高宏丽
- 作品数：10 被引量：75H指数：4
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十五”科技攻关项目“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅副粘病毒F和HN基因的克隆及原核表达载体的构建被引量：5
- 2005年
- 根据发表的鹅副粘病毒SF0 2株全基因组序列 ,分别设计合成一对引物和二对引物 ,分别采用RT_PCR方法和RT_套式PCR扩增出与预期设计大小相符的F基因和HN基因特异性条带。将扩增出的DNA片段克隆到pMD18_T载体中 ,转化TGI感受态细胞 ,经AMP/IPTG/X_Gal平板筛选 ,酶切鉴定 ,获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定 ,结果表明 :鹅副粘病毒JS/ 1/ 97/Go株F基因全长 16 6 2bp ,编码 5 5 3个氨基酸残基 ;F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112 R_R_Q_K_R_F117,与NDV的强毒株特征相符。HN基因全长 1716bp ,编码 5 71个氨基酸残基。将F基因插入到原核表达质粒pGEX_6P_1的EcoRⅠ、XhoI多克隆位点之间 ,转化到TGI感受态细胞中 ,获得了表达F基因的阳性亚克隆重组质粒 ;将HN堪因插入原核表达质粒pProEXHTb的XBaⅠ、XhoⅠ多克隆位点之间 ,转化到TGI感受态细胞中 。
- 高宏丽王君伟于天飞管雪婷唐志芬
- 关键词：鹅副粘病毒RT-PCRF基因HN基因
- 禽流感病毒A/chicken/Mudanjiang/0823/2000(H9N2)株NP及M1基因的克隆及序列分析
- 2005年
- 参照已发表的A型禽流感核蛋白 (NP)、基质蛋白 (M 1)基因序列及其基因组特性 ,设计合成了一条通用反转录引物和两对特异性引物 ,采用RT_PCR法 ,成功克隆了禽流感病毒国内分离株A /chicken /Mudanjiang / 0 82 3/ 2 0 0 0(H9N2 )株的NP、M 1基因。序列测定结果为NP基因cDNA全长 14 97bp ,编码 4 98个氨基酸。M 1基因cDNA全长 75 9bp ,编码 2 5 2个氨基酸。将其序列与数株A型流感病毒 (H9N2 )NP及M 1基因序列进行比较 ,NP基因同源性为 90 5 1%～ 98 4 6 % ,氨基酸序列同源性为 95 38%～ 98 5 9%。M1基因同源性为 90 78%～ 97 36 % ,氨基酸序列同源性为95 6 3%～ 99 6 0 %。
- 管雪婷王君伟唐志芬邢建民高宏丽
- 关键词：核蛋白基质蛋白NP基因
- 鹅副粘病毒HN和F基因克隆、序列分析及原核表达载体的构建
- 鹅副粘病毒(GPMV)是副粘病毒科,副粘病毒亚科,腮腺炎病毒属,APMV-1中的成员,引起鹅副粘病毒病.该病自1997年由扬州大学王永坤教授报道以来,在国内很多地区的鹅群中流行.鹅副粘病毒病是以消化道病变为主要特征的具有...
