赵桂华 作品数:66 被引量:202 H指数:8 供职机构: 山东省寄生虫病防治研究所 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 国家自然科学基金 山东省医药卫生科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 理学 更多>>
弓形虫棒状体蛋白2重要家族成员核酸疫苗的研究进展 被引量:3 2020年 弓形虫呈世界性分布,可感染几乎所有的温血动物并引起弓形虫病,目前已成为危害人类健康和影响畜牧业生产的重要公共卫生问题,但迄今尚无理想的药物和防治手段。伴随着弓形虫重要毒性因子作用机制研究的日趋深入,研制安全有效的抗虫疫苗是防治弓形虫病的有效策略。棒状体蛋白(rhoptry proteins,ROPs)是弓形虫在入侵宿主细胞过程中向宿主胞内分泌的效应蛋白因子,因在弓形虫入侵及逃避宿主免疫清除过程中发挥着重要的作用,目前已成为研制弓形虫疫苗的重要候选分子,其中棒状体蛋白2(ROP2)家族是研究最为深入的重要成员。本文就近年来ROP2家族重要成员的疫苗研究进展进行综述,旨在为研发安全有效的抗弓形虫病疫苗提供思路。 张丽新 赵桂华 尹昆关键词:刚地弓形虫 疫苗 弓形虫免疫作图蛋白1(TgIMP1)表位疫苗的设计及构建 被引量:1 2022年 目的设计基于弓形虫免疫作图蛋白1(TgIMP1)抗原蛋白的表位疫苗并进行结构验证。方法分别采用IEDB和ABCpred软件预测TgIMP1蛋白的B细胞抗原表位,分别采用SYFPEITHI和IEDB软件预测TgIMP1蛋白的T细胞抗原表位,运用DNA man比对筛选出T-B联合表位,在PfIMP2同源结构中验证表位性质并设计TgIMP1优势表位盒。结果通过计算机虚拟设计,得到了4条TgIMP1的优势B细胞表位(B1-B4)和2条优势T细胞表位(T1-T2),6条优势表位均处于PfIMP2结构外侧的无规卷曲区,且均为极性表面,适合作为表位疫苗的备选肽段。结论根据预测结果构建了3种TgIMP1优势表位盒,为多价表位疫苗的研发奠定基础。 徐昊志 周贝贝 刘俏俏 董宏杰 代莉莎 谢环环 孙航 王琦 张俊梅 赵桂华 徐超 尹昆关键词:抗原表位 弓形虫 靶向弓形虫Rop18的小分子抑制剂骨架及活性 目的 Rop18是强毒Ⅰ型弓形虫株的毒力决定因子,可通过其激酶活性结合宿主胞内免疫相关GTP酶IRGs和转录因子ATF6β,分阶段抑制宿主的先天和获得性免疫反应。筛选靶向Rop18激酶结构域的小分子抑制物,可为开发生物活... 赵桂华 徐超 朱嵩 肖婷 尹昆关键词:激酶抑制剂 药效团 弓形虫免疫作图蛋白1在大肠埃希菌中的重组表达及纯化 目的:克隆刚地弓形虫强毒RH株的免疫作图蛋白1(IMP1),并在大肠埃希菌内进行重组表达、纯化和鉴定.
方法:以刚地弓形虫RH株的cDNA为模板,PCR(聚合酶链反应)扩增IMP1基因的完整开放阅读框(ORF序... 尹昆 刘功振 李瑾 徐超 朱嵩 李琛琛 赵桂华关键词:弓形虫 大肠埃希菌 可溶性表达 蛋白纯化 文献传递 四川省黑水县利什曼原虫家犬感染率的检测 被引量:5 2010年 目的 了解四川省黑水县利什曼病流行区家犬的利什曼原虫感染现状,并比较PCR和ELISA检测利什曼原虫无症状感染的效能.方法 2009年5月在犬源型利什曼病疫区四川省黑水县随机选取的无内脏利什曼病现症的家犬,采集静脉血,采用ELISA方法检测血清中利什曼原虫特异性抗体,用两组PCR引物RV1、RV2和K13A、K13B检测血样中利什曼原虫特异DNA,并比较两种检测方法的敏感性.结果 PCR法检测抗凝静脉血阳性检出率为30.47%(32/105),ELISA法检测血清阳性检出率为19.05%(20/105).结论 四川省黑水县存在大量的利什曼原虫无症状感染犬,PCR是检测无症状感染较敏感的方法. 屈金辉 赵桂华 余清顺 王洪法 仲维霞 陈志荣 王淮东 西格基 崔勇 李瑾 孔凡红关键词:利什曼病 感染率 PCR ELISA C35基因诱饵表达载体的构建及活性检测 2011年 目的C35是一种新型的乳腺癌肿瘤标志基因,在乳腺癌细胞中存在普遍性高表达,可作为乳腺癌早期诊断的标志分子。为了进一步揭示C35基因在乳腺癌的发生和发展中对癌细胞的调控和信号转导机制,本研究拟构建C35基因的酵母双杂交诱饵表达载体,并进行自激活活性和诱饵蛋白毒性检测。方法采用RT-PCR自乳腺癌T47D细胞中克隆C35表达序列,合成3种C35基因片段,连接入诱饵表达载体pGBKT7,采用选择性培养皿和β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)分析检测重组质粒的自激活活性和细胞毒性。结果3种诱饵表达载体经鉴定全部克隆成功,其中C35全长基因的表达产物对酵母细胞具有生长抑制作用,两种截短体C35 1-153和C35 154-348不具有自激活活性和细胞毒性,无需3-AT抑制。结论C35全长基因的诱饵表达载体可能具有抑制酵母细胞自身蛋白表达系统的作用,两种截短体重组载体可应用于乳腺癌T47D cDNA文库双杂交筛选。 