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黄鳝胃瘤线虫线粒体cox1基因的多态性研究被引量：1: 2016年; 为了解渝西地区黄鳝胃瘤线虫分离株线粒体细胞色素C氧化酶第I亚基（cox1）的遗传变异情况及与其他科线虫的种群遗传关系,本研究对该地区黄鳝胃瘤线虫cox1部分序列进行了克隆测序和进化分析.结果表明渝西地区6株胃瘤线虫分离株的cox1序列长度一致,均为441bp;各分离株之间的相似性为97.5%~100%.种系发育树表明,6个胃瘤线虫分离株均位于同一分枝.由于胃瘤线虫cox1序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记.本研究结果为胃瘤线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础.; 黄汉成王芝英林洁马光旭朱宏宏周荣琼; 关键词：线粒体DNA

犬弓首蛔虫卵黄原蛋白基因的克隆及表达分析: 2012年; 为克隆犬弓首蛔虫(T.canis)的卵黄原蛋白(YP)基因,本研究根据T.canis cDNA文库中的EST数据,采用RT-PCR方法扩增T.canis的YP基因(TcF-YP),并克隆至pGEM-T载体中进行测序。测序结果表明,TcF-YP基因片段大小为492 bp,编码163个氨基酸残基。同源分析显示,TcF-YP基因与猪蛔虫的卵黄原蛋白基因同源性最高,为78%。同时对该基因在T.canis雌虫、雄虫和雌虫各组织的表达谱进行研究,结果显示TcF-YP基因只在T.canis雌虫中高量表达,是雌虫特异的基因。对雌虫各组织的基因表达谱分析显示TcF-YP基因在子宫和肠中高量表达,在卵巢中有极微量的表达。本实验为TcF-YP基因的功能研究奠定了基础。; 周荣琼马光旭周琪周作勇王芝英罗洪林夏庆友; 关键词：卵黄原蛋白

寄生虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶研究进展被引量：2: 2014年; 丝／苏氨酸蛋白磷酸酶（Proteinserine／threonine phosphatases，PSTP）属于蛋白磷酸酶家族中重要的细胞内调节蛋白，能够催化磷酸化丝氨酸或磷酸化苏氨酸的去磷酸化反应，并参与许多关键的生物学过程，例如细胞周期进程、细胞凋亡和胞外分泌等。蛋白质的磷酸化和去磷酸化是调节多种细胞功能的基本过程。蛋白激酶从ATP将磷酸基团转移到蛋白质上（磷酸化），而蛋白磷酸酶催化磷酸基团从蛋白质的特定残基移除（去磷酸化）。; 谭燕财林洁马光旭敖冯虎胡志刚周荣琼; 关键词：寄生虫去磷酸化生物学过程蛋白质调节蛋白

犬弓首蛔虫免疫抑制卵巢信息蛋白基因的克隆及其表达分析: 本试验以犬弓首蛔虫(Toxocara canis)cDNA文库中的EST数据为基础,采用RT：PCR方法扩增出犬弓首蛔虫(T.canis)的免疫抑制卵巢信息蛋白(Immunosuppressive Ovarian Mes...; 魏志鹏周荣琼马光旭林洁谭燕财; 关键词：PCR

犬弓首蛔虫性别相关基因Tc-vit、Tc-iom、Tc-tpk、Tc-stp在不同生殖器官中的差异表达分析被引量：1: 2015年; 为对犬弓首蛔虫(T.canis)免疫抑制卵巢信息蛋白(Tc-iom)、卵黄原蛋白(Tc-vit)、酪氨酸蛋白激酶(Tctpk)和丝/苏氨酸蛋白磷酸酶(Tc-stp)四个性别相关基因进行差异表达分析。本研究采用SYBR Green I qRT-PCR方法检测Tc-vit、Tc-iom、Tc-tpk、Tc-stp在T.canis雌虫卵巢、输卵管、子宫和雄虫精巢、贮精囊、输精管的转录情况。结果显示,Tc-vit在雌虫卵巢、输卵管和子宫中均有转录,在雄虫精巢和贮精囊中也有转录,但在输精管中无转录;Tc-iom在雌虫卵巢、输卵管和子宫中高水平转录,在雄虫精巢和贮精囊中转录量较低,输精管中无转录;Tc-tpk在雄虫精巢和贮精囊中的转录明显高于其他生殖组织;Tc-stp在雄虫精巢和输精管中转录量较高,在雌虫卵巢、输卵管和子宫中转录量较低。本试验为T.canis性别相关基因的进一步研究奠定了基础。; 马光旭朱宏宏胡铃李蔚林林洁周荣琼; 关键词：差异表达分析

