陈国俊
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 稳定表达人BACE1启动子及荧光素酶报告基因HEK293细胞株的建立
- 2017年
- 目的对人β位点裂解酶-1(BACE1)基因核心启动子进行克隆,构建携带BACE1基因启动子的荧光素酶报告载体,筛选稳定表达细胞株并分析其转录活性。方法提取人胚肾HEK293细胞基因组DNA,以其为模板,PCR扩增BACE1核心启动子(-691^+67)并克隆至荧光素酶报告载体pGL4.21中,构建BACE1基因启动子荧光素酶报告载体pGL4.21-BACE1,将其转染HEK293细胞(无启动子的pGL4.21载体作阴性对照),利用嘌呤霉素筛选稳定表达株后检测其转录活性。结果成功扩增到758bp的BACE1核心启动子,pGL4.21-BACE1载体经双酶切鉴定正确;HEK293细胞被该载体转染后经嘌呤霉素筛选得到6株稳定表达BACE1启动子的细胞株,其转录活性分别是对照组(HEK293/pGL4.21)的(134.7±22.3)、(634.0±13.9)、(437.6±6.1)、(805.5±5.5)、(492.8±59.1)、(1 021.1±46.6)倍(P=0.001)。结论成功构建了人BACE1基因启动子荧光素酶报告载体。
- 邓常青朱炳林龙艳罗伟陈国俊
- 关键词：核心启动子高通量药物筛选
- 脑源性神经营养因子基因多态性与重庆地区血管性认知功能障碍的相关性研究被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨汉族人群中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与重庆地区血管性认知功能障碍(vascular cognitive impairment,VCI)的关系。方法:选取60例VCI患者,99例健康老年人(对照组)采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)结合限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)技术对BDNF基因G11757C、G196A、C270T进行多态性分析,采用SHEsis在线软件进行连锁不平衡及单体型分析。结果:VCI组G11757C位点基因型GG(30.4%)、GC(53.6%)、CC(16.1%),等位基因G(57.1%)、C(42.9%);对照组G11757C位点基因型GG(30.9%)、GC(47.4%)、CC(21.6%),等位基因G(54.6%)、C(45.4%)(χ2=0.837,P=0.658;χ2=0.180,P=0.671)。VCI组G196A位点基因型AA(23.3%)、AG(51.7%)、GG(25.0%),等位基因A(49.2%)、G(50.8%);对照组G196A位点基因型AA(22.2%)、AG(46.5%)、GG(31.3%),等位基因A(45.5%)、G(54.5%)(χ2=0.744,P=0.689;χ2=0.413,P=0.520)。VCI组C270T位点基因型CC(8.30%)、CT(56.7%)、TT(35.0%),等位基因C(36.7%)、T(63.3%);对照组C270T位点基因型CC(24.2%)、CT(50.5%)、TT(25.3%),等位基因C(49.5%)、T(50.5%),2组基因型频率及等位基因频率差异有统计学意义(χ2=6.68,P=0.035;χ2=4.98,P=0.026)。VCI组GGT单体型频率(14.3%)与对照组GGT单体型频率(6.3%)差异有统计学意义(Fisher’s P=0.025)。结论:BDNF基因多态性可能与重庆地区部分汉族人群VCI发病有关。
- 何祺柳青丁艳辉陈国俊
- 关键词：血管性认知功能障碍脑源性神经营养因子单核苷酸多态性
- 雌激素及其受体与阿尔茨海默病研究进展被引量：2
- 2014年
- 目前,60岁以上的残疾中痴呆造成的比例达到11.2%,超过了中风,心血管疾病及癌症。2010年全世界痴呆人数为3 650万,据估计到2050年将会增加到约1.2亿。阿尔茨海默病（alzheimer′s disease,AD）是一种与年龄相关的神经系统退行性疾病,约占痴呆的70%,是最常见的老年痴呆疾病。AD主要表现为进行性认知功能障碍和记忆力减退。
- 熊明建陈国俊
- 关键词：雌激素受体阿尔茨海默病
- 生命早期暴露于中国饥荒年(1959年至1961年)人群认知状态的研究被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨生命早期暴露于中国三年自然灾害(1959至1961年)的人群认知功能。方法:从2013年5月至2014年5月以本院健康体检人群为研究对象,共计718例。按出生日期分为3组:出生于1956年10月1至1958年9月30日定义为婴幼儿期暴露于饥荒年组(G1组),共236例;出生于1959年10月1日至1961年9月30日为胎儿期暴露于饥荒年组(G2组),共240例。出生于1962年10月1日至1964年9月30日为未暴露于饥荒年组(G3组),共242例。对3组人群进行听觉词语学习测试华山版(auditory verbal learning test-huashan version,AVLT-H)、简易智能量表(mini-mental state examination,MMSE)、蒙特利尔量表(Montreal cognitive assessment scale,Mo CA)、日常生活行为量表(activity of daily living scale,ADL)测试以及一般情况调查,并对结果进行比较分析。结果:3组在AVLT-H量表的短延迟回忆、长延迟回忆、线索回忆、再认方面以及MMSE、Mo CA量表得分有统计学差异(P=0.000),且G1组、G2组得分低于G3组。G1组轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)患病率为5.08%、G2组MCI患病率为5.00%,高于G3组MCI患病率3.72%,但无统计学差异(G1 vs.G3,χ2=0.527,P=0.468;G2 vs.G3,χ2=0.471,P=0.492)。结论:生命早期不同时期暴露于营养不良环境有可能影响成年后的认知功能。对于这部分人群采取必要措施防止MCI的发生以及MCI转化为阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)有重要意义。
- 王瑶王永红陈霞陈国俊王小林
- 关键词：轻度认知功能障碍阿尔茨海默病
- 膜片钳技术在成年大鼠海马脑片应用的初步研究被引量：11
- 2012年
- 目的:制备成年大鼠海马脑片,使其适应于膜片钳全细胞记录,并观察海马锥体神经元的电生理特性。方法:选200 g左右的成年SD大鼠,雌雄不拘,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,四肢固定,剪开胸腔,夹闭下腔静脉,以0℃切片液进行心脏灌注,断头,取下全脑,置入0℃切片液中冰镇3 min,再修块,切片,厚度约350μm,移入37℃预热的人工脑脊液中孵育1 h后,转入23℃水浴中孵育30 min备用。倒置相差显微镜和红外微分干涉相差显微镜观察脑片的神经元形态;全细胞膜片钳记录脑片神经元的电生理学特性。结果:海马CA1区神经元光泽度好,立体感强且突起明显;在进行膜片钳全细胞记录时,封接顺利,并且可以记录到电流和动作电位的变化图形。结论:本方法制备的成年大鼠脑片,可以耐受离体后缺血缺氧造成的损伤,保持电生理活性而适应膜片钳全细胞记录模式。
- 徐祖才陈恒胜刘靓周艳唐波陈国俊王学峰
- 关键词：膜片钳
