齐岩梅
- 作品数：29 被引量：23H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 持续活化和主导抑制Rac1对胚胎干细胞分化为成血管细胞的调控作用
- 小G蛋白Rac1作为细胞内信号传导的开关分子在血管发育早期对血管细胞分化的调控作用尚不清楚。为探讨Racl在胚胎发育早期血管形成中的调控作用,采用胚胎干细胞（ESCs）分化形成血管内皮和平滑肌细胞模型,建立稳定表达持续活...
- 韩雅玲张剑康建闫承慧张效林齐岩梅李少华
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- 神经生长因子对小鼠主动脉环血管新生及人脐静脉内皮细胞凋亡的影响
- 研究背景：血管新生(从已存在的血管形成新的血管)与许多生理过程和病理变化密切相关，并受到内皮细胞(endothelial eell，EC)迁移、增殖、蛋白水解及细胞分化促进因子和抑制因子的共同调控。最近研究显示，神经营养...
- 齐岩梅
- 关键词：神经生长因子血管新生内皮细胞细胞凋亡动物模型主动脉环
- 文献传递
- 抑制Racl蛋白活化阻碍胚胎发育早期血管新生
- 目的探讨血管发育早期Racl在成血管细胞起源及其血管形成过程中的调控作用。方法本研究采用胚胎干细胞(ESCs)为模型,建立稳定表达持续活化型Racl(G12V)和主导抑制型Racl(T17N)编码序列的小鼠ESCs并制备...
- 张剑韩雅玲康建张效林齐岩梅闫承慧
- 文献传递
- 神经生长因子对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响及TrkA的关键作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨神经生长因子(NGF)对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响。方法①将小鼠主动脉环在三维基质胶中以含不同浓度的NGF的无血清培养基培养不同天数后,对出芽的细胞进行免疫荧光染色细胞学鉴定,或在倒置显微镜下观察、摄像,并以ImagePro图像分析软件计算每高倍视野中平均出芽的面积。②向培养基中预先加入抗NGF的中和抗体或血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)拮抗剂SU5416,观察NGF或VEGF对出芽性血管新生的影响。③向培养基中预先加入酪氨酸受体激酶A(TrkA)受体拮抗剂K252a,观察NGF是否可通过TrkA受体促血管新生。结果①外源性NGF呈浓度依赖性促进基质胶中培养的小鼠主动脉环出芽。出芽的细胞上CD31的表达阳性。抗NGF的中和抗体能明显阻断NGF诱导的出芽性血管的新生。②SU5416可显著减少VEGF诱导的血管新生;但对NGF诱导的血管新生无明显影响。③K252a可明显抑制NGF诱导的血管新生。结论NGF可通过TrkA受体促进小鼠主动脉环血管新生,为促血管新生治疗方案的选择提供了新的思路。
- 齐岩梅韩雅玲康建李娜田孝祥闫承慧
- 关键词：神经生长因子主动脉环血管新生小鼠
- 小鼠胚胎背主动脉发育过程中内皮和平滑肌标志物表达时相及其变化
- 2007年
- 目的:观察小鼠胚胎发育过程中背主动脉胎肝激酶1、α-平滑肌肌动蛋白的表达时相,初步探讨背主动脉内皮和平滑肌细胞的形成及其可能起源。方法:实验于2006-01/2007-01在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科完成。①实验材料:昆明种小白鼠50只,体质量20～22g,其中雌鼠30只。②实验方法:将雌鼠分别放入公鼠笼内过夜、交配,从怀孕第8.5天开始获取胚胎,在雌鼠怀孕第8.5～18.5天,每一时间点取10个小鼠胚胎。