都田赵
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅博士启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NK细胞表面Fcγ受体3A的基因多态性对NK细胞功能的影响被引量：1
- 2017年
- 目的研究自然杀伤细胞(NK)表面Fcγ受体3A(FCGR3A)的基因多态性对NK细胞功能的影响。方法取患者外周血,利用实时PCR方法确定FCGR3A基因型,在曲妥珠单抗刺激下进行体外培养。检测各基因型的NK细胞扩增倍数。同时检测NK细胞表面活化受体表达及其ADCC活性。结果体外在曲妥珠单抗刺激下,FCGR3A野生型患者的NK细胞扩增倍数是变异型的8倍左右。NK细胞活化受体表达及体外ADCC活性均高于变异型患者。结论体外实验结果表明FCGR3A的基因多态性影响NK细胞功能及对单克隆抗体的应答水平。
- 孙舒岚李晓曦苏楠都田赵张桂荣
- 关键词：自然杀伤细胞基因多态性曲妥珠单抗
- CircTPCN对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响及机制研究
- 目的:宫颈癌(Cervical cancer,CC)是世界范围内最常见的妇科肿瘤之一,高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)持续感染已被证实是其组织发生和进展的重...
- 都田赵
- 关键词：宫颈癌HELA生物学行为MTOR
- 文献传递
- WAVE生物反应器应用于CIK细胞培养
- 2017年
- 目的:探讨利用波浪(WAVE)生物反应器培养扩增肿瘤患者CIK细胞的效能及其对肿瘤细胞的杀伤活性。方法:分离8例肿瘤患者外周血单个核细胞,分别采用CIK细胞传统扩增技术(CIK组)和WAVE反应器培养方案(WAVE组),应用锥虫蓝染色并进行细胞计数,利用流式细胞术比较两组CIK细胞的扩增效率、活化情况及其亚群的组成变化,并以K562细胞为靶细胞检测扩增后CIK细胞的杀伤活性。结果:WAVE组细胞增殖数较CIK组明显提高(P<0.05或P<0.01);在第14天,WAVE组CD3^+CD8^+、CD3^+CD56^+细胞亚群比例明显高于CIK组[(78.56±2.99)%vs(74.54±3.02)%,(48.33±7.01)%vs(40.69±6.43)%,均P<0.05],而Treg细胞比例显著降低(P<0.05);当效靶比为10∶1、20∶1时WAVE组扩增的CIK细胞对K562的杀伤率明显高于CIK组(P<0.05或P<0.01),CIK细胞中CD3^+CD8^+CD107a^+的比例明显升高[(29.43±4.97)%vs(25.19±4.91)%,P<0.05]。结论:WAVE生物反应器扩增培养体系获得的CIK细胞数量多、纯度高,其中CD3^+CD8^+和CD3^+CD56^+NKT细胞比例较高,其对K562肿瘤细胞的杀伤效果明显高于传统培养技术获得的CIK细胞。
- 孟一鸣苏楠孙舒岚于志福李晓曦都田赵张桂荣
- 关键词：细胞培养体外扩增
- CircRALB对宫颈癌细胞株Hela细胞生物学行为影响的研究
- 2019年
- 探讨circRALB对宫颈癌细胞株Hela细胞生物学行为的影响。化学合成circRALB干扰序列si_RALB以及无关序列si_nc,瞬时转染Hela细胞。荧光定量PCR法检测干扰序列si_RALB对Hela细胞中circRALB表达的影响;细胞计数、MTS法、流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell实验检测circRALB对Hela细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果显示,瞬时转染效率为(89.67±3.1)%。干扰序列si_RALB转染Hela细胞,circRALB表达量为si_nc组的(47.3±1.5)%,差异有统计学意义;si_RALB转染组细胞增殖活性明显低于si_nc对照组,差异有统计学意义;si_RALB转染组细胞凋亡率为(9.17±1.17)%,si_nc对照组细胞凋亡率为(7.2±0.32)%,空白对照组细胞凋亡率(5.63±0.31)%,尽管si_RALB细胞凋亡率大于si_nc对照组细胞凋亡率,但差异无统计学意义;si_RALB转染组与si_nc转染组相比,划痕间距缩小不明显;si_RALB转染组Hela细胞穿膜数为(21.33±2.19)个,显著低于si_nc组(45.33±1.76)个和空白对照组(52±1.53)个。化学合成的circRALB干扰序列转染Hela细胞后,能显著降低细胞中circRALB的表达量。CircRALB表达下调可显著抑制宫颈癌细胞系Hela细胞的增殖、迁移和侵袭能力,但对其凋亡无明显影响。结果提示CircRALB的表达与宫颈癌细胞的生物学行为有关,可能成为有效的宫颈癌治疗靶标。
- 都田赵王雪莲
- 关键词：宫颈癌HELA生物学行为
- 原核表达载体GST-RUNX3的构建及其在大肠杆菌表达
- 2011年
- 目的构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法利用Kpn1和Xho1位点酶切pcDNA3.1-RUNX3质粒,将获得的1300bpRUNX3编码序列插入到pGEX-4T-2中,构建pGEX-4T-2-RUNX3质粒,并转化E.coli DH5α,筛选阳性重组子,酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入BL21中,经IPTG诱导表达后SDS-PAGE电泳鉴定。结果酶切pGEX-4T-2-RUNX3质粒获得1300bpRUNX3片段,经测序后获得的DNA序列与GenBank进行同源性比对,证实pGEX-4T-2-RUNX3构建成功。在E.coli BL21用IPTG进行诱导表达后,SDS-PAGE电泳方法证实了GST-RUNX3融合蛋白表达。结论成功构建了RUNX3原核表达载体,其融合蛋白在大肠埃希菌表达,为进一步纯化RUNX3蛋白和研究RUNX3的生物学功能奠定了基础。
- 王桂玲王孝会都田赵陈薇姜佩家
- 关键词：原核表达融合蛋白大肠埃希菌
- 原核表达载体GST-RUNX3的构建及其在大肠杆菌中的表达
- 2011年
- 目的构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-RUNX3为模板,通过Kpn1和Xho1酶切位点将RUNX3定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-RUNX3,并转化E.coliDH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coliBL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,鉴定。结果双酶切获得1300bp片段,证明RUNX3片段被成功导入pGEX-4T-2,并在测序后与GenBank进行同源性比对,比对进一步证实原核表达质粒pGEX-4T-2-RUNX3构建成功,并用IPTG诱导,SDS-PAGE方法证实了GST/RUNX3融合蛋白在大肠杆菌中的表达。结论成功构建了RUNX3原核表达载体,并证实了融合蛋白在大肠埃希菌中的表达,为进一步纯化RUNX3蛋白和研究RUNX3的生物学功能奠定了基础。
- 王桂玲王孝会都田赵陈薇姜佩家
- 关键词：质粒原核表达融合蛋白
