赵育桢
- 作品数：21 被引量：37H指数：4
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 逆转录病毒类载体在基因治疗中的发展和应用被引量：3
- 2005年
- 在当前的基因治疗临床实验中,最常用的基因运载体是经过人工改建的、携带有正常人类 DNA的病毒,通过感染的方式包裹和运送基因到人类细胞中。其中,逆转录病毒类载体无论是在应用广 度和研究深度上都远超过其他病毒。这主要是因为与其他病毒相比,逆转录病毒的免疫原性低,感染效 率高,整合性强,外源基因表达效率高,并且病毒本身具有一定的靶向性。本文将就逆转录病毒类载体 的特点、应用和目前研究的重点做一简要综述。
- 曹莉黄小义赵育桢
- 关键词：逆转录病毒基因治疗人类细胞免疫原性靶向性
- RASSF1A基因对食管癌细胞EC9706凋亡影响的研究
- 2010年
- 目的观察外源性RASSF1A基因诱导食管癌细胞EC9706凋亡作用并探讨机制。方法将包含RASSF1A基因的质粒pcDNA3.1(+)转染人食管癌细胞EC9706,建立稳定表达细胞系,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法、原位末端标记(TUNEL)、透射电子显微镜观察细胞形态研究RASSF1A对食管癌细胞生长的影响。结果建立稳定高表达RASSF1A基因的EC9706细胞系,高表达RASSF1A的细胞较转染空载体和未经转染细胞RASSF1A蛋白表达增加;细胞生长速度明显减慢(P<0.001);TUNEL与透射电镜均观光到细胞生长有明显的凋亡特征性改变(P<0.001)。结论 RASSF1A基因的外源性表达能显著抑制食管癌细胞在体内外的生长,其机制可能与该基因诱导凋亡、抑制增殖作用有关。
- 张铁娃王胜发傅松滨孟祥宁赵育桢禹亮
- 关键词：食管癌抑癌基因RASSF1A凋亡
- 干扰素-γ对兔动脉损伤后平滑肌细胞增殖和迁移的作用被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨干扰素 -γ(IFN-γ)对动脉损伤后平滑肌细胞 (SMC)增殖和迁移的作用及其作用机制。方法 建立兔髂动脉球囊损伤动物模型 ,培养损伤后动脉 SMC,实验分 4组 :对照组、转化生长因子 -β1(TGF-β1)组、IFN-γ组、TGF-β1+ IFN-γ组。每组细胞加培养液或加入 10μg/L TGF-β1或 (和 ) 50 0 k U/L IFN-γ刺激 72 h,细胞计数和四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定各组 SMC的增殖 ,同时测定 SMC迁移。明胶酶谱分析 SMC中基质金属蛋白酶 -2 (matrix metalloproteinase-2 ,MMP-2 ,66k D蛋白 )的活力。结果 与对照组比较 ,72 h后 TGF-β1组细胞数和迁移距离增加 (P <0 .0 1) ,MTT A值检测细胞增殖抑制率为 -19.4% ;IFN-γ组细胞数和迁移距离减少(P <0 .0 1) ,细胞增殖抑制率为 15.8% ;TGF-β1+ IFN-γ组细胞数和迁移距离低于 TGF-β1组 ,细胞增殖抑制率为 -9.1%。明胶酶谱分析显示各组细胞均可检测到 MMP-2。,TGF-β1组还可检测 MMP-2酶原 (pro-MMP-2 ,72k D蛋白 )的表达。与对照组 (10 0 % )比较 ,TGF-β1组 MMP-2相对活力为 14 3 % ,IFN-γ组为 95% ,TGF-β1+ IFN-γ组为 10 9%。结论 IFN-γ可抑制动脉损伤后的 SMC增殖和迁移并减轻 TGF-β1的促 SMC增殖和迁移的作用。并且 ,IFN -γ可以抑制 SMC MMP-2活力?
- 梅宇栾天竹王桂照黄永麟富路傅松滨赵育桢
- 关键词：干扰素-ΓIFN-Γ动脉损伤平滑肌细胞细胞增殖动脉球囊损伤
- 应用RNA干扰技术抑制人胃癌细胞环氧合酶-2基因的表达研究
- 2007年
- 目的研究应用RNA干扰技术进行抑制胃癌SGC-7901细胞COX-2的表达研究。方法依据siRNA设计原则，针对人COX-2的mRNA序列，设计并合成3条21bp的双链RNA，瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901，Western印迹t验证基因沉默效率以筛选合适的siRNA序列；根据筛选出的有效序列，合成编码短发卡RNA的双链寡核苷酸，定向克隆到含有U6RNA聚合酶Ⅲ启动子的pSilencer^TM2．1-U6neo真核表达载体，稳定转染胃癌细胞SGC-7901中，经G418筛选，获得克隆细胞。结果筛选出一条有效的干扰序列，位于291—311bp，成功构建表达载体，COX-2在蛋白水平的表达明显被抑制。结论利用化学合成siRNA进行初筛，再构建shRNA表达载体，可快速实现目的基因的表达抑制。
- 孙凌宇赵亮薛英威赵育桢白静傅松滨张岂凡
- 关键词：胃癌环氧合酶-2RNA干扰基因治疗
- 人卵巢癌细胞UACC-1598单克隆亚系双微体数目稳定性研究
- 目的研究UACC-1598细胞在传代培养过程中双微体稳定性及其相关机制。方法对人卵巢癌细胞UACC-1598进行了单细胞克隆的挑取和培养,建立了多个亚系,对其进行传代培养。制备中期染色体观察染色体结构,并计数DMs数目确...