③实验评估:对胎鼠组织切片分别行苏木精-伊红染色,观察背主动脉形态学变化;免疫组织化学染色法观察内皮细胞标志物胎肝激酶1、CD31、Ⅷ因子相关抗原,α-平滑肌肌动蛋白表达变化及其相互关系。结果:①胚胎8.5～9.5d胎鼠背主动脉由单层细胞构成,呈胎肝激酶1、CD31阳性,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅷ因子相关抗原阴性。②胚胎10.5d胎鼠背主动脉仍为单层细胞,但胎肝激酶1、CD31、Ⅷ因子相关抗原、α-平滑肌肌动蛋白均呈阳性。③胚胎11.5d背主动脉管壁发育为多层,内层细胞呈胎肝激酶1阳性、α-平滑肌肌动蛋白阴性,外层细胞呈胎肝激酶1阴性而α-平滑肌肌动蛋白阳性,血管与周围间充质无明显分界,背主动脉管壁周围可见散在α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞。④11.5d之后,背主动脉管壁平滑肌细胞数量增多且由不规则型转变为纺锤型,内层内皮细胞继续呈胎肝激酶1阳性、α-平滑肌肌动蛋白阴性,外层平滑肌细胞胎肝激酶1阴性、α-平滑肌肌动蛋白阳性,血管与周围间充质分界清楚,背主动脉血管周围无散在α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞。结论:胚胎背主动脉的平滑肌细胞可能最早起源于胎肝激酶1、CD31阳性细胞,后期可能来源于周围间充质细胞的募集分化。
- 韩雅玲李颖佳齐岩梅康建闫承慧
- 关键词：血管平滑肌胚胎Α-平滑肌肌动蛋白
- 胚胎干细胞来源的拟胚体分化早期血管平滑肌标志物的表达时相
- 2008年
- 目的:研究胚胎血管发育早期SMα-actin、SM22α、myocardin、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)的表达规律,并初步探讨在此阶段血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)对血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的影响。方法:采用转染平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下表达增强型绿色荧光蛋白(GFP)报告基因载体的胚胎干细胞制备拟胚体(EBs),用免疫荧光染色、RT-PCR、Western blot分析SMα-actin、SM22α、myocardin、SMMHC的表达时相;然后分别用0μmol/L(对照组)、10μmol/L、50μmol/L AG1296(血小板源性生长因子受体抑制剂)处理EBs,观察三组SMα-actin、SM22α、myocardin、SMMHC在基因及蛋白水平上的表达变化。结果:胚胎血管发育早期SMα-actin、myocardin、SM22α、SMMHC分别在EBs第0(胚胎干细胞)、8、11、13d开始有表达。AG1296三种浓度处理后SMα-actin、myocardin、SM22α、SMMHC蛋白表达及myocardin、SM22α和SMMHC mRNA表达均无明显差异。结论:EBs发育过程中存在着自发的VSMCs分化,SMα-actin表达最早,依次为myocardin、SM22α、SMMHC;PDGF-BB对EBs分化早期VSMCs标志物表达的调控可能不是必要的。
- 韩雅玲肖艳平齐岩梅康建闫承慧
- 关键词：胚胎干细胞分化血小板源性生长因子-BB
- 小鼠胚胎背主动脉平滑肌细胞起源的在体研究
- 目的探讨小鼠胚胎发育过程中背主动脉平滑肌细胞的起源。方法对8.5～18.5 d胎鼠组织切片分别行苏木素-伊红染色,观察背主动脉形态学变化;采用免疫组织化学染色法观察内皮细胞标志物血管内皮生长因子受体-2（Flk-1）、平...