尹昆 肖婷 刘俏俏 赵桂华 朱嵩 闫歌关键词:乳腺癌 酵母双杂交 巢式PCR技术在输入性卵形疟诊断中的应用研究 被引量:12 2015年 目的应用巢式PCR扩增小亚单位核糖体核糖核酸(18S r RNA)基因确诊卵形疟原虫感染。方法采集2012-2013年山东省疟疾患者全血和滤纸血样,吉氏染色镜检观察血膜疟原虫形态并鉴定虫种。提取血样中DNA,根据疟原虫18S r RNA基因以属和种特异性引物进行巢式PCR扩增,筛查卵形疟阳性标本并进行测序验证。结果2012和2013年山东省共筛查到7例输入性卵形疟原虫感染病例。巢式PCR扩增7份血样均在800 bp处出现卵形疟原虫特异性单一条带,Blast比对表明产物序列与Gen Bank卵形疟参考序列一致。结论经巢式PCR方法确诊了2012和2013年山东省7例输入性卵形疟病例。 黄炳成 徐超 李瑾 肖婷 尹昆 刘功振 王卫艳 赵桂华 魏艳彬 王用斌 赵长磊 魏庆宽关键词:巢式PCR 输入性疟疾 弓形虫棒状体分泌毒性因子-假激酶的研究进展 被引量:2 2014年 弓形虫ROPs包括数十种速殖子分泌蛋白,在虫体的入侵、纳虫泡形成、增殖、出胞和逃避宿主细胞效应分子的攻击中发挥重要作用。ROPs属于蛋白激酶家族,其部分成员虽具有激酶结构域,但是由于某些关键位点的突变,失去了磷酸化宿主信号分子的作用,故称为假激酶。近年的研究认为,假激酶同样具有重要功能,例如通过变构调节激酶的活性;作为支架蛋白促进蛋白质分子间的相互作用。本文对弓形虫假激酶的结构特点和部分假激酶的功能进行了综述,对于研究弓形虫ROPs与宿主的相互作用、候选分子疫苗筛选和药物研发具有参考意义。 赵桂华 郝万东 尹昆关键词:弓形虫 刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本m^(6)A甲基化修饰的影响 被引量:1 2024年 目的分析刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰水平的影响。方法20只雌性C57BL/6J小鼠随机分为TgCtwh6感染组(7只)、LHG感染组(7只)和对照组(TgCtwh6感染组、LHG感染组的对照各3只)。TgCtwh6感染组、LHG感染组分别灌胃接种中国Ⅰ型wh6株(TgCtwh6)和中国Ⅲ型LHG株刚地弓形虫感染小鼠脑组织悬液0.2ml(20个包囊/鼠),对照组灌胃等量的生理盐水。分别在接种后15、30和45 d,用抽签法随机抽取感染组小鼠各1只,麻醉后处死,取脑组织,于显微镜下分别记录大脑皮层区、海马区和嗅球区的包囊数。感染后45 d每组分别取3只小鼠的全脑组织,提取总RNA,制备基因组文库,进行转录组测序,筛选差异甲基化位点(DML),统计感染组和对照组的mRNA的差异m6A甲基化位点及其所在转录本;对甲基化位点所在转录本进行基因本体功能注释(GO)分析,京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,对甲基化差异转录本进行基因集富集分析(GSEA)。选取甲基转移酶样3(METTL3)、肥胖相关蛋白(FTO)和YTH结构域3(YTHDF3)等3种m6A甲基化修饰蛋白基因,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因为内参,实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测其相对转录水平。结果感染组小鼠均感染成功。感染后45 d,大脑皮层、海马和嗅球的包囊数分别为(5676±10)、(4773±9)、(243±10)个。感染组和对照组共检出760650个甲基化位点,其中GGACA、GGACC、GGACT、ACGAT等4种m6A模体的甲基化水平分别占16.8%(127923/760650)、4.6%(35164/760650)、3.8%(28983/760650)和0.4%(3122/760650);共检出高甲基化位点所在转录本127016条,其中GGACA、GGACC、GGACT和ACGAT所在的转录本分别为71727、27754、24556和2979条。感染组与对照组小鼠脑组织转录组中ACGAT、GGACA、GGACC、GGACT等4种m6A模体的DML位点总数为9233,其中高甲基化位点4832个,低甲基化位点4851个。GO分析结果显示,DML所在转录本显著富� 解晓曼 孙航 代莉莎 朱文菊 王利磊 谢环环 董宏杰 张俊梅 王琦 周贝贝 赵桂华 徐超 尹昆关键词:刚地弓形虫 转录本 新型乳腺癌标志基因C35的研究进展 被引量:2 2011年 C35基因是近年来发现的在乳腺癌细胞中特异性高表达,而在正常乳腺上皮细胞中不表达的基因,且C35基因的高度表达较Her2/-neu更为直接,表达谱更为广泛和稳定。C35基因可通过其保守的ITAM结构域促使细胞癌变,已成为一种新的特异性乳腺癌标志基因。本文综述了C35基因的序列分析、表达调控、致癌机制、互作因子和结构研究等方面的研究进展。 尹昆 赵桂华 刘俏俏 肖婷关键词:乳腺癌