闵军
- 作品数:16 被引量:79H指数:6
- 供职机构:中山医科大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 70%肝切除对大鼠胎肝细胞脾内移植后增殖能力的影响被引量:1
- 2002年
- 研究 70 %肝切除对大鼠胎肝细胞脾内移植后增殖影响。分离孕 3周SD大鼠胚胎肝细胞 ,将其移植入 70 %肝切除大鼠脾内 ,分别于移植后 7天和 30天应用流式细胞仪分析肝切除大鼠残肝细胞的细胞周期 ,用图像分析法检测脾内移植胎肝细胞面积密度。与对照组比较 ,胎肝细胞移植后 7天 ,肝切除鼠残肝细胞S期细胞比例明显增加 (P <0 0 5 ) ,Gz/M期细胞比例明显减少 (P <0 0 1)。而其脾内移植胎肝细胞面积密度则显著升高 (P <0 0 5 ) ;30天后 ,残肝细胞再生状态与移植胎肝细胞的面积密度与对照组比较均无显著性差异。研究表明 ,70 %肝切除的肝再生有利于大鼠胎肝细胞脾内移植后的增殖。
- 杨明智闵军陈积圣刘星伟周晓东魏菁
- 关键词:脾内移植增殖能力肝切除术胎肝细胞
- 纯化大鼠胚肝细胞脾内移植增殖的实验研究被引量:6
- 2001年
- 目的探讨脾内移植后纯化胚肝细胞的增殖能力。方法免疫吸附法纯化胚肝细胞后脾内移植,图像分析和流式细胞仪检测脾内移植后胚肝细胞的增殖。结果移植后 3、 7、 14 d胚肝细胞的面积密度分别为( 1603±337)μm2/mm2、(3788±605)μm2/mm2、(8129±1025)μm2/mm2,增殖期细胞比率为1425%±4.11%、16.07%±5.35%、17.32%±5.17%,均明显高于成年肝细胞,差异有显著性(P<0.01)。结论纯化后的胚肝细胞比成年肝细胞更易于在脾内增殖。
- 徐国权周晓东魏菁闵军陈积圣
- 关键词:肝细胞胚肝细胞免疫吸附增殖
- 转γ-干扰素基因大鼠肝细胞模型的建立
- 1999年
- 目的:使用多聚阳离子脂质体载体(lipofectAMINE)在体外建立转γ干扰素(IFNγ) 基因的大鼠肝细胞模型。方法:利用lipofectAMINE在体外将IFNγ基因转染大鼠肝细胞。分别以RTPCR 和ELISA方法检测所转IFNγ基因在大鼠肝细胞的转录和表达情况。结果:以lipofectAMINE为载体的IFNγ基因转染大鼠肝细胞后,可被有效的转录并产生具有生物活性的IFNγ。结论:IFNγ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达。这可能为细胞因子的免疫治疗提供一种新途径。
- 王坤郭英闵军陈积圣
- 关键词:转染脂质体
- 血管内皮生长因子基因转染对肝细胞移植的影响被引量:5
- 2001年
- 目的探讨VEGF基因转染对移植后血管组织形成的作用及对移植细胞增殖的影响。方法SD大鼠 pcDNA3 VEGF121转染肝细胞移植 10 d后取样,行微血管密度(MVD)计数及增殖细胞核抗原(PCNA)染色。结果在体外VEGF转染肝细胞能产生足够的转基因蛋白诱导内皮细胞的增殖。而体内可形成大量移植细胞克隆及再生肝组织。各组MVD计数差异并无显著性,P>0.05;在VEGF基因转染组PCNA指数较pcDNA3对照组与非转染组显著升高,为13.13±2.75、4.75±1.58和4.63±1.41,P<0.01。提示在体内移植血管组织形成存在多重因素的影响,而VEGF基因表达可促进移植细胞增殖和再生肝组织形成。结论VEGF间接体内基因转染是诱导移植肝再生一有效方法。
- 王金林周晓东闵军张磊徐国权陈亚进张杰陈积圣
- 关键词:肝细胞移植增殖细胞核抗原血管内皮生长因子基因转染
- 转乙型肝炎病毒x基因肝癌细胞株的建立被引量:11
- 2000年
- 目的 建立表达转乙型肝炎病毒x基因 (HBx)的人肝癌细胞株 ,为研究HBx基因与肝癌生物学行为间的关系提供模型。方法 以聚合酶链反应 (PCR)法从 3.2kb乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组中扩增HBx基因 ,亚克隆至逆转录病毒载体 ,磷酸钙共沉淀法将其导入包装细胞系 ,以含病毒的培养上清感染人肝癌细胞系QGY770 1 ,新霉素 (G41 8)筛选 ,PCR与反转录PCR (RT PCR)鉴定。结果 PCR法从HBV基因组扩增出 51 8bp片段 ,序列分析证实其中含HBx基因全编码序列 ;用逆转录病毒将HBx基因转导QGY770 1细胞系 ,G41 8筛选 4~ 6周后出现阳性克隆株QGY/HBx ,PCR法从其基因组中鉴定出全长HBx基因整合 ,RT PCR证实细胞有HBxmRNA的稳定表达。
- 闵军陈积圣刘彦文罗树红余新炳
- 关键词:肝细胞癌乙型肝炎病毒X基因
