目的构建一个能应用于T—bet转录活性研究和大规模筛选的报告基因质粒。方法以IFN-γ基因的CNS-22 T box结合位点序列为基础,人工合成顺式元件DNA(TbRE),重组连接到报告基因载体pLUC—MCS中。经测序验证后,转染293T细胞检测报告基因对T—bet的响应,并通过电泳迁移率检测(EMSA)证实T—bet与TbRE元件的特异结合。结果成功构建了TbRE—LUC报告基因质粒。经荧光素酶活性检测证实外源表达的T—bet对报告基因的表达可以有20倍左右的激活,并且存在剂量效应,T—bet的表达量与报告基因的表达水平呈正相关。经电泳迁移率检测验证,T—bet可以与TbRE顺式反应元件特异性结合。结论成功构建了T—bet转录活性相关的报告基因质粒TbRE—LUC,该报告基因系统反应灵敏,特异性强,可用于大规模筛选T—bet转录调控相关基因。
目的分析2020―2050年中国老年人口健康预期寿命(health expectancy,HE)及其性别差异的变化趋势,为中国人口长寿和健康之间的关系及其性别差异在未来的发展趋势提供证据和线索。方法基于2010年人口普查数据和1987年、2006年全国残疾人抽样调查数据,使用多状态人口预测模型(population-development-environment Analysis,PDE)和流行病学计算方法预测了死亡率和残疾率。使用Sullivan方法估计了2020―2050年50岁及以上人口分性别、年龄的无残疾预期寿命(disability-free life expectancy,DFLE)和伴随残疾预期寿命(life expectancy with disability,LwD)。结果中国老年人口的预期寿命(life expectancy,LE)在2020―2050年持续上升。其中,女性中LE的上升由LwD的上升所主导,而男性中DFLE的贡献略高。在75岁以下的女性和65岁以下的男性中呈现“功能残障扩张”且男性中更不明显;整个研究期间,80岁及以上女性的余寿中会有超过一半的时间伴随残疾度过,占比高于男性。女性的DFLE高于男性,绝对性别差异整体上随时期缩小,但在高龄老人中相对保持稳定;女性DLFE的占比低于男性,在2040年之后相对差异开始缩小,且在高龄老人中更明显。结论未来中国老年人口的功能状况可能会不断恶化。虽然在2040年之后DFLE的相对性别差异开始缩小,但这建立在LwD占比较高的情况下。在重点关注女性高龄老年人的功能状况的同时,应尽快建立起完备的长期照护体系。