- 黄昀金焰赵育桢陈峰白静傅松滨
- 关键词：双微体单克隆
- 文献传递
- 应用重组基底膜侵袭技术对人肺腺癌细胞侵袭能力的研究被引量：5
- 2000年
- 目的 研究RAB5A基因转染后对肺腺癌侵袭能力的影响。方法 采用重组基底膜侵袭实验 ,观察转染前后的细胞系对基底膜侵袭能力的改变。结果 转染pcDNA3.1 RAB5A正义表达载体的AGZY83 a细胞系基底膜侵袭能力增强 ,转染pcDNA3 AntiRAB5A反义RNA重组质粒的Anip973细胞系侵袭能力明显减弱。结论 RAB5A在人非小细胞肺癌的侵袭及转移特性的形成中具有重要的作用 ,RAB5A的反义分子能够有效地阻断该基因表达的翻译过程 ,在细胞内发挥预期作用。
- 王春梅赵育桢高凌寒刘芳莉李钰李璞
- 关键词：肺腺癌
- 地塞米松体外诱导大鼠胚胎垂体生长激素细胞的实验研究被引量：3
- 2005年
- 目的探讨糖皮质激素和生长激素释放激素(GHRH)对大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化的作用。方法利用免疫组化、放射免疫分析、RT-PCR和免疫电镜等方法,研究糖皮质激素体外诱导GH细胞分化的最佳浓度、所需要的最短时间及GHRH在大鼠胚胎垂体细胞分化中的作用。结果在体外培养的大鼠胚胎垂体细胞中,地塞米松能提高GH mRNA的表达水平,增加GH细胞内分泌颗粒的积聚。当GHRH浓度达到1 ×10-7 mol/L 时,可以增强地塞米松对GH细胞的诱导分化作用。结论地塞米松能够促进GH细胞的体外分化,并具有一定的剂量依赖性。GHRH与地塞米松具有协同效应,共同促进GH细胞的分化与分泌。
- 程玉胡志强初明赵育桢王超付松滨
- 关键词：生长激素地塞米松
- 淀粉样前体蛋白过度表达细胞模型的建立及对细胞增殖和凋亡的影响
- 2005年
- 目的:建立淀粉样前体蛋白过度表达的细胞模型,并观察其对PC12细胞形态及细胞增殖的影响和在氧化应激损伤时,对细胞生长及凋亡的影响。方法:实验于2003-09/2004-12在哈尔滨医科大学遗传与细胞生物学教研室完成。用脂质体转染对数生长期的PC12细胞,细胞分为3组:转染真核表达载体的正常对照组;淀粉样前体蛋白过度表达组;642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变淀粉样前体蛋白过度表达组,建立稳定表达的细胞株。用Western印迹法验证转染效果。使用细胞形态学方法、四甲基氮唑兰法观察对细胞形态和生长的影响;使用四甲基氮唑兰法、Hoechst33342观察在无血清培养24h后,100μmol/L过氧化氢作用4h对PC12细胞(经神经生长因子处理分化为交感神经元样细胞而接近于神经元)的影响。结果:①Western印迹法结果:转染真核表达载体的正常对照组无人的淀粉样前体蛋白表达,而淀粉样前体蛋白过度表达组和642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变:淀粉样前体蛋白过度表达组有人的淀粉样前体蛋白表达,说明转染成功。②野生型淀粉样前体蛋白和突变型642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变:淀粉样前体蛋白过度表达组基因转染PC12细胞后,与转染真核表达载体的正常对照组相比细胞形态及细胞突起的数量和长度无明显改变。③四甲基氮唑兰法测定结?
- 安丽荣金连弘张际绯赵育桢傅松滨
- 关键词：阿尔茨海默病PC12细胞转染
- 人app基因转染PC12细胞及效果检测被引量：1
- 2005年
- 目的研究转染人app基因后PC12细胞的生物学性状变化和检测app基因在受体细胞中的蛋白表达水平。方法用脂质体转染对数生长期的PC12细胞,细胞分为3组:转染PCDNA3的正常对照组,app转染组和变异的V642Iapp转染组。用G418筛选阳性细胞,建立稳定表达的细胞株。采用Western印迹法检测目的基因蛋白质的表达情况。使用细胞形态学方法、MTT法观察转染后对生长的影响。结果Western印迹法显示,转染app和V642Iapp组有人的APP蛋白表达。细胞形态无明显改变,MTT测定转染后细胞的倍增时间和生长时间没有因为目的基因的导入而改变。结论正常条件下培养,过度表达人的APP对细胞的形态、倍增时间和生长无明显影响。
- 安丽荣金连弘赵育桢傅松滨
- 关键词：PC12细胞WESTERN印迹法基因转染APP基因PCDNA3MTT测定
- 肺癌细胞系A549抗失巢凋亡的研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究FAK调节肺癌细胞系A549抗失巢凋亡的功能和信号通路。方法应用光镜观察，Hoechst33342染核、电镜、Western印迹、RNA干涉技术、P13K的抑制剂，对FAK调节肺癌细胞A549抗失巢凋亡的功能和信号通路进行研究。结果发现肺癌细胞系A549具有抗失巢凋亡的能力；A549细胞悬浮培养时，FAKtyr-397／861／925的活性随时间的延长逐渐增加后降低，磷酸化的P13K和AKT表现出与其一致的活性变化；通过RNA干涉实验发现干涉组比对照组细胞出现明显的凋亡现象，同时P13K／AKT的磷酸化水平下降；P13K的抑制剂组比对照组出现更多的凋亡细胞。结论FAK在肺癌细胞A549抗失巢凋亡中发挥了重要作用，其抗失巢凋亡的机制是通过激活下游P13K／AKT通路来实现的。
- 刘改云孟祥宁王佳曦赵育桢王哲傅松滨
- 关键词：失巢凋亡肺癌FAKP13K/AKT