- 肝癌细胞端粒酶激活的可能机制:乙型肝炎病毒x基因-端粒酶反转录酶途径被引量:2
- 2001年
- 目的 研究乙型肝炎病毒x基因 (HBx)对肝癌细胞端粒酶活性及其催化亚单位端粒酶反转录酶 (TERT)表达的影响 ,探讨肝癌细胞端粒酶激活的分子机制。方法 分别应用端粒序列重复扩增法 (TRAP)和定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测QGY770 1肝癌细胞株 (n=5 )和转HBx基因肝癌细胞株QGY/HBx(n =5 )的端粒酶活性及TERTmRNA表达。结果 HBx阳性的QGY/HBx肝癌细胞TERT基因表达水平 1.5 4± 0 .14较HBx阴性的QGY770 1肝癌细胞0 .76± 0 .0 8明显增高 (P <0 .0 1) ;与之对应 ,QGY/HBx细胞的端粒酶活性也显著高于QGY770 1细胞 [( 4.2 8± 2 .81)× 10 5比 ( 2 .43± 1.46)× 10 5,P <0 .0 5 ]。结论 HBx基因可增强肝癌细胞端粒酶活性 ,上调TERT基因表达 ;HBx TERT途径可能是肝癌细胞端粒酶端粒激活的一个重要机制。
- 闵军陈亚进王金林徐国权刘小平陈积圣
- 关键词:端粒酶HBX基因TERT
- 原发性肝癌尿激酶和尿激酶受体表达的研究被引量:6
- 2000年
- 目的 研究肝癌尿激酶和尿激酶受体的表达 ,探讨肝癌侵袭和转移分子机制。方法 应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和放射配基结合试验分析 12例肝癌及癌旁组织中尿激酶和尿激酶受体的表达。结果 肝癌组织中尿激酶水平为 (777± 5 86 ) pmol/g蛋白 ,细胞表面尿激酶受体数量为(6 49± 2 2 3) pmol/ g蛋白 ,均显著高于癌旁组织 [(84± 5 7)pmol/ g蛋白和 (72± 30 ) pmol/g蛋白 ,P <0 .0 1];肝癌细胞尿激酶与尿激酶受体的高亲和力 (0 .33± 0 .18)比癌旁组织 (6 .6 3± 2 .17)更高 (P <0 .0 1)。结论 肝癌组织中尿激酶与尿激酶受体过量表达 ,这可能在肝癌的侵袭和转移过程中起重要作用。
- 闵军陈孝平陈积圣吴在德裘法祖
- 关键词:肝细胞癌尿激酶尿激酶受体肿瘤转移
- 多聚四氟乙烯膜高密度培养肝细胞的可行性及其对培养肝细胞代谢功能影响的研究
- 2002年
- 巴明臣周晓东陈积圣闵军张杰
- 关键词:肝细胞人工肝
- 乙型肝炎病毒x基因上调肝癌细胞胰岛素样生长因子-Ⅱ胚胎启动子活性的研究被引量:5
- 2001年
- 目的 研究乙型肝炎病毒x基因 (HBx)对肝癌细胞胰岛素样生长因子 Ⅱ (IGF Ⅱ )启动子活性的影响 ,探讨HBx基因影响肝癌恶性表型的分子机制。方法 应用定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测QGY770 1肝癌细胞株和转HBx基因肝癌细胞株QGY/HBx的IGF Ⅱ成年启动子P1与胚胎启动子P3、P4的活性。结果 与QGY770 1细胞相比 ,QGY/HBx细胞IGF Ⅱ基因P1启动子活性无明显改变 (分别为 3 .12± 1.18与 3 .74± 1.87,P >0 .0 5 ) ,而P3与P4活性显著升高 (2 .2 7± 0 .68、3 .97± 1.66与 1.2 0± 0 .3 9、1.45± 0 .43比较 ,P <0 .0 5 )。结论 HBx基因可上调肝癌细胞IGF Ⅱ基因胚胎启动子P3、P4活性 。
- 闵军陈亚进张磊徐国权王金林陈积圣
- 关键词:HBX基因
- bcl-2硫代反义寡核苷酸提高胃癌细胞凋亡的敏感性被引量:11
- 2000年
- 目的 观察硫代反义寡核苷酸抑制bcl 2表达前后胃癌细胞对Fas介导凋亡的敏感性。方法 将bcl 2硫代反义寡核苷酸 (bcl 2SASON)转染胃癌细胞系MKN45 ,Western印迹法检测bcl 2蛋白表达 ;再应用激活型Fas抗体处理癌细胞 ,并用TUNEL染色 ,流式细胞仪检测凋亡 ,分析bcl 2表达与Fas诱导凋亡的关系。结果 bcl 2SASON转染后MKN45细胞bcl 2表达明显受到抑制 ,而且在经激活型Fas抗体处理后细胞凋亡指数为 (5 5 6± 4 7) % ,而未用bcl 2SASON处理的对照组则为 (8 4±2 1) % ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 bcl 2表达的胃癌细胞能耐受Fas系统介导的细胞凋亡 ,用反义寡核苷酸下调bcl 2表达后 。
- 曹健乔颖闵军
- 关键词:胃肿瘤BCL-2基因反义寡核苷酸细胞凋亡