魏芳
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
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- 小麦中一个ADF基因克隆与表达分析被引量：7
- 2011年
- 肌动蛋白在植物防御真菌侵染过程有重要作用,有众多基因调节肌动蛋白表达变化,肌动蛋白解聚因子(Actin-depolymerizing factor,ADF)是其中一个重要调节因子。利用同源序列设计引物进行PCR扩增后,通过电子克隆技术得到一个新的TaADFcDNA全长,在小麦望水白和Alondra两个品种中分别得到一个827bp和818bp的核苷酸序列,开放阅读框均为145aa,预测编码蛋白大小为13.14kD。编码氨基酸的保守性分析发现均有4个保守位点,分别为磷酸化位点(phosphorylation site)、肌动蛋白结合位点(actin binding site)、核定位信号(nuclear location signal)和F-Actin结合位点(F-Actin binding site)。将此基因与其他几个物种的ADF蛋白保守性和亲缘关系进行分析表明,该基因氨基酸序列非常保守,与水稻等作物亲缘关系密切。经过Real-Time PCR分析其在小麦各个组织的表达,叶中表达量最高,根中表达量最低。利用禾谷镰刀菌侵染后分析在抗赤霉病病品种望水白和感病品种Alondra中穗部的表达发现,两者ADF在72h内均上调表达。
- 魏芳马鸿翔
- 关键词：肌动蛋白解聚因子小麦禾谷镰刀菌REAL-TIMEPCR
- 一种小麦成熟胚培养及再生的方法
- 本发明涉及一种小麦成熟胚培养及再生的方法，其再生培养基以MS基本培养基为基础，再生培养基中麦芽糖为40g/L，MES为1.95g/L，KT为5mg/L，NAA为0.1mg/L，pH＝5.8；具体方法为：挑选成熟饱满的小麦...
- 蒋苏马鸿翔张旭余桂红孙晓波魏芳
- 一种小麦成熟胚培养及再生的方法
- 本发明涉及一种小麦成熟胚培养及再生的方法，其再生培养基以MS基本培养基为基础，再生培养基中麦芽糖为40g/L，MES为1.95g/L，KT为5mg/L，NAA为0.1mg/L，pH＝5.8；具体方法为：挑选成熟饱满的小麦...
- 蒋苏马鸿翔张旭余桂红孙晓波魏芳
- 文献传递
- 小麦抗赤霉病品种NBS同源序列克隆与分析被引量：4
- 2012年
- 根据二穗短柄草NBS-LRR类基因的保守序列设计同源引物,以小麦抗赤霉病品种苏麦3号、宁7840和望水白基因组DNA为模板,通过PCR扩增,得到43条序列,其中4条为非编码序列或结构域不完整;39条与植物抗病基因同源,其中的7条内部存在终止密码子,可能是假基因,经过比对分析,其余32条具有连续的开放阅读框和保守结构域,推导的氨基酸序列均具有Kinase-1a、Kinase-2和Kinase-3a及GLPL区等几个保守区,在GenBank中均能找到与之高度同源的其他物种的核酸序列,并且Kinase-2的最后一个氨基酸均为色氨酸(W),属于non-TIR类NBS基因。32条序列可分为4大类,它们之间核苷酸同源性为64%-98%,编码氨基酸同源性为22%-98%。根据序列分析随机设计5对不同基因特异性引物,并利用RT-PCR技术进行表达分析,结果表明,7-1、s-3、s-4和w-2均能表达,说明这些片段可能是功能性抗病基因的部分序列;7-13不表达,再次证明属于假基因。32条序列在之前未被报道过,这些RGA可以作为筛选赤霉病功能性抗病基因的候选序列。
- 魏芳马鸿翔
- 关键词：NBS-LRR抗病基因同源序列小麦赤霉病
- NAA或潮霉素对小麦成熟胚愈伤组织分化的影响被引量：9
- 2012年
- 以5个栽培小麦品种诱导而来的成熟胚愈伤组织为外植体,研究了在分化培养基中加入NAA对小麦成熟胚愈伤组织分化的效果以及潮霉素浓度对不同阶段成熟胚愈伤组织分化的影响。研究结果表明,在对照的分化培养基中(含5mg/L激动素)加入0.1mg/L萘乙酸(NAA,1-naphthlcetic acid)形成的分化培养基,可显著提高4个供试小麦基因型的成熟胚愈伤组织的分化率,提高幅度达到12%～32%。不同的潮霉素浓度在"花培1号"愈伤组织的诱导阶段进行抗性筛选的结果表明,即使是在潮霉素浓度达到250mg/L时,仍有24%左右的愈伤组织存活率,这些存活的愈伤组织仍可能分化形成绿点甚至分化成苗,说明在"花培1号"愈伤组织的诱导阶段进行潮霉素抗性筛选是不适合的。5个不同小麦品种分化阶段进行潮霉素筛选具有明显的效果,但不同品种之间存在一定差异,其中:宁麦13的适宜潮霉素浓度为20mg/L,花培1号和扬麦158的适宜潮霉素浓度约为30mg/L,宁麦9和宁麦16的适宜潮霉素浓度在30～40mg/L左右。因此,我们认为,在分化阶段进行潮霉素抗性筛选是理想的筛选时期,在分化培养基中添加20～40mg/L浓度的潮霉素即可完全抑制小麦成熟胚愈伤组织的分化。本研究结果将有助于改进和完善普通小麦成熟胚遗传转化体系。
- 蒋苏马鸿翔魏芳余桂红
- 关键词：成熟胚愈伤组织潮霉素抗性
- 小麦抗赤霉病品种宁7840中抗病基因TaLRG的cDNA克隆和特性分析
- 2011年
- 为探索小麦NBS-LRR类抗病基因的克隆方法、功能及作用机制,从小麦抗赤霉病品种宁7840中通过RT-PCR和RACE技术(末端快速扩增技术)得到一个新的NBS-LRR类抗病基因同源序列,命名为TaLRG,开放阅读框3 063 bp,编码1 021个氨基酸,具有NBS保守结构域和多个亮氨酸重复序列。聚类分析发现其编码蛋白质与水稻Pib在同一进化枝上。结构分析表明其编码蛋白质序列有4个疏水结构域,二级结构以卷曲和螺旋为主。用禾谷镰刀菌处理小麦赤霉病抗病和感病品种穗部后,利用RT-PCR进行半定量表达分析,发现该基因在病原菌侵染后上调表达显著,但在抗、感品种之间差别不显著。
- 魏芳马鸿翔
- 关键词：小麦
