郝中香
- 作品数：21 被引量：73H指数：6
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技部科技人员服务企业行动项目国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 养殖池塘底泥水体中适用于TaqMan荧光定量PCR的不同DNA提取方法
- 2016年
- 通过人工模拟即在养殖池塘底泥和水样中加入阳性组织处理样品,对人工模拟的底泥样品分别采用磁珠法、酚氯仿法以及吸附柱法进行核酸提取,结果发现底泥含量对磁珠法和吸附柱法病毒DNA提取效果影响较小,而对酚氯仿法病毒DNA提取效果影响较大,且底泥含量较少提取相对较好。3种病毒DNA提取方法中采用混样提取核酸的效果均好于用上清液提取的效果。吸附柱法和磁珠法对病毒DNA提取效果较接近且明显好于酚氯仿法。通过对不同浓度的PEG6000进行浓缩后提取核酸,结果发现原始水样中未检测到Cy HV-2或其含量极低未达到检测限。PEG6000浓度为13%时,核酸浓缩提取效果最佳。本研究为实时监测养殖池塘中的底泥和水体中是否存在病毒提供了一种参考方法,从而更好地维护水产养殖环境的生态安全和促进我国水产养殖业健康可持续发展。
- 佘容郝中香罗丹林华张凤枰廖红陈世界刘耀敏杨苗薛昌华赵珊颜其贵
- 关键词：DNA提取
- TaqMan荧光定量PCR监测野猪乙型脑炎病毒被引量：2
- 2015年
- 为了更有效地保护野猪资源,评估其作为种质资源的安全性及人类驯养的风险性,采用Taq Man荧光定量PCR监测野猪乙型脑炎病毒的携带情况。结果显示,Taq Man荧光定量PCR敏感性是常规PCR检测方法的100倍,检测时间缩短了1/2。重复性试验中,批内及批间变异系数均低于2%。对40份家养野猪血液样品进行检测,Taq Man荧光定量PCR的阳性检出率为10%,国标(GB/T 22333-2008)中RT-PCR的阳性检出率为5%,灵敏度显著提高。表明该方法可用于野猪乙型脑炎的实时监测和流行病学调查,同时也为野猪群乙型脑炎的净化奠定基础。
- 赵珊林华陈世界杨苗薛昌华郝中香王彬文彩芳颜其贵
- 关键词：野猪乙型脑炎病毒
- 猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析
- 2014年
- 为有效监测四川巴中某猪场病死仔猪大肠杆菌的耐药性和致病性,对从该猪场病死仔猪的内脏和组织中分离得到的13株大肠杆菌进行了药物敏感性检测和动物致病性试验。结果表明,菌株对12种药物均存在不同程度的耐药,其中,对强力霉素、氟苯尼考和红霉素等7种药物的耐药率均达100%;对阿米卡星的敏感性最高,为69%。动物致病性结果显示,3号小鼠注射对应菌液16 h内死亡,剖检可见多个脏器组织均有出血;仔猪注射死亡小鼠分离纯化液后都没有死亡,但不同猪只出现不同的临床病理变化。该猪场大肠杆菌耐药性较为严峻,建议制定合理的用药方案实行交替用药,避免长期使用同一种药物。
- 文彩芳郗立新罗露张曼丽刘丹郝中香颜其贵
- 关键词：大肠杆菌耐药性
- 鲤疱疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表达及免疫原性研究被引量：8
- 2016年
- 根据G en Bank上已登录的鲤疱疹病毒2型的O RF5基因序列(登录号:AFJ20457.1)设计1对引物,采用PCR扩增技术获得目的基因。序列分析表明,目的基因长357 bp,是一个完整的开放阅读框,编码119个氨基酸,理论分子质量为13 059.70 u,无信号肽,无跨膜区,含有4个抗原表位。将扩增片段克隆至原核表达载体p ET-32a中,并将获得的重组质粒转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。对表达蛋白进行复性纯化后免疫小鼠和异育银鲫,SD S-PAGE和W estern-blot检测分析表明,重组蛋白的分子质量约为33 ku,与预期相符,表达形式为包涵体,该蛋白能够与抗H is标签的抗体发生特异性反应,也能识别病毒粒子上的ORF5蛋白。对免疫的异育银鲫进行攻毒,结果显示注射生理盐水组的银鲫保护率为0,注射15、25、50 g重组蛋白组的保护率分别为20%、30%、35%,表明免疫重组蛋白组的保护率高于对照组。本研究证实了表达的融合蛋白具有一定的免疫原性,丰富了鲤疱疹病毒2型ORF5基因及基因组的研究,为研发制备新型鲤疱疹病毒2型的疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。
