asn10-Hz-PEG在体外p H 5.6的介质中和天冬酰胺内肽酶的作用下,能够水解或酶解释放出TCS,具有酸敏感特性和酶敏感特性。结论本实验设计的蛋白毒素给药系统,具有酸敏感和酶敏感双重响应特性。; 谭娇陈应之蔺婷婷梁剑铭杨永新孙逊黄永焯; 关键词：天花粉蛋白聚乙二醇修饰肿瘤微环境 PH敏感

具有穿膜功能的嵌合型AVPI-低分子量鱼精蛋白/DNA共给药系统的抗肿瘤研究: 2014年; 本文旨在合成具有穿膜活性的促凋亡AVPI-低分子量鱼精蛋白嵌合多肽(AVPI-LMWP),制备安全有效的AVPI-LMWP/p TRAIL基因共给药系统,通过凋亡肽AVPI与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因(p TRAIL)联合用药来发挥抗肿瘤作用。采用标准固相合成法合成嵌合型多肽AVPI-LMWP。基于静电吸附作用,AVPI-LMWP可与DNA药物形成AVPI-LMWP/p TRAIL复合物,并对其理化性质进行了表征,同时研究其细胞摄取效率和抗肿瘤增殖能力。结果表明,采用共孵育法成功制备了AVPI-LMWP/p TRAIL复合物,随着AVPI-LMWP/p TRAIL质量比的增加,复合物的平均粒径逐渐减小,zeta-电位变化较小。凝胶电泳实验结果表明,当两者质量比大于15∶1时,AVPI-LMWP能完全包裹和压缩质粒p TRAIL。体外细胞摄取实验显示,随着二者质量比的增加,细胞摄取效率有所提高。体外细胞毒性实验表明,AVPI-LMWP/p TRAIL(W∶W=20∶1)复合物抑制He La细胞增殖的效果显著强于p TRAIL、AVPI-LMWP及LMWP/p TARIL复合物。研究显示,AVPI-LMWP/p TRAIL基因共给药系统能将质粒高效递送到He La细胞内,并能有效地诱导肿瘤细胞凋亡,是具有联合治疗应用价值的多肽/基因共给药系统。; 谭娇王雅萍王慧欣梁剑铭张梦孙逊黄永焯; 关键词：穿膜肽 TRAIL

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谭娇