金文杰
- 作品数：233 被引量：1,008H指数：18
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 鸡贫血病毒细胞凋亡素基因的原核表达及其免疫学活性被引量：3
- 2002年
- 将鸡贫血病毒 (CAV)细胞凋亡素基因克隆入表达性载体 p GEX- 5 X- 3,在大肠杆菌中以融合蛋白的形式获得表达。再以表达产物免疫小鼠 ,制备抗 CAV凋亡素的多克隆抗体。以其对 CAV感染的 MSB1细胞作间接免疫荧光试验(IFA)检测呈阳性 ,表明表达产物保留了其相关的天然抗原特性。
- 刘岳龙秦爱建金文杰叶建强吉荣崔治中段玉友
- 关键词：原核表达免疫学活性鸡贫血病毒间接免疫荧光试验基因克隆
- 利用基因芯片分析鸡法氏囊差异表达基因被引量：2
- 2014年
- 为了解鸡法氏囊发育过程中转录组的变化,应用鸡基因表达谱芯片对从18胚龄、10和30日龄SPF鸡法氏囊组织抽提和纯化的mRNA进行芯片杂交,对差异表达基因进行了GO功能分类和KEGG信号通路分析,并利用荧光定量PCR验证了部分差异表达基因。结果表明,法氏囊总RNA的基因检出率在79%~85%,30日龄雏鸡与18胚龄鸡胚相比、10日龄雏鸡与18胚龄鸡胚相比和30与10日龄雏鸡相比分别筛选到5 043、2 368和1 874条差异表达基因,主要涉及到结合功能、细胞组成、代谢过程、细胞加工、生物学调节等功能,一些差异表达基因参与细胞因子及其受体相互作用通路、Toll样受体(TLR)信号通路、核苷酸寡聚化域样受体(NLR)信号通路、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路等。结果表明在法氏囊发育过程中,基因表达谱发生了很大变化,表明法氏囊发育是多基因参与的复杂的生物学过程,但这些差异表达基因在法氏囊的发育过程中的作用及其对法氏囊的功能的影响还有待于深入研究。
- 杭柏林桑建君钱琨叶建强邵红霞金文杰梅梅缪佶秦爱建
- 关键词：基因表达谱法氏囊差异表达基因
- 商品蛋鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及序列分析被引量：10
- 2010年
- 为了解商品蛋鸡群中J亚群禽白血病病毒(ALV-J)流行情况和病毒特性,本实验对感染血管瘤与髓细胞瘤混合型ALV-J的商品海兰褐蛋鸡进行了病毒分离,对2个分离株的致瘤关键基因序列LTR与gp85进行了测定,并与参考毒株进行比对,分析结果表明这两株病毒的LTR及gp85均存在显著的变异。在这两个基因的遗传进化树中均形成一个单独的分支:LTR的U3序列与参考毒株的同源性低至89.7%～92.4%,而参考毒株之间的同源性高达90.7%～99.6%,这两株病毒的U3区变异产生了一个与肿瘤形成与转移间接相关的调控元件TCF11(Transcription Factor11),但Y box、TATA box、CArG box都很保守;两株病毒的gp85氨基酸序列均在第179位缺失一个Lys,两个毒株的gp85蛋白序列与肉鸡分离毒株之间的同源性很低,为86%～89%,而与参考蛋鸡分离毒同源性相对较近,为89.2%。本研究证实从多种肿瘤类型并发的蛋鸡自然发病病例中分离到ALV-J病毒,其关键序列发生了显著的变异。
- 吴晓平钱琨秦爱建王平平沈海玉邵红霞金文杰
- 关键词：商品蛋鸡J亚群白血病病毒
- 马立克氏病病毒vIL8启动子的克隆及其转录活性
- 马立克氏病病毒(MDV)编码一种病毒性趋化因子——类白细胞介素8(vIL8)，其在致病致瘤中的作用尚不完全明了。本研究通过PCR方法克隆了vIL8 5’端潜在的启动子片段，构建不同长度的vIL8启动子控制下的pGL3-L...
- 秦爱建高巍金文杰邵红霞
- 关键词：马立克氏病病毒启动子转录活性淋巴组织
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒电化学发光免疫传感器研制
- 2020年
- 采用沉淀法制备硫化镉纳米晶体,并与氨水混合加热制备纳米硫化镉-氨水复合物(CdS-NH 3 NCs),将其修饰于玻碳电极后通过戊二醛将猪流行性腹泻病毒的抗体PEDV-2C11固定于电极表面制成电化学发光免疫传感器,实现了对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的定量检测.实验结果表明:当PEDV-2C11抗体与PEDV发生免疫反应时,CdS-NH 3与过硫酸根之间的电化学发光反应电子转移受阻,使得电化学发光强度降低;在最佳实验条件下,发光强度变化与PEDV浓度在1.65~1.65×10^5 TCID 50·mL^-1范围内呈良好的线性关系.该方法成功应用于样品中PEDV的检测,表明该电化学发光免疫传感器对猪腹泻病的临床诊断具有重要意义.