- 廖红林华郝中香佘容陈世界杨苗陈珍容薛昌华赵珊韩国全曹三杰颜其贵
- 关键词：克隆表达攻毒保护试验
- 犬细小病毒在自然感染犬体内的分布调查被引量：1
- 2013年
- 利用PCR检测方法对疑似犬细小病毒(CPV)自然感染宠物犬的不同部位共141份样品进行检测,确定CPV在感染犬组织中分布情况。结果表明,眼分泌物、唾液、鼻液、血液、粪便、尿液、肺脏、肝脏、小肠和脾脏的CPV检出率分别为90%、91.7%、88.9%、89.5%、89.4%、80%、80%、40%、80%和60%;同时,采用抗原胶体金检测试剂盒对66份粪便样品进行检测,两种检测方法符合率为93.9%。从上述结果可以看出,从眼分泌物、唾液和粪便宜于获取的部位采样,检测率相对较高,可作为理想的检测部位。实验证明PCR方法较抗原胶体金检测试剂盒具有更高的灵敏性和准确性,可广泛用于临床病原的检查和流行病学的调查分析。
- 夏丹郝中香郭玲刘晓文彩芳颜其贵
- 关键词：PCR胶体金犬细小病毒检出率
- 犬瘟热病毒自然感染宠物犬不同部位检出率的分析
- 2012年
- 本试验利用RT-PCR检测方法对犬瘟热病毒(CDV)自然感染宠物犬的不同部位样品进行检测,确定CDV在感染犬组织中的分布情况。对14只CDV阳性犬的血液、眼分泌物、鼻液、唾液、粪便和尿液进行检测,RT-PCR方法检出的阳性率分别为92.9%、85.7%、100%、85.7%、100%和66.7%,结果显示粪便和鼻液样品的检出率最高,检出率达100%,宜于作为检测对象取材。
- 郝中香夏丹郭玲刘晓文彩芳颜其贵
- 关键词：犬瘟热病毒检出率
- 山羊鼻内肿瘤病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：9
- 2014年
- 根据GenBank中登录的山羊鼻内肿瘤病毒(ENTV)SC株的基因序列,设计合成了1对特异性引物,通过对反应条件进行优化,建立了一种快速检测ENTV的RT-PCR方法。结果显示,以该引物进行RTPCR扩增,能得到与理论设计值大小相符的323bp的特异性条带;与ENTV-SC株相应序列的同源性达98%;该方法最低可检测出6pg的ENTV;用此方法对健康山羊鼻黏膜上皮、健康牛鼻黏膜上皮、绵羊肺腺瘤病毒、肺炎球菌和大肠杆菌的扩增结果均为阴性,重复性和稳定性好;对随机收集的100份山羊样品进行检测,并与临床诊断结果进行比较,符合率为100%。结果表明,此方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性均好,可用于山羊鼻内肿瘤病毒的临床检测和试验研究。
- 郝中香谢智勇廖红刘丹郭玲刘杰杨绍林舒蕾颜其贵
- 关键词：山羊RT-PCR
- 微滴式数字PCR绝对定量应用研究进展被引量：7
- 2017年
- 1前言PCR是在核酸聚合酶作用下体外扩增DNA或RNA的实验技术。1985年美国科学家Kary Mullis申请了有关PCR的第一个专利[1],至此PCR发展成为科学研究领域的一项关键和常规技术,这种以PCR技术进行定性分析作为第一代PCR,此PCR也可以进行定量检测,但仅能进行终点检测.
- 龚永平郝中香陈珍容颜其贵
- 关键词：PCR体外扩增聚合酶DNA拷贝数
- 猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法
- 本发明涉一种猪胞内劳森氏菌的LAMP与PCR非诊断检测方法，本发明通过在线软件，根据引物设计原理，针对胞内劳森氏菌AM18025.2.1基因序列设计了PCR和LAMP特异性引物，在进行反应条件优化后成功建立了胞内劳森氏菌...
- 颜其贵罗露任露郝中香曹三杰文心田伍锐黄小波廖红
- 文献传递
- 异育银鲫CyHV-2检测方法的建立及江淮主产区CyHV-2感染的分子流行病学调查
- 由鲤疱疹病毒2型（CyHV-2）感染引起的鲫鱼疱疹病毒病是目前发现的唯一感染异育银鲫的病毒性疾病,2009年于江苏盐城地区发现后广泛流行,是自2005年异育银鲫“大红鳃”病后对异育银鲫养殖业造成巨大威胁的又一重大疾病。该...
- 郝中香
- 关键词：异育银鲫分子流行病学调查
- 文献传递
