高宏雷
- 作品数：232 被引量：559H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 鸡传染性贫血病毒VP2基因的表达及其免疫活性分析被引量：4
- 2006年
- 利用特异性引物从组织病料中提取的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到VP2基因,BamHⅠ和SalⅠ双酶切处理,纯化后,克隆至BamHⅠ和SalⅠ双酶切处理的表达载体pET-28a中,构建了原核表达质粒pET-28-VP2。将pET-28-VP2转化至感受态E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约31kDa的目的蛋白以可溶性形式表达于上清中。Western blot分析发现,表达产物与鸡传染性贫血的阳性血清发生特异性反应。纯化蛋白免疫小鼠后制得的多抗可以与全病毒发生反应,证明其具有免疫原性,为进一步研究VP2蛋白的功能及开展CIAV疫苗及诊断试剂的研制奠定了基础。
- 王晓艳王笑梅高玉龙高宏雷陆桂丽
- 关键词：鸡传染性贫血病毒VP2基因克隆
- 一株乳酸片球菌新菌株及其用途
- 本发明公开了一株乳酸片球菌新菌株及其用途。所述的乳酸片球菌新菌株，命名为HVRIC28-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏号是CGMCC No.9441，保藏日期为2014年7月11日。研...
- 崔红玉王笑梅高宏雷祁小乐张艳萍王永强
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP5缺失标记疫苗的生物学特性研究被引量：2
- 2014年
- 为评价鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5缺失病毒株rHLJ0504HT△VP5的生物学特性,本研究首先对该缺失病毒与其亲本病毒rHLJ0504HT(vvIBDV HLJ0504 253/284双位点突变细胞适应病毒)进行了体外复制动力学比较研究。结果表明,VP5缺失病毒复制滴度明显低于亲本病毒(p<0.05)。动物实验结果表明,该缺失病毒可以诱导机体产生良好的免疫应答反应,免疫后10 d,其抗体水平与亲本病毒相当;并能够抵抗同源或异源超强毒的攻击,为免疫鸡提供100%保护。此外,该缺失病毒对免疫鸡无明显的致病性;VP5缺失病毒免疫组与未免疫组禽流感血凝抑制效价相当,不存在明显差异(p>0.05),表明该病毒对免疫鸡无免疫抑制作用,不影响其它疫苗的免疫效果。而且,VP5的缺失可以作为鉴定该缺失病毒的生物学标记。以上结果表明,rHLJ0504HT△VP5是一株安全有效的IBDV标记候选疫苗株。
- 高立李凯祁小乐高玉龙高宏雷王永强孔宪刚王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒标记疫苗
- 鸡传染性法氏囊病病毒的反向遗传研究被引量：3
- 2006年
- 祁小乐王笑梅高宏雷高玉龙
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒免疫抑制性传染病超强毒株VIRUS变异株接触性
- 鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用
- 本发明公开了鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用。本发明克隆了流行超强毒株HLJ-0504的主要保护性抗原基因VP2，将其核苷酸进行突变修饰，然后将其替换IBDV弱毒株Gt基因组的相应区段，构建IBDV重组基因组的...
- 王笑梅祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷王永强高立
- 中国部分地区传染性法氏囊病病毒分子流病学调查被引量：15
- 2009年
- 为调查我国鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的流行情况,从我国11个省(市、自治区)采集法氏囊病料,分离鉴定鸡传染性法氏囊病病毒20株,运用RT-PCR方法对分离株的VP2基因进行扩增、测序和序列分析。研究表明,20株分离毒株中有19株具有IBDV超强毒株的分子特征,即222A、256I、294I和299S,与我国IBDV超强毒Gx株的核苷酸同源率在96.7%～99.4%,推导氨基酸同源率在98.2%～100%。遗传进化分析表明,所有分离毒株具有共同的祖先。
- 宇文延青高玉龙高宏雷祁小乐杨金雨王晓燕秦立廷林欢李俊山刘伟李铁强邓小芸王笑梅
- 关键词：分子流行病学超强毒株
- 抗鸡IBDV Gt株单克隆抗体制备及抗原表位初步分析
- 鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科(Birnaviridae), 禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组包括A、B两个节段...
