顾万钧
- 作品数：42 被引量：135H指数：8
- 供职机构：佛山科学技术学院农牧学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科委资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- HIV-2 env基因在大肠杆菌和重组痘苗病毒中的表达被引量：1
- 1998年
- 将编码人Ⅱ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－２）ｅｎｖｇｐ１２０（Ｅ１）和ｇｐ３６（Ｅ２）分别克隆到原核高效表达载体ｐＥＴ１７ｂ、ｐＢＶ２２０和真核表达载体ｐ１０、ｐ１６中，构建成８个重组质粒。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明，在原核表达系统成功地表达了ＨＩＶ－２ｅｎｖ融合蛋白，表达的蛋白分子量分别为３５０００、７００００和５００００，而原核表达质粒ｐＥＴＥ１在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶的３５０００处可见明显的额外蛋白带。经薄层扫描测定，原核系统表达的Ｅｎｖ蛋白（ｇｐ１２０）相对含量为５．８％。在真核细胞中表达的Ｅｎｖ蛋白经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测分析，分子量分别为６００００、５７０００和４２０００。上述表达的Ｅｎｖ蛋白均能与ＨＩＶ－２阳性血清发生特异性反应。
- 王秀清金宁一田梅郭志儒郭志儒顾万钧方厚华殷震
- 关键词：HIV-2大肠杆菌痘苗病毒
- 鸡痘病毒282E_4株基因组BamHⅠ片段的克隆及酶切图谱分析被引量：5
- 1995年
- 本研究用ｐＵＣ１８质粒作载体，采用鸟枪法克隆ＦＰＶ基因组ＢａｍＨⅠ部分片段，用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ－ｄＵＴＰ标记的ＦＰＶ２８２Ｅ４ＢａｍＨⅠ片段探针打点杂交，证实２２个克隆插入了ＦＰＶ２８２Ｅ４ＤＮＡ的ＢａｍＨⅠ片段，２２个阳性克隆提取的质粒经琼脂糖凝胶电泳，选取具有代表性的大小不同的６个质粒ｐＵＡ、ｐＵＢ、ｐＵＣ、ｐＵＤ、ｐＵＥ、ｐＵＦ。６个质粒插入的片段Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ分别为７．３ｋｂ、４．９ｋｂ、４．２ｋｂ、３．６ｋｂ、３．２ｋｂ、３．０ｋｂ。分别以ＣｌａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｏｃＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ、ＳｍａⅠ、ＸｈｏⅠ进行单酶切，又经适当组合的双酶切。实验结果表明．在各片段存在的单酶切位点为Ａ：ＥＣＯＲⅠ、ＳａｃⅠ、ＸｈｏⅠ位点；Ｂ：ＥｃｏＲⅠ、ＸｈｏⅠ、ＨｉｎｄⅢ位点；Ｃ：ＣｌａⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ位点；Ｄ：ＳａｌⅠ、ＰｓｔⅠ位点；Ｅ：ＥｃｏＲＶ位点；Ｆ：ＥｃｏＲⅤ位点。以上结果为随机筛选ＦＰＶ基因组非必需区奠定了基础。
- 顾万钧王淑敏金宁一周复春殷震
- 关键词：克隆酶切图谱鸡病鸡痘病毒基因组
- 珠江三角洲地区鸭肝炎病原分离及其致病性和理化特性测定被引量：9
- 2001年
- 对珠江三角洲地区鸭肝炎发病雏鸭群进行病原分离、致病性试验及理化特性测定。结果共分离到 9株野毒 ,初步研究结果表明该 9株野毒具备Ⅰ型鸭肝炎病毒 (DHV Ⅰ )的基本特征 ,但其毒力具有不均一性。对 7日龄雏鸭的致病力 ,其中 3株LD50 分别为 10 -4 .36/0 .3mL、10 -4 .17/0 .3mL和 10 -4 .0 8/0 .3mL ;另外 3株LD50 分别为 10 -2 .4 8/0 .3mL、10 -2 .39/0 .3mL和 10 -2 .19/0 .3mL ;其余 3株对 7日龄雏鸭无致病性 ,但 2株对 1日龄的雏鸭却有一定的致病性 ,1株无致病性。该研究结果为分析本地区鸭肝炎疫情变化提供了依据。
- 陈建红张济培司兴奎顾万钧
- 关键词：变异株理化特性病毒性肝炎
- 珠江三角洲及其附近地区鸭肝炎流行动态调查被引量：18
- 2000年
