陈雪华
- 作品数：186 被引量：751H指数：12
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究
- 2007年
- 目的 初步观察用小分子干扰RNA（siRNA）沉默树突状细胞（DCs）恒定链（Ii）后，DCs疫苗的体外抗肿瘤效果。方法 从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞，细胞经100ng／ml GM—CSF和100ng／ml IL-4诱导培养6d后，转染针对DCs Ii链特异的Ii—siRNA，转染后加用50ng／ml TNF—α继续诱导细胞成熟48h，然后分别用Western blot检测沉默效果及CCK-8试剂盒检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力；此外，DCs共转染Ii—siRNA和小鼠胃癌前体细胞MFC的总RNA后，与同种异体淋巴细胞共培养，通过ELISA检测培养上清IFN-γ和IL-4的水平，并收集致敏淋巴细胞进行体外杀伤实验。结果 Ii—siRNA明显抑制DCs Ii的表达。沉默Ii链能够增强DCs的淋巴细胞增殖能力，并促使淋巴细胞向Th1的方向漂移[IFN-γ：（5107±351）pg／ml，IL-4：（65±13）pg／ml，P〈0．05]。淋巴细胞经共转染Ii—siRNA和MFC RNA的DCs激活后，明显而特异地杀伤靶肿瘤细胞（杀伤百分率：66．94％±2．75％，P〈0．05）。结论 通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。
- 柯山陈雪华蔡劬李建芳俞焙秦顾琴龙朱正纲刘炳亚
- 关键词：RNA干扰免疫细胞树突状细胞
- 肿瘤转移相关基因Tropomyosin2的克隆及功能初步研究
- 目的:构建携带肿瘤转移相关基因Tropomyosin2 （TM2）的绿色荧光蛋白（GFP）真核表达载体并初步探讨其在肿瘤细胞稳定表达后的生物学功能。方法:采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）从人胃癌细胞株AGS中扩增全...
- 张轶刘炳亚李强刘文韬陈雪华朱正纲
- 关键词：肿瘤肝癌
- 文献传递
- SEREX方法鉴定胃癌肿瘤相关抗原基因被引量：8
- 2005年
- 目的采用重组CDNA表达文库血清学分析法(SEREX法)寻找胃癌相关肿瘤抗原的编码基因。方法抽提胃癌细胞株SGC7901和1例胃癌组织标本PolyA+RNA,分别构建2个胃癌cDNA表达文库,用含有抗体的胃癌患者血清对2个文库进行筛选,并对筛选所得到的阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果经测定2个原始文库滴度分别为1.6×106pfu和2.5×106pfu,重组率为95%和98%。2个文库经3轮筛选共获得14个胃癌肿瘤相关抗原编码基因,其中一个为未知基因。13个已知基因编码产物包括代谢酶、RNA转录和翻译调控蛋白、蛋白代谢相关分子、自身免疫疾病相关抗原及未知功能蛋白分子。结论 胃癌相关肿瘤抗原编码基因的筛选和鉴定,为胃癌的临床诊断和特异性免疫治疗提供了靶点,有助于对胃癌发生机制的深入理解。
- 王运伟朱正纲顾琴龙李建芳陈雪华刘炳亚林言箴
- 关键词：胃癌相关抗原SEREX癌肿瘤CDNA表达文库重组率
- 黄芪针和药饼灸对荷瘤小鼠免疫功能的影响被引量：5
- 2005年
- 目的 观察针灸对免疫功能的影响。方法 将C2 6小鼠结肠癌细胞株移植接种建立实验模型的 35只荷瘤小鼠 ,随机分为 5组 ,生理盐水对照组、5 FU组、黄芪针组、药饼灸组、药饼灸 +黄芪针组。由接种瘤细胞第 2日开始进行各组处理。治疗结束后 ,获取小鼠脾脏单个细胞 ,采用流式细胞 (FACS)测定脾淋巴细胞中T细胞亚群、自然杀伤细胞 (NK)及CTL杀伤功能。结果 药饼灸组、黄芪针组、药饼灸 +黄芪针组CD3、CD4、CD4 CD8比率、NK细胞、CTL杀伤活性显著高于 5 FU组 ,P <0 .0 1。结论 药饼灸、黄芪注射液对单用 5