- 程宇王笑梅高玉龙高宏雷付朝阳简子健
- 关键词：抗原表位
- 文献传递
- 犬细小病毒黑龙江流行株的分离鉴定及其VP2基因的遗传进化分析被引量：5
- 2022年
- 为了解黑龙江省犬细小病毒(CPV)的流行情况,本研究从黑龙江省哈尔滨市、双城市、鹤岗市和大庆市的宠物医院共收集了10份经胶体金拭子检测为CPV阳性的犬粪便样品,利用F81细胞进行病毒的分离,并对分离的病毒进行PCR、血凝性试验、病毒分型鉴定和VP2基因的遗传进化分析。结果显示,有8份处理后的病料样品接种猫肾细胞F81细胞后出现明显的CPE,其中有3株病毒的血凝(HA)效价可达1:512;经PCR鉴定结果表明分离出8株CPV,分别命名为CPV-CX-1(简写为CX-1)~CX-3、CX-5~CX-8、CX-10;病毒的分型鉴定结果显示,8个分离株中有1株为CPV-2b型、3株为CPV-2c型、4株为CPV-2a型;VP2基因的遗传进化分析结果显示,8株CPV分属于两大不同的分支,其中CX-2、CX-3株与CX-8株处于一大分支,亲缘关系较近,CX-1、CX-7株与CX-5、CX-6、CX-10株处于另一大分支,亲缘关系也较近。其中仅CX-8株与国内外分离株的亲缘关系相对较近,CX-1、CX-5、CX-6、CX-7、CX-10株均与CPV参考株亲缘关系较远。选取HA效价较高的4株CPV感染杂交幼犬进行动物回归试验,每天观察各犬的临床症状、测量体温并于攻毒后第7 d采肛门拭子,根据发病犬临床症状的严重程度确定迫杀各组犬的时间,并分别经PCR检测CPV在各组犬各脏器中的分布及粪便的排毒情况;根据动物回归试验结果,选取2株致病力较强的CX-3株和CX-5株感染犬的十二指肠和空肠组织病料样品,再次接种杂交幼犬,按照动物回归试验方法进行强毒鉴定试验。动物回归试验结果显示,4株CPV感染幼犬后,CX-3株和CX-5株感染的幼犬出现犬细小病毒病发病症状,且CPV在感染犬的心、肝脏、脾脏、肺脏、肠淋巴、十二指肠和空肠均能够复制且有通过粪便排毒的现象;强毒鉴定结果显示,接种CX-3、CX-5株的感染犬出现典型的CPV感染症状,表明这2株CPV为强毒。本研究为监测黑龙江地区CPV的遗传变异趋势及�
- 高艳张峣都兴洋蒋烈戈涂亚斌涂亚斌韩雪高宏雷
- 关键词：犬细小病毒遗传进化分析
- 表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用，属于医学或兽医学技术领域。本发明利用重组克隆技术，将包含传染性法氏囊病毒VP2基因和CAG启动子序列的基因片段CAG-VP2插...
- 王笑梅李凯刘长军张艳萍崔红玉祁小乐高立高玉龙王永强高宏雷
- 文献传递
- 鸡传染性贫血病毒重组抗原间接ELISA诊断方法的建立
- 本研究在国内首次应用重组抗原,成功建立了检测鸡传染性贫血病毒血清抗体的间接ELISA诊断方法.确定抗原最适包被浓度为5μg/mL,血清最适稀释度为1:100,其作用时间为60min,酶标抗体最适作用时间的60min,S/...
- 王英王笑梅高宏雷付朝阳包晓玮王晓艳
- 关键词：鸡传染性贫血病毒间接ELISA血清抗体流行病学血清学诊断
- 文献传递
