钟丹丹
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：青岛大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技发展计划项目青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CD59-CD2对T细胞信号转导的作用被引量：10
- 2011年
- 目的将构建的CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体在Jurkat细胞中稳定表达,研究CD59与CD2分子在T细胞信号转导中的相互作用,探讨CD59向T细胞内传递信号的相关机制。方法酶切鉴定构建的pIRES-CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体,脂质体法转染Jurkat细胞,G418筛选建立稳定转染细胞系,免疫酶法检测转染细胞表面CD59的表达,Western blot检测转染细胞中CD59蛋白的表达;用CD59单克隆抗体作用于各组Jurkat细胞,使用激光共聚焦显微镜检测细胞浆内的Ca2+,ELISA检测细胞上清中白介素2(IL-2)的变化,比较各组差异。结果经酶切鉴定证实携带CD59-linker-CD2融合基因的重组质粒扩增成功;免疫酶法和Western blot证实CD59在转染细胞中稳定表达,且转染组L-Jurkat细胞比正常组Ju-rkat细胞CD59表达量增加,二者比较其差别有统计学意义(P<0.05);与正常细胞相比,胞浆内Ca2+和IL-2在转染细胞中均高表达,两组细胞比较其差别有统计学意义(P<0.05)。结论 pIRES-CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体可在Jurkat细胞中稳定表达,CD59mAb交联刺激后,CD59可通过CD2向细胞内传递信号,引起细胞内信号分子的一系列变化,为研究CD59与CD2在T细胞信号转导中的协同作用及进一步探讨CD59向T细胞内传递信号的机制奠定基础。
- 高美华钟丹丹张蓓
- 关键词：CD59基因融合基因JURKAT细胞细胞信号转导
- IL-21在慢性乙型肝炎中免疫调节作用的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨白细胞介素21（IL-21）在慢性乙型肝炎中的免疫调节作用.方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测32例慢性乙型肝炎病人（病人组）和29例健康人（对照组）血清中IL-21水平.提取外周血单个核细胞后分别设为IL-21刺激组、IL-2刺激组和未刺激组,多色流式分析技术检测CD8＋T细胞频率,胞内细胞因子染色技术检测CD8＋IFN-γ＋T细胞的频率.结果 与对照组相比,病人组血清中IL-21浓度明显增高（t=2.75,P＜0.01）;与IL-2刺激组和未刺激组相比,IL-21刺激组CD8＋T细胞频率及分泌IFN-γ水平显著升高（F=59.27、10.27,q=3.82～14.11,P＜0.01）.结论 IL-21通过对CD8＋T细胞的免疫调节效应参与慢性乙型肝炎病人体内病毒的清除,为临床治疗提供了新的靶标.
- 马伟平何大馨钟丹丹张蓓
- 关键词：白细胞介素21乙型CD8+T细胞免疫调节
- CD59-CD2融合蛋白真核表达载体的构建及对T细胞信号转导的作用研究
- 目的：构建CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体并在Jurkat细胞中稳定表达，研究CD59与CD2分子在T细胞信号转导中的相互作用，探讨CD59向T细胞内传递信号的相关机制。
方法：从人T细胞白血病细...
- 钟丹丹
- 关键词：CD59基因融合基因表达JURKAT细胞细胞信号转导
- CD59真核表达载体的构建及其对Jurkat细胞增殖的影响被引量：2
- 2011年
- 目的构建pIRES-CD59融合基因真核表达载体,探讨重组CD59在Jurkat细胞增殖中的作用。方法 RT-PCR法选择性扩增编码CD59的基因片段,克隆入pIRES真核表达质粒。脂质体法将重组载体转染Jurkat细胞,通过G418筛选获得稳定表达CD59的细胞克隆,利用RT-PCR和Western blot检测细胞中CD59的表达,通过MTT法检测Jurkat细胞的增殖。结果经酶切和测序鉴定表明携带CD59基因的重组质粒构建成功,RT-PCR和Western blot结果显示转染Jurkat细胞的CD59基因高表达,MTT实验显示转染CD59重组质粒的Jurkat细胞增殖速度明显快于对照组(P<0.05)。结论 pIRES-CD59真核表达载体在转染细胞Jurkat中可高表达CD59分子,并可影响Jurkat细胞的增殖,为研究CD59的生物学作用奠定了基础。
- 钟丹丹高美华张蓓
- 关键词：CD59基因JURKAT细胞细胞增殖
- CD59-linker-CD2融合基因真核表达系统的构建被引量：6
- 2011年
- 目的 CD59和CD2都是重要的淋巴细胞膜表面分子,参与T细胞信号转导。文中构建CD59和CD2融合基因真核表达系统,探讨CD59向T细胞传递信号的机制及CD59与CD2的相互作用。方法在CD59基因和CD2基因间加入一段柔性链接头(linker)基因序列,构建CD59-linker-CD2融合基因真核表达系统。利用RT-PCR法从人T细胞白血病细胞系Jurkat细胞总RNA中扩增CD59和CD2基因,分别构建CD59-T和CD2-T重组克隆载体,经限制性核酸内切酶酶切后与pIRES质粒进行重组,构建pIRES-CD59-linker-CD2融合基因真核表达系统。结果测序证实CD59和CD2基因扩增成功;经限制性核酸内切酶酶切、PCR和测序鉴定表明携带CD59-linker-CD2融合基因的重组质粒构建成功。结论构建CD59-linker-CD2真核表达系统为在真核细胞中表达CD59与CD2并进一步探讨其在T细胞信号转导中的作用提供了实验材料。
- 钟丹丹高美华李伟伟张蓓
- 关键词：CD59基因融合基因