重庆荣昌犬钩虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析被引量：1: 2013年; 利用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬钩虫rDNA的ITS及5.8S序列,然后将PCR扩增产物回收纯化后连接到pMDTM19-T载体上进行克隆.重组质粒通过菌落PCR鉴定,将阳性重组质粒进行序列测定并且进行序列分析.结果显示,5株犬钩虫荣昌分离株ITS序列的总长为833 bp^834 bp.ITS-1序列总长无差异,但存在个别碱基的差异;5.8S序列总长与序列均无差异;ITS-2序列总长存在差异(221 bp^222 bp).通过与GeneBank上报道的其他钩虫的ITS序列进行相似性分析,发现犬钩虫荣昌分离株(RCF)与犬钩虫广州分离株相似性最高,为99.9%,与美国北海狮弯口属钩口线虫ITS序列的相似性最低,为86.1%.表明ITS可作为分子标记用于犬钩虫种属以及种间的鉴定.该研究结果旨在为今后犬钩虫的分类鉴定、种群遗传关系、分子流行病学调查以及对该病的防治等方面的更深入研究奠定基础.; 黄丽周荣琼林洁谭燕财马光旭敖冯虎; 关键词：PCR

黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析被引量：2: 2013年; 为了解渝西地区黄鳝胃瘤线虫的rDNA内转录间隔区（ITS）及5.8SrDNA 序列的遗传变异情况,本研究利用PCR扩增胃瘤线虫rDNA的片段,将目的片段克隆至pMDTM19-T Vector载体,对阳性克隆进行测序,序列用 BLAST和MEGA4.0进行相似性和种系发育分析.结果表明6株胃瘤线虫分离株扩增的序列总长存在差异（890-892bp）,其中ITS-1序列长度为350-351bp、5.8S序列长度为102-103bp及ITS-2序列长度为343bp.渝西地区胃瘤线虫ITS序列与不同宿主胃瘤线虫的相似性最高为98.3%,表明ITS可作为分子标记用于胃瘤线虫与其他线虫的种间鉴定.; 林洁谭燕财马光旭陈思宇祝涛周荣琼; 关键词：黄鳝

渝西地区奶牛隐孢子虫的分离和基因型鉴定被引量：3: 2013年; 为鉴定渝西地区奶牛隐孢子虫分离株的种类和基因型,本研究利用巢氏PCR(Nested PCR)扩增18S rRNA基因,PCR产物进行限制性片段长度多态性分析(Restriction fragment length polymorphism analysis,RFLP);将目的片段克隆至pGEM-T Easy载体,对阳性克隆进行测序,序列用BLAST和MEGA 4.0进行同源性和种系发育分析。结果表明阳性样品均成功扩增出约830bp的目的基因片段,PCR产物分别经SspⅠ和MboⅡ酶切后进行RFLP分析,显示渝西地区存在3种隐孢子虫,即C.andersoni、C.bovis、C.ryanae。其中C.andersoni为优势虫种。鉴定结果为进一步开展奶牛隐孢子虫的病原生物学研究及该地区隐孢子虫病的监测奠定了基础。; 林洁周荣琼谭燕财马光旭敖冯虎胡志刚; 关键词：隐孢子虫 RRNA PCR-RFLP

犬弓首蛔虫雄虫cDNA文库构建及EST分析被引量：1: 2012年; 为构建T.canis雄虫cDNA文库,采用Trizol法提取T.canis雄虫的总RNA,合成cDNA,连接到λTripEx2载体上,通过包装蛋白对连接产物的包装,接种到大肠杆菌XL-1-Blue中进行原始文库和扩增文库的滴度测定。经质量鉴定表明:初始文库的滴度为5.25×106 pfu.mL-1,扩增后文库的滴度为6.90×109 pfu.mL-1。文库的插入片段大小在500～2 000bp,平均片段大小为1 000bp,重组率为99.47%。所有指标均显示已成功构建了T.canis雄虫的cDNA文库。利用该文库获得了189条5′有效表达序列标签(EST)。对ESTs拼接后代表了101个Unigenes,含有27个Contigs和74个Singletons。其Unigenes在GenBank中的序列号为HO348195～HO348295。同源性分析检索到有56个Unigenes与已知基因同源,其中具有已知或推测功能的基因有40个,未知功能基因有16个,未比对上的基因45个。未比对上的基因与NR数据库中的蛋白序列没有任何意义的匹配,为研究中发现的新基因。这些结果为进一步开展犬弓首蛔虫功能基因及分子机制研究奠定了基础。; 马光旭周琪魏志鹏王德恒陈昱鸣周荣琼; 关键词：雄虫 CDNA文库

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