- 李颖佳韩雅玲齐岩梅康建闫承慧
- 文献传递
- 胚胎血管发育早期PDGF-BB对血管平滑肌细胞趋化的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:建立胚胎血管发育早期血管平滑肌细胞(VSMCs)趋化模型,并观察胚胎血管发育早期血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)对VSMCs趋化的影响。方法:采用转染平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下表达增强型绿色荧光蛋白(GFP)报告基因载体的胚胎干细胞制备拟胚体,然后接种于under-agarose凝胶作为平滑肌细胞趋化模型。用慢速视频显微摄像技术观察拟胚体分化后表达GFP的VSMCs,分析比较不同浓度PDGF-BB对VSMCs分化和移行的影响。结果:在under-agarose凝胶中,拟胚体在无外源性生长因子存在的条件下可自发向心肌细胞、内皮细胞和VSMCs分化。拟胚体贴壁分化20 d时,对照组及4种浓度PDGF-BB(5μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L)组VSMCs的平均迁移速率分别为(94.07±23.80)μm/h、(118.08±31.63)μm/h、(173.53±24.58)μm/h、(380.74±39.56)μm/h和(335.62±32.16)μm/h,峰值浓度为20μg/L。经浓度大于10μg/LPDGF-BB处理后,VSMCs向PDGF-BB孔方向移行,对照组、低浓度PDGF-BB组VSMCs呈不规则性迁移。结论:该模型能够模拟胚胎血管发育早期全过程,可用于研究不同生长因子对VSMCs趋化的影响。外源性PDGF-BB能定向诱导胚胎血管发育早期VSMCs迁移,其定向趋化作用在一定浓度范围内呈量效关系。
- 韩雅玲肖艳平齐岩梅康建徐凯闫承慧
- 关键词：血管趋化作用血小板源性生长因子
- 神经生长因子通过诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞凋亡促进管腔样结构形成
- 目的最近证据显示,在血管新生过程中内皮细胞凋亡导致管腔形成,但其生物学机制尚不清楚。最近研究发现神经生长因子（nerve growth factor,NGF）在体内及体外具有促血管新生作用。然而NGF是否促进管腔形成尚不...
- 韩雅玲齐岩梅康建李娜田孝祥闫承慧
- 文献传递
- 小鼠胚胎干细胞来源平滑肌细胞的鉴定及其功能分析
- 2009年
- 背景:胚胎干细胞来源的平滑肌细胞是血管组织工程潜在的细胞来源之一,但这些细胞是否具有成熟平滑肌细胞的表型和功能仍不清楚。目的:对小鼠胚胎干细胞分化的平滑肌细胞进行表型鉴定及功能分析。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-05/2008-12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。材料:清洁级孕12.5d昆明小鼠1只用于制备饲养层细胞,SD大鼠1只用于制备主动脉平滑肌细胞。小鼠胚胎干细胞系R1、小鼠微血管内皮细胞系由美国ATCC公司提供,转染pSPIE载体的胚胎干细胞R1由本实验室制备。方法:①诱导分化及筛选:用转染pSPIE载体的胚胎干细胞R1制备拟胚体,拟胚体悬浮培养5d后贴壁培养1d,第7天加入全反维甲酸诱导分化4d,第11天用10mg/L嘌呤霉素对诱导分化后的细胞筛选2d。②表型鉴定:对筛选到的平滑肌细胞进行SMα-actin、SM22α、SM-MHC免疫荧光染色,以大鼠原代主动脉平滑肌细胞、未经筛选的第10天分化细胞作为对照,进行WesternBlot分析。③收缩功能:10-5mol/L卡巴可处理筛选到的平滑肌细胞30min。④体外成血管功能:将等量的内皮细胞和筛选到的平滑肌细胞混合,在Matrigel上培养。主要观察指标:平滑肌细胞标志物的表达,平滑肌细胞的收缩,平滑肌细胞向内皮管腔样结构的募集。结果:分化的平滑肌细胞主要分布于贴壁生长的拟胚体的外周部位,胚胎干细胞来源的平滑肌细胞3种标志物SMα-actin、SM22α、SM-MHC免疫荧光染色均呈阳性表达,WesternBlot结果显示其SMα-actin、SM22α表达水平与大鼠原代主动脉平滑肌细胞相似,高于未经筛选的第10天分化细胞。筛选到的平滑肌细胞在10-5mol/L卡巴可刺激下出现明显收缩,且能够募集到内皮管腔样结构周围。结论:小鼠胚胎干细胞来源的平滑肌细胞具有与成熟平滑肌细胞相似的表型和功能。
- 田孝祥韩雅玲康建闫承慧齐岩梅李娜陶杰吴光哲
- 关键词：胚胎干细胞拟胚体平滑肌细胞