- 高宏丽
- 关键词：鹅副粘病毒HN基因F基因克隆
- 文献传递
- 地高辛标记核酸探针检测鸭瘟病毒被引量：15
- 2004年
- 韩先杰王君伟布日额李慧昕高宏丽Ulrich Neuman
- 关键词：鸭瘟病毒增殖
- 应用PCR技术检测鹅细小病毒被引量：24
- 2003年
- 根据鹅细小病毒GPVH1株结构蛋白VP1与VP3编码基因非重叠核苷酸序列设计了一对引物GPR1 /GPR2 ,用这对引物对感染器官内的GPR和接种鹅胚增殖的GPV进行PCR扩增 ,其结果引物GRP1 /GPR2能特异性地扩增GPVVP1 VP3区段核苷酸序列 ,扩增出与设计核苷酸片段大小相符的 0 6kb的序列 ,而对照的鹅副粘病毒cDNA及鸭瘟病毒 (DPR)DNA对照组均出现阴性结果。
- 布日额王君伟吴金花邢明伟韩先杰高宏丽李洪涛刘兴华
- 关键词：PCR技术鹅细小病毒小鹅瘟
- PCR检测鸭瘟病毒的研究被引量：33
- 2003年
- 根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因序列 ,设计、合成了 1对引物 ,以 1株鸭瘟病毒疫苗株DNA为模板 ,进行PCR扩增 ,扩增出预期 5 6 3bp的目的DNA片段。将扩增出的DNA片段克隆到pMD18 T载体 ,经Amp/IPTG/X gal平板筛选 ,HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定 ,获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定 ,与参考序列比较 ,二者同源性为 99.3%。小鹅瘟病毒、鸭肝炎病毒、鹅副黏病毒PCR扩增均为阴性。用此方法检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织 (脑、肝、脾 ) ,均能检测到鸭瘟病毒DNA。PCR检测鸭瘟病毒具有高度的特异性、敏感性 。
- 韩先杰王君伟布日额李慧昕高宏丽
- 关键词：鸭瘟鸭瘟病毒PCR基因测序
- 鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测
- 1997年以来,在我国许多地区爆发了由鹅副粘病毒(Goose Paramyxovirus,GPMV)引起的烈性传染病,给养鹅业带来了严重的危害。鹅副粘病毒病又称鹅源新城疫,属于副粘病毒科,具有基因口型新城疫(NDV)的典...
- 杨玉菊王君伟杨志何海娟高宏丽于天飞
- 文献传递
- 禽流感病毒H9N2亚型分离株HA基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2004年
- 以禽流感病毒地方株A/chicken/Mudanjiang/ 0 82 3/ 2 0 0 0 (H9N2 )的总RNA为模板 ,用通用反转录引物和自行设计的一对特异性引物 ,采用RT PCR方法扩增了HA基因。测序及序列分析结果表明 :HA基因全长 1 70 7bp ,编码 560个氨基酸残基 ,与GenBank收录的H9N2亚型的核苷酸同源性最高达 99% ,最低为 87 2 3 % ;氨基酸同源性最大达 98 0 4 % ,最低为 88 57%。经HA裂解位点附近的氨基酸序列分析表明 ,CMJ/ 0
- 唐志芬贾永清王君伟孙进华管雪婷高宏丽
- 关键词：禽流感病毒HA基因克隆
- 海洋细菌9912生物制剂在蛋鸡饲养中的应用效果被引量：4
- 2003年
- 从渤海海泥中分离到一株海洋细菌9912,经系统的微生物学鉴定及16SrDNA序列测定,定名为地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis9912)。将该菌制成生物制剂,饲料中0.2%剂量添加,对11周龄蛋鸡进行35d喂养试验,结果表明:该菌株安全可靠,能使蛋鸡产蛋率提高2.02%,日只单产提高产蛋量1.44g,死淘率降低1.8%,料蛋比降低6.0%;地衣芽孢杆菌9912是一株在蛋鸡饲养中具有广泛应用前景的优良菌株。
- 薛德林魏建平胡江春高宏丽王书锦
- 关键词：海洋细菌生物制剂蛋鸡饲养地衣芽孢杆菌
- 鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测
- 鹅副粘病毒病又称鹅源新城疫,属于副粘病毒科,具有基因□型新城疫(NDV)的典型特征.本试验通过RT-PCR方法扩增了国内分离株JS/1/97/Go的NP基因,进行了克隆、序列测定和比较.构建了该分离株NP基因的原核表达载...
- 杨玉菊王君伟杨志何海娟高宏丽于天飞
- 关键词：鹅副粘病毒NP基因原核表达
- 文献传递