- 袁民陈雪华纪玉宝
- 关键词：水针药饼灸荷瘤小鼠
- 保罗样激酶1、Ki-67在胃癌组织中的表达被引量：2
- 2005年
- 兰斌刘炳亚陈雪华瞿颖张晓青蔡劬朱正纲
- 关键词：胃癌组织KI-67激酶切除标本医院外科石蜡包埋
- IRX1真核表达载体的构建及在胃癌细胞SGC-7901中的定位被引量：6
- 2009年
- 目的构建pEGFP—IRX1真核表达载体，体外转导至SGC-7901胃癌细胞株，观察IRX1基因转染后蛋白表达与细胞内定位。方法PCR扩增IRX1全长1443bp编码序列，将PCR扩增产物连接入pGEM-Teasy载体，经测序确认序列无误后，亚克隆入pEGFP—N1载体，构建pEGFP-IRX1真核表达载体。采用Lipofectamine2000转染SGC-7901胃癌细胞株，在荧光显微镜下观察外源性IRX1基因导入后在胃癌细胞内的表达与亚细胞定位。结果成功构建有绿色荧光蛋白融合的IRX1真核表达载体，外源性IRX1基因在胃癌SGC-7901细胞中表达成功，在荧光显微镜下IRX1表达蛋白定位于细胞核内。结论pEGFP—IRX1真核表达载体构建成功，并可在细胞内表达，这将为IRX1在胃癌内的功能研究奠定基础。
- 刘卫仁于颖彦倪培华吴建林计骏张佳年陈雪华刘炳亚朱正纲
- 关键词：胃癌真核表达载体
- UbcH10在乳腺癌中的表达及意义被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨UbcH10在乳腺癌中的表达情况及意义。方法:分别运用Western Blot法和免疫组化染色在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织芯片中检测UbcH10的表达;统计学分析UbcH10与乳腺癌组织学类型、分化程度、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progeste ronereceptor,PR)等之间的相关性。结果:UbcH10在MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s等乳腺癌细胞株中均呈阳性表达。在正常乳腺组织中,UbcH10的表达阳性率为0.00%(0/8);而在乳腺癌组织中,总体阳性率为61.25%(49/80,P<0.05),其中浸润性导管癌的阳性表达率为60.42%(29/48,P<0.05)。人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-type2,HER2)阴性和阳性组织中UbcH10的表达阳性率分别为46.67%和91.67%(P<0.05),HER2的表达水平与UbcH10表达呈正相关。UbcH10表达与组织级别、年龄、淋巴结转移、ER、PR、BCL2(B-cell CLL/lymphoma2)、P53等无明显相关性。结论:UbcH10表达在正常乳腺组织和乳腺癌组织中存在明显差别,且其表达与HER2表达呈现正相关关系,可作为判断乳腺癌的潜在标记物,并有望成为乳腺癌靶向治疗中新的靶点。
- 王银平殷志强陈雪华季福刘炳亚孙婧璟
- 关键词：乳腺癌UBCH10组织芯片