- 调查了珠江三角洲地区近 2 0个县、市鸭肝炎 (DH)的流行情况、临床表现、病理变化和免疫防制现状。从本调查的结果可见 ,该地区DH多发区的雏鸭以 7～ 2 1日龄发病最多 ,最早的 2～ 3日龄 ,最迟的在樱桃谷鸭及其改良品种可见于3 5日龄 ,在番鸭可见于 60～ 70日龄 ,个别番鸭在 2 0 0日龄还有零星发病。 3～ 14日龄发病的雏鸭死亡率在 60 %～ 95 % ,15～ 3 5日龄发病的死亡率在 15 %～ 40 % ,3 5～ 70日龄发病的死亡率在 5 %～ 15 % ,更大日龄发病的死亡率在 5 %以下。根据防治效果 ,许多用标准DHV Ⅰ型弱毒疫苗免疫的鸭群 ,或在发病初期注射标准DHV Ⅰ型超免疫卵黄抗体的鸭群 ,其疫情还不能控制 ,往往需在发病初期用本地病鸭分离的DHV作疫苗 ,进而制备超免疫卵黄抗体及时治疗 ,才能将鸭群的死亡率控制在 2 %～ 8%。提示该地区原来流行的DHV Ⅰ型野毒株有可能发生抗原毒力变异或已传入DHV Ⅱ型或DHV Ⅲ型。
- 陈建红张济培司兴奎顾万钧
- 关键词：鸭肝炎珠江三角洲
- 不同启动子对重组痘苗病毒表达狂犬病病毒糖蛋白基因的影响被引量：7
- 1997年
- 以血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将狂犬病病毒糖蛋白基因ｃＤＮＡ置于不同类型的痘苗病毒复合启动子下游，构建了４种表达质粒。重组表达质粒转染已感染ＷＲ株痘苗病毒的ＢＨＫ２１细胞，并通过鸡红细胞吸附试验，筛选、纯化出与表达质粒对应的４组ＨＡ－重组痘苗病毒：ｖＳＦＪ１－１０ＲＶｇｐ，ｖＳＦＪ２－１６ＲＶｇｐ，ｖＲＪ１－１０ＲＶｇｐ，ｖＲＪ２－１０ＲＶｇｐ。经间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）鉴定，从４组重组病毒中每组各鉴定出１株阳性重组病毒。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测显示，重组病毒感染的ＢＨＫ２１细胞裂解物上清中有１种蛋白与抗ＲＶＧＰ的ＭｃＡｂ发生特异反应，分子量为６９０００。在重组病毒感染早期，ＲＶＧＰ的表达量以ｖＳＦＪ１－１０ＲＶｇｐ最高；而在感染晚期，则以ｖＳＦＪ２－１６ＲＶｇｐ最高。４株重组病毒免疫小鼠，均能够不同程度地诱导小鼠产生抗ＲＶＧＰ特异性抗体。
- 佟明华金宁一毛春生秦翠丽顾万钧王秀清郭志儒郭军庆杨同书殷震
- 关键词：病毒糖蛋白基因重组痘苗病毒启动子
- 生物防腐菌对肉鸡肠道废弃物的防腐研究
- 1993年
- 本文根据生物防腐菌(植物乳杆菌、乳酸片球菌、屎链球菌)在其生长繁殖过程中需要一定碳源作为能量来源的原理,设计了在底物(肉鸡肠道废弃物)中添加不同量的碳源及初始接种菌量,以探讨对pH值的影响,观察对腐败菌产生的抑制效果,从而确定进行生物防腐时最佳的碳源添加量,防腐菌初始接种菌量及防腐保存的pH值。
- 王淑敏顾万钧岳玉环何昭阳王洪福
- 关键词：植物乳杆菌乳酸片球菌防腐
- 珠江三角洲部分地区鸡传染性贫血的血清学调查被引量：7
- 2001年
- 对珠江三角洲部分地区进行了鸡传染性贫血血清学调查 ,共采取血清样品 2 0 1份进行ELISA检测 ,总阳性率为3 8.3 1%。
- 司兴奎陈建红卢林张济培顾万钧
- 关键词：传染性贫血血清学调查ELISA阳性率
- 一种高效通用的平端亚克隆方法被引量：5
- 1995年
- 一种高效通用的平端亚克隆方法毛春生，金宁一，顾万钧（解放军农牧大学研究所病毒室，长春１３００６２）关键词平端亚克隆亚克隆是分子生物学和基因工程研究中常用技术之一。在理论上，任何一对平末端ＤＮＡ片段都可经Ｔ４连接酶催化连接。这给不同ＤＮＡ分子之间的连接...
- 毛春生金宁一顾万钧
- 关键词：克隆基因工程
- 产酸生物防腐细菌的分离与生长条件研究被引量：8
- 1992年
- 本文应用不同的培养方法,分离、筛选出3种产酸细菌:植物乳杆菌、乳酸片球菌和屎链球菌。由于其各自生长繁殖所需的pH值和对氧的需求以及耐酸程度不同,通过协同作用,则可作为生物防腐产酸细菌的菌种。
- 顾万钧何昭阳王淑敏肖振铎王洪图
- 关键词：植物乳杆菌乳酸片球菌防腐剂
- 囊尾蚴病猪治愈前后胴体氨基酸分析
- 1992年
- 囊尾蚴病猪肌肉中寄生了数量不等的囊尾蚴虫体,经药物治疗后,治愈的胴体营养成分是否能够恢复正常,尚未见有报道。我们曾对经治疗达到鲜销猪的胴体进行了一些研究,对肉眼观察已经恢复正常的胴体,经病理组织学研究证明囊虫体所占据的空间位置已被肌细胞填充,经过一定的理化学分析证明胴体的蛋白质、脂肪等含量与健康猪体没有明显差异。但其氨基酸的含量是否受到影响,治愈前后与健康猪胴体氨基酸相比较有无差异,笔者就此问题对囊尾蚴病猪、治愈猪胴体和健康猪胴体的氨基酸含量进行了对比试验,现报告如下。(一)材料与方法1.试验动物:第1组(未治组):经改良酶标判定为强阳性的囊尾蚴病猪3头,宰后来集不同部位肌肉备用。第2组(治愈组):改良酶标诊断为强阳性的囊虫病猪3头。
- 韩宇陈义陈晓平胡耀辉顾万钧曹志楠
- 关键词：囊尾蚴病胴体氨基酸