- 李晓彤王艳春高叶张晓蕾丁娅金文杰杨功俊
- 关键词：电化学发光免疫传感器
- 马立克氏病毒感染不同细胞中Meq与MHC-Ⅰ基因表达初探
- 为初步探索MDV MCQ与免疫相关基因MHC—Ⅰ之间的相关性.本研究应用荧光定量PCR技术对MHC—Ⅰ和MeQ在MDV感染不同细胞中基因表达水平进行检测。结果显示，在BUdR刺激下，MDV感染的淋巴细胞系MDCC—MSB...
- 郁川刘秋胡序明徐文财钱琨金文杰梅梅邵红霞秦爱建
- 关键词：马立克氏病荧光定量检测基因表达
- 小鹅瘟病毒常州株的鉴定及其致弱研究被引量：4
- 2008年
- 从具有小鹅瘟典型症状、病变的病死雏鹅病料中分离到疑似小鹅瘟病毒常州株GPV/JSCZ/2004/01。通过磷钨酸负染经透射电镜观察可见细小病毒样病毒粒子,取死亡胚尿囊液浓缩后与GPV阳性多抗血清作用显示有阳性琼扩线出现,通过GPV特异性引物和相应的PCR试验,扩增出了特异性的DNA条带。研究结果表明分离到小鹅瘟病毒常州株。对常州株第3代毒进行番鸭胚半数致死量(ELD50)测定,为10-3.1/0.2mL。将分离毒GPV/JSCZ/2004/01感染鹅胚成纤维细胞(GEF)并连续传代培养,结果显示该毒株在细胞培养传代到第9代时能用单抗介导的间接免疫荧光试验检测到病毒在GEF的感染,表明产生了细胞适应毒(CZ-ca)。取第14代细胞毒(CZ-ca14)10倍比稀释测定TCID50,同时进行雏鹅致病性试验,结果显示细胞毒的TCID50为10-9.4/0.2mL,对雏鹅的发病率和死亡率为0,但原始分离株的发病率和死亡率为100%。研究结果进一步证明小鹅瘟强毒株通过连续细胞传代培养可以达到致弱效果,为小鹅瘟病毒致弱研究提供了参考。
- 金文杰李清刘岳龙秦爱建刘学贤王建邵红霞施祖灏蒋小刚周卫东
- 关键词：小鹅瘟病毒毒力致弱
- 禽流感病毒H5N1亚型血凝素基因在昆虫细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- [目的]研究禽流感病毒H5N1亚型血凝素基因在昆虫细胞中的表达。[方法]将禽流感病毒H5N1亚型HA基因以BamHI和NotI双酶切插入pFastBacI载体构建pFast-H5HA转移载体质粒,然后将pFast-H5HA转入含有穿梭质粒的感受态DH10Bac中发生转座作用,在含有X-gal、IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上筛选白色菌落,通过连续传代4次后获得稳定的重组质粒reBac-mid-H5HA。[结果]将重组质粒reBacmid-H5HA转染Sf9昆虫细胞,获得含有禽流感病毒H5N1亚型HA基因的重组杆状病毒,经间接免疫荧光和Western-blot证实HA基因在昆虫细胞中获得表达。重组杆状病毒表达产物能够凝集鸡红细胞,并能被抗H5N1 HA单抗所抑制。[结论]重组血凝素蛋白在杆状病毒中能获得正确表达,为研制AIVH5亚型检测抗原和亚单位疫苗奠定基础。
- 王桂军邵红霞金文杰秦爱建
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因重组杆状病毒
- 抗禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制被引量：14
- 2003年
- 以H9亚型禽流感病毒免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用血凝抑制试验检测细胞培养上清,结果获得3株阳性细胞株,分别命名为6E6、6B6、5B4。经2次亚克隆后,所有杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感H9亚型特异抗体的能力。特异性试验证明,3株单克隆抗体仅与试验的H9病毒株反应,与H5亚型禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鹅源腺病毒等不反应。间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,3株单克隆细胞的上清均能与感染H9亚型病毒的鸡成纤维细胞呈持异性绿色荧光反应。实验性病毒检测结果表明,IFA方法检测H9禽流感比鸡胚接种分离病毒的效果好、灵敏度高,是一种经济实用的方法。获得的单克隆抗体可在禽流感流行病学的监测及预警预报中发挥重要作用。
- 钱琨秦爱建邵红霞刘岳龙金文杰
- 关键词：禽流感单克隆抗体血凝抑制试验间接免疫荧光试验
- 转化型人参皂苷对克隆抗体生成的影响
- 以转化型人参皂苷的8个组分，按12.5μg/ml和6.25μg/ml的剂量，来培养抗禽流感(AIV)H9亚型血凝素特异性单克隆抗体6E6株杂交瘤细胞和抗新城疫(NDV)血凝素与神经氨酸酶单克隆抗体10B11株杂交流细胞，...
- 许小琴金文杰李金贵秦爱建钱琨
- 关键词：单克隆抗体血凝抑制试验间接免疫荧光试验
- 文献传递
