黄世思
- 作品数：8 被引量：22H指数：2
- 供职机构：清华大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“985工程”清华-裕元医学科学研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- ATF5与TCF4相互作用及其对Wnt信号通路的调控被引量：4
- 2003年
- 应用酵母双杂交技术, 鉴定Wnt通路关键信号分子TCF4与cAMP效应元件结合蛋白家族新成员-- 激活转录因子5(ATF5)之间的相互作用, 酵母表型分析和β-半乳糖苷酶(β-gal)活性测定结果发现, 两者的作用位于ATF5蛋白C端含有碱性亮氨酸拉链(bZIP)区域(162～ 282 aa). 通过受TCF启动的荧光酶报告系统分析ATF5对Wnt信号通路的影响, 结果显示ATF5蛋白C端能进一步加强TCF4对Wnt通路的激活效应. 由此提示, ATF5可能是Wnt通路下游信号的辅助激活因子(co-activator), 它能协同β-连环蛋白/TCF4参与Wnt信号通路的激活.
- 叶雄俊张志文张新军林桂亭熊世勤金桂花韩亮黄世思陈培拉艾军魁辛殿祺郭应禄常智杰
- 关键词：TCF4WNT信号通路蛋白质相互作用基因调控激活转录因子
- GABARAP克隆表达及其抗体的制备与应用被引量：2
- 2008年
- GABARAP(GABA_A-receptor-associated protein)是最新发现的与GABA_A受体γ2亚基胞内区有相互作用的蛋白,目前的研究结果表明它可能是通过与微管相互作用辅助GABA_A受体向细胞膜上运输并使受体在膜上聚集。本文中用PCR方法扩增出编码人GABARAP(hGABARAP)的cDNA片段,然后分别克隆到真核表达载体pcDNA6/HA和谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX4T2中。将后者导入大肠杆菌BL21中,经过IPTG诱导后用谷胱甘肽偶联的Sep- harose-4B柱子纯化出融合蛋白GST-hGABARAP。以此蛋白作为抗原免疫家兔制备抗GABARAP的抗血清,并用GST- hGABARAP耦联的NHS-activated Sepharose4柱子纯化抗体。纯化的抗体可以用于真核细胞中过量表达hGABARAP的Western和免疫染色检测。结果表明,过量表达的hGABARAP在真核细胞核和细胞质中都有表达,部分集中于核周区域。
- 李雪旎韩亮王芳黄世思张慧常智杰
- 关键词：GST融合蛋白抗体
- 从小鼠11.5d胚胎cDNA文库中筛选Dishevelled2相互作用蛋白
- 2004年
- Dishevelled (Dvl)是个多功能、进化上非常保守的蛋白 ,在Wnt信号传导通路中起着重要的作用。为了研究Dishevelled介导Wnt信号传递的分子机制 ,利用GAL4酵母双杂交系统筛选了小鼠 1 1 5d胚胎cDNA文库 ,发现了1 5个可与小鼠Dvl2DEP结构域和羧基端相互作用的蛋白质。将阳性文库质粒测序并对测序结果做BLAST分析 ,发现其中一个阳性克隆是编码Gli3蛋白氨基端 (6 1 2 2aa)的cDNA片段 。
- 黄世思翟永功韩亮张新军王银银常智杰
- 关键词：胚胎CDNA文库WNT信号通路发育酵母双杂交
- 新蛋白DDIP与Dvl2的相互作用及其对Wnt信号通路的调控
- 黄世思
- 关键词：Β-连环蛋白
- 激活转录因子5在肾癌细胞系中的表达及意义被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨新基因激活转录因子 5 (ATF5 )在不同肾癌细胞系中的表达及意义。 方法 采用RT PCR及Northernblot方法检测ATF5基因在肾癌细胞系A498、786 O、GRC I和胚肾细胞系2 93及正常肾小管上皮细胞系HK 2中的表达 ,计算机辅助图像分析结果。 结果 RT PCR检测ATF5在肾癌细胞系A498、786 O、GRC I和胚肾细胞系 2 93中呈强表达 ,其灰度面积吸光度A值分别为35 195 .2± 2 8.2、35 70 9.3± 18.3、370 38.5± 2 4.2、33 318.8± 34.2 ,而在正常肾小管上皮细胞系HK 2中表达较弱 ,灰度面积吸光度A值为 2 42 3.6± 3 .3,肾颗粒细胞癌细胞系GRC I中的表达是HK 2的 15倍 ,两者差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。Northernblot检测ATF5在不同肾癌细胞系的表达结果与RT PCR方法检测结果一致。 结论 ATF5在肾癌发生和发展中具有一定作用 ,其致病机理可能与协同Wnt信号通路相关。
- 叶雄俊张志文林桂亭金桂花陈培拉韩亮黄世思艾军魁辛殿祺郭应禄常智杰
- 关键词：肾癌基因癌细胞系
- 黑色素瘤相关抗原MAAT1p15与LRP6的相互作用及其对Wnt信号通路的调控被引量：14
- 2004年
- 为了深入研究Wnt信号的传导机制 ,利用GAL4酵母双杂交系统 ,以Wnt受体LRP6的胞内区为诱饵蛋白 ,筛选小鼠 11 5d胚胎cDNA文库 ,发现了一个新的LRP6相互作用蛋白 :黑色素瘤相关抗原MAAT1p15 (melanoma associatedantigenrecognizedbycytotoxicTlymphocytesp15 ) .免疫共沉淀方法证明了LRP6胞内区和MAAT1p15在哺乳动物细胞中也存在相互作用 .荧光素酶报告系统分析实验显示 ,MAAT1p15能够明显增强Wnt1和LRP6响应的下游基因的转录活性 。
- 韩亮张新军黄世思翟永功常智杰
- 关键词：WNTP15酵母双杂交免疫共沉淀
- 新蛋白DDIP及其编码基因与应用
- 本发明公开了新蛋白DDIP及其编码基因与应用，本发明所提供的新蛋白名称为DDIP(Dishevelled2 DEP domain Interacting Protein)，它是序列表中SEQ ID No.2的氨基酸残基序...
- 黄世思韩亮张新军王芳张慧翟永功常智杰
- 文献传递
- 黑色素瘤相关抗原MAAT1p15的功能与应用
- 本发明公开了黑色素瘤相关抗原MAAT1p15(melanoma－associated antigen recogmzed by cyto toxic T lymphocytes p15)的功能，它是序列表中SEQ ID ...
- 韩亮黄世思张新军王芳张慧翟永功常智杰
- 文献传递