- 肺癌患者外周血调节性T细胞检测的临床意义被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨肺癌患者外周血调节性T细胞(CD4+CD25+FoxP3+,Treg细胞)的变化及其与病理参数的相关性。方法:应用流式细胞仪检测56例肺癌患者和18名健康对照者(健康对照组)外周血单个核细胞(PBMC)中Treg细胞占CD4+T细胞的百分率,分析其与年龄、性别、肺癌分期、病理类型以及是否合并胸腔积液等的关系。结果:①肺癌患者外周血Treg细胞百分率高于健康对照组[(6.15±3.15)%比(3.65±2.48)%,P<0.01]。早期组(TNM分期:Ⅰa期～Ⅲa期)[(5.04±2.40)%]、晚期组(TNM分期:Ⅲb期～Ⅳ期)[(6.83±3.09)%]分别与健康对照组[(3.65±2.48)%]比较,Treg细胞百分率均明显升高(P<0.01)。②晚期肺癌患者中,非老年组(年龄≤60岁,12例)患者外周血Treg细胞较老年组(年龄>60岁,26例)明显升高[(8.79±3.49)%比(4.86±2.69)%],差异有统计学意义(P<0.01)。③根据病理类型分为非小细胞肺癌52例(18例鳞癌、34例腺癌),小细胞肺癌4例,非小细胞肺癌患者外周血中Treg细胞百分率较小细胞肺癌有增高趋势[(6.44±3.16)%比(3.44±1.97)%],但尚无统计学意义(P>0.05)。④肺癌患者外周血中Treg细胞百分率与性别、有无胸水无相关性(P>0.05)。⑤回归分析显示晚期肺癌患者外周血中Treg百分率与年龄呈负相关(P<0.05)。结论:肺癌患者处于免疫抑制状态,其外周血中Treg细胞百分率与肺癌分期、年龄有关。
- 邹静刘斌陈雪华李宁丽王利查琼芳
- 关键词：肺肿瘤外周血调节性T细胞
- 核糖核苷酸还原酶M2在结肠直肠癌组织的表达及对癌细胞增殖和迁徙的影响
- 2012年
- 目的:研究核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在结肠直肠癌组织的表达及对癌细胞增殖和迁徙的作用。方法:应用组织芯片免疫组化技术测组织中RRM2的表达。用siRNA转染RRM2高表达的细胞株HCT116以验证干扰效果,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验评估转染后癌细胞迁移能力。结果:结肠直肠癌组织中RRM2的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05),且与浸润深度、分化程度、TNM分期均有相关性;在结直肠细胞株中,HCT116细胞RRM2在mRNA和蛋白水平表达量最高,用干扰效率最高的siRNA下调RRM2表达可以明显抑制HCT116细胞的增殖能力。在Transwell迁徙实验中,RRM2干扰组穿膜细胞数为(11±2)个,显著低于阴性对照组[(29±4)个]和空白对照组[(23±3)个](P<0.01)。结论:数据显示RRM2在结肠直肠癌组织中呈过表达,且在结肠直肠癌进展和预后发挥重要作用,其有望成为评估结肠直肠癌进展及预后的潜在指标。
- 冯浩王蒲雄志陆爱国韩丁培王菲楠陈雪华赵红超宗雅萍郑民华
- 关键词：结肠直肠肿瘤组织芯片细胞增殖细胞迁徙
- 多发性硬化患者T细胞克隆中CD3CD56双阳性细胞的分析
- 2000年
- 目的多发性硬化（ＭＳ）是一种器官特异的自身免疫病，病变侵犯中枢神经系统。ＭＳ不仅有Ｔ，Ｂ细胞介导，而 且与脑淋巴瘤的发生有密切关系。方法本文用Ｔ细胞克隆技术，细胞表型分析技术和细胞毒活性分析经ＭＢＰ抗原肽治疗 的ＭＳ患者外周血的Ｔ，Ｂ淋巴细胞（另文发表）。结果经ＭＢＰ抗原肽诱导的Ｔ细胞克隆中有相当一部分Ｔ细胞系不仅高 表达 ＣＤ３ＣＤ５６双阳性标志（ＮＫＴ细胞）， ５０．７％±４．９％，对照为 ６．０％和 ３．０％，而其他神经系统疾病分别是 １１．０％和 ２０．０％，且 这种双阳性细胞群不同于ＮＫ细胞能特异杀伤神经胶质瘤（５９．７％±４．９％）而ＮＫ细胞仅为１７．３％±４．５％，具有统计学差异。 结论用ＭＢＰ抗原肽诱导的Ｔ细胞克隆可用作疫苗治疗ＭＳ患者，而这种高表达ＣＤ３ＣＤ５６双阳性标志（ＮＫＴ细胞）对神 经胶质瘤细胞较ＮＫ细胞潜在的更强的杀伤活性。至于其抗瘤机制正在研究之中。
- 陈雪华刘炳亚马安伦王树军李宁丽张冬青葛海良JP AntelYF Qin
- 关键词：多发性硬化T细胞克隆NKT细胞
