陈国华
- 作品数：130 被引量：282H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一组山羊痘病毒重组蛋白抗原制备方法及其应用
- 本发明公开了一组山羊痘亚单位疫苗重组蛋白抗原制备方法及其应用。本发明提供了一种具有1)或2)功能的产品，1)预防、诊断和/或治疗动物山羊痘；2)抑制或中和山羊痘病毒；该产品为如下任一种：蛋白ORF056、蛋白ORF112...
- 景志忠陈国华贾怀杰何小兵房永祥牛贤云
- 一种具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸序列及其应用
- 本发明公开了一种具有免疫增强活性的CpG寡聚核苷酸序列及其应用。本发明提供了寡聚脱氧核苷酸，其核苷酸序列为序列1，且该寡聚脱氧核苷酸中所有核苷酸均为硫代修饰，本发明提供的序列1所示的寡聚脱氧核苷酸，其具有强烈的免疫增强作...
- 景志忠房永祥赵波贾怀杰秦娟陈国华何小兵
- 猪IFN-α_1基因的原核表达及其蛋白质结构的预测被引量：6
- 2008年
- 利用RT-PCR技术,从被诱导的猪外周血单核细胞中克隆出了猪α1干扰素(IFN-α1)基因。序列分析表明,克隆的猪IFN-α1基因序列与GenBank上登录的猪IFN-α1基因的同源性为97.8%。用克隆的猪IFN-α1基因构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-IFN-α1。探讨了猪IFN-α1基因表达的最佳条件,并在大肠杆菌中对此基因进行了表达。结果表明,IPTG的最佳诱导浓度为0.5 mmol/L,最适诱导温度为42℃,诱导9h表达量最大,表达产物约占菌体总蛋白的30%。SDS-PAGE分析表明,表达产物的分子质量为45 ku,且目的蛋白主要以包涵体的形式存在。经预测,猪IFN-α蛋白为一结构松散的球状蛋白。
- 陈国华景志忠房永祥蒙学莲窦永喜罗启慧
- 关键词：克隆原核表达
- 猪用CpG DNA免疫佐剂的中试与示范
- 景志忠殷宏邵英德贺奋义高世杰房永祥陈国华曾爽贾怀杰何小兵李克斌韩庆彦段志勤才学鹏
- 农业科技成果转化项目《猪用CpG DNA免疫佐剂的中试与示范》（项目编号2013GB23260590）来源于国家成果转化项目，执行期间共获得各类经费支持190万元，该项目实施期间完成了项目实施的各种条件准备、项目经费配套...
- 关键词：
- 关键词：免疫佐剂生产工艺
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0708株的分离鉴定及其Nsp2基因的遗传变异分析被引量：3
- 2010年
- 采集江西省某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征病料,RT-PCR检测可扩增出PRRSV ORF7特异性片段,序列分析发现其与美洲型毒株序列一致性达93.9%以上,与欧洲型毒株仅为69.8%。将采集的脑和肺脏处理后接种Marc-145细胞盲传,在盲传的细胞中可扩增到PRRSV ORF7特异性片段,传至第6代时出现明显的细胞病变;将该毒株NSP2非结构蛋白基因测序分析,发现其编码的氨基酸与国内近年来分离的高致病性PRRSV毒株有较高的同源性,与美洲型代表株VR-2332相比缺失第482位和533-561位共30个氨基酸;纯化病毒并进行电镜观察,可见典型的PRRSV病毒粒子。第8代的细胞毒回归30日龄仔猪,可观察到猪繁殖与呼吸综合征典型症状和病理变化。这表明已成功地分离到1株美洲型PRRSV变异株,命名为JX0708株。
- 贾怀杰陈国华房永祥王晓霞李小庆莫斯科瞿惠玲景志忠
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因遗传变异分析
- 猪白细胞介素-4重组蛋白的纯化及其生物学特性分析被引量：4
- 2007年
- 用已构建好的重组表达载体pGEX-4T-IL-4转染E.coli,在最适条件下诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出38 ku的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的25%,表达产物主要以包涵体的形式存在;对表达产物经变性、复性及初步纯化后再结合饱和硫酸铵沉淀和Sephadex-G100凝胶层析柱进一步纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上。在体外利用MTT法检测其生物学特性,结果表明其具有较好的生物学活性,本试验为获得猪IL-4重组蛋白奠定了基础。
- 陈国华景志忠窦永喜蒙学莲张巧颖宋世斌
- 关键词：纯化活性分析
- 猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒增强亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒抗原免疫水平的研究被引量：2
- 2010年
- 分析CpG基序与猪IFN-γ基因组合的重组表达质粒对口蹄疫灭活抗原的免疫佐剂效应。以亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒为抗原,与含有猪IFN-γ基因和CpG基序的重组质粒配伍,采用肌肉注射法免疫小鼠,加强免疫后检测口蹄疫特异性抗体和中和性抗体水平、T淋巴细胞增殖反应、体内细胞毒性T细胞杀伤反应以及细胞因子IL-4、IL-6和IFN-γ的分泌水平。发现猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒相对单一的因子能诱导更强的体液免疫和细胞免疫反应水平,尤其在中和性抗体和抗原特异性CTL反应方面更为明显。猪IFN-γ和CpG基序在诱导小鼠抵抗亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒免疫方面具有良好的佐剂效应,其重组质粒可望成为一种有前途的新型免疫佐剂。
- 赵娜陈国华房永祥李玩生贾怀杰景志忠
- 关键词：Γ干扰素CPG基序免疫佐剂
- 一种猪疫苗使用的pIFN－γ基因佐剂及制备方法
- 本发明公开一种猪疫苗使用的佐剂和其制备方法，以及用本发明的佐剂构成的猪用疫苗。本发明的猪疫苗使用的基因佐剂是指包含有猪γ-干扰素基因(pIFN-γ)的佐剂，或者本发明的佐剂为动物细胞表达质粒pcDNA3.1和猪γ-干扰素...
- 景志忠才学鹏窦永喜蒙学莲王佩雅陈国华罗启慧袁改玲侯俊玲骆学农
- 文献传递
- 一种猪源第二信使分子2′3′-cGAMP的制备及活性鉴定方法
- 本发明公开了一种猪源第二信使分子2′3′‑cGAMP的制备及活性鉴定方法。本发明制备了可溶性表达的重组猪源2′3′‑cGAMP合成酶pcGAS，然后提供了一种简单快速、成本低廉、条件温和、产率高以及可大规模生产的2′3′...
- 景志忠何小兵龙朝琳陈国华贾怀杰房永祥
- 文献传递
- 猪IL-18在毕赤酵母中的表达及活性分析被引量：4
- 2007年
- 采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中扩增出IL-18基因并构建真核融合表达载体pPIC9K-IL-18,电激法转化入毕赤酵母GS115,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,并将表达蛋白用凝胶层析柱纯化后,用MTT法检测其生物学活性。实验结果表明重组的GS115酵母菌株可表达分泌pIL-18,其表达在72h时达高峰,分泌量可达160mg/L,纯化的重组pIL-18蛋白具有显著的促进淋巴细胞增殖的活性,说明本试验已在毕赤酵母中在国内首次成功表达了具有生物学活性的pIL-18。
- 宋世斌景志忠陈国华王笑笑宗瑞谦
- 关键词：毕赤酵母纯化生物活性
