郑柏松
- 作品数：11 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 一种定量检测弓形虫的引物组及试剂盒和应用
- 本发明适用于生物技术领域，提供了一种定量检测弓形虫的引物组及试剂盒和应用，该引物组包括正向扩增引物和反向扩增引物；所述正向扩增引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1；所述反向扩增引物的核苷酸序列如序列表SEQ I...
- 张文艳郑柏松刘新李兆龙桓晨高文英王虹
- 嗜热β-1,4-葡聚糖内切酶和酰基肽水解酶突变体的晶体结构和功能研究
- 郑柏松
- 关键词：嗜热酶晶体结构
- 文献传递
- 新型高温纤维素酶的结构和功能
- 利用纤维素酶降解木质纤维素,不仅有利于提供新型生物能源,还可以减少化石能源所造成的环境污染。开发新型的嗜热纤维素酶,并揭示其催化和热稳定性机制等具有重要的理论意义和潜在的应用价值。我们对来源于嗜热细菌Fervidobac...
- 冯雁郑柏松王玉国
- 文献传递
- 新型嗜热脂肪酶的研制
- 冯雁任晓东于大为郑柏松张作明高仁钧韩四平
- 该课题组在已有的嗜热脂肪酶工程菌的基础上，通过定点突变技术，将古核菌蛋白酶部分难以在大肠杆菌中表达的遗传密码子改变为大肠杆菌中常用的密码子，提高嗜热脂肪酶在大肠杆菌中的表达率。利用生物统计学方法对重组大肠杆菌的发酵基质进...
- 关键词：
- 关键词：发酵大肠杆菌玉米浆
- 定向进化法提高嗜热酯酶对长链酰基酯的选择性
- 2011年
- 目的提高嗜热酯酶对长链酰基酯的选择性,并分析该酶的底物选择性与酶结构的关系。方法应用定向进化法,对APE1547突变体P01(APE1547/R526V)的催化结构域基因进行易错PCR后,与推进器结构域连接,转化大肠杆菌BL21-CodonPlus-RIL,在双重选择压力下(高温及活性测定),应用高通量筛选方法筛选突变体,并针对特定的突变位点进行进一步饱和突变筛选,得到对长链酰基酯底物pNP-C12选择性提高的突变体酶。通过热稳定性测定、催化动力学分析和分子动力学模拟分析突变对酶结构和功能的影响。结果从近万个随机突变体库中筛选到3株优势突变体,经测序得到4个氨基酸突变位点(379、394、489和560);对4个位点氨基酸分别进行饱和突变筛选,得到活性最高的突变体E01(APE1547/R526V/T560W),在80℃,P01和E01的半衰期分别为123和77 h;催化长链酰基酯底物pNPC-12的效率(kcat/Km)提高约14倍。分子动力学模拟分析表明,560位点突变可能阻碍底物pNP-C12沿次要通道进入酶分子内部。结论定向进化结合饱和突变的方法可有效提高嗜热酯酶对长链酰基酯底物的活性和选择性;嗜热酯酶APE1547内部的底物交通对酶的底物选择性具有重要影响,E01突变体通过显著改善pNP-C12在酶内部的底物交通提高了对pNP-C12的选择性,并对酶分子的稳定性有较大影响。
- 刘畅田国贺郑柏松张作明冯雁
- 一种定量检测耶氏肺孢子菌的引物组及试剂盒和应用
- 本发明适用于生物技术领域，提供了一种定量检测耶氏肺孢子菌的引物组及试剂盒和应用，该引物组包括正向扩增引物和反向扩增引物；所述正向扩增引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示；所述反向扩增...
- 郑柏松张文艳刘新桓晨李兆龙王虹高文英
- 文献传递
- 一种生物大分子蛋白质PF4在抗病毒感染中的应用
- 本发明适用于生物医药技术领域，提供了一种生物大分子蛋白质PF4在抗病毒感染中的应用，所述病毒为肠道病毒EV71、CA16、CA6和EVD68。本方法确定了细胞表达的分泌型PF4可抑制EV71、CA16、CA6和EVD68...
- 张文艳郑柏松裴志超
- 耐热纤维素酶基因、重组工程菌、耐热纤维素酶及应用
- 本发明属于生物工程领域，具体涉及来源于闪烁杆菌属(Fervidobacterium)细菌的耐热纤维素酶基因、重组载体、纤维素酶基因工程菌、耐热纤维素酶及应用。我们获得的耐热纤维素酶(FnCel5A、FnNHCel5A)能...
- 冯雁王校楠王玉国张作明郑柏松
- 文献传递
- 一种定量检测弓形虫的引物组及试剂盒和应用
- 本发明适用于生物技术领域，提供了一种定量检测弓形虫的引物组及试剂盒和应用，该引物组包括正向扩增引物和反向扩增引物；所述正向扩增引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1；所述反向扩增引物的核苷酸序列如序列表SEQ I...
- 张文艳郑柏松刘新李兆龙桓晨高文英王虹
- 文献传递
- 一种CAR-T细胞及其在制备艾滋病免疫治疗药物中的应用
- 本发明适用于免疫治疗技术领域，为艾滋病的免疫治疗提供了一种可杀伤携带HIV的CD4<Sup>+</Sup>T细胞的CAR‑T细胞制备方法及其应用。本发明中CAR‑T细胞的CAR结构包括从氨基端到羧基端串联表达膜定位信号肽...
- 张文艳郑柏松米执中王虹
