付宇姣
- 作品数:8 被引量:6H指数:2
- 供职机构:南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 登革Ⅱ型病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的第一,二结构域(DⅠ/Ⅱ)并进行免疫反应性鉴定。方法登革Ⅱ型病毒接种乳鼠,提取总RNA,经RT-PCR扩增目的基因片段。双酶切PCR纯化产物和质粒pET-28a(+)并连接构建重组质粒pET28a-DV2-E-D1&2。筛选阳性菌落,提取质粒并转化感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白并进行SDS-PAGE分析,Western blot鉴定。结果 RT-PCR扩增得到约900bp的目的基因片段,双酶切及测序分析表明,插入序列正确且开放读码框正确。重组菌诱导后在37kD位置有明显的诱导后表达带,其大小与预测值一致。经12%SDS-PAGE分析,显示重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中;Western blot结果显示重组蛋白与His.Tag单抗和登革病毒单抗(D1-11)均发生反应。结论成功地在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的DⅠ/Ⅱ,免疫反应性鉴定结果表明其具有良好的免疫反应性。
- 付宇姣郑学礼
- 关键词:登革病毒E蛋白免疫印迹
- 登革Ⅱ型病毒E蛋白第一,二结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定
- 背景与目的:登革热/登革出血热(DF/DHF)已成为热带地区最为重要的蚊-传播病毒性疾病。登革病毒是一个正意单链RNA病毒,属于黄病毒科,黄病毒属。登革病毒基因组RNA编码3个结构蛋白(C,E,pr M/M)和7个非结构...
- 付宇姣郑学礼
- 关键词:登革病毒E蛋白免疫印迹
- 文献传递
- BHK-21细胞连接登革Ⅱ型病毒两个受体蛋白分子初步鉴定
- 背景与目标:登革病毒(DENV)是全球最为流行虫媒病毒,通过持续感染伊蚊传播至人类。登革感染范围从自限性无症状或中等性疾病(登革热,DF)至一个严重性登革出血热(DHF),因循环衰竭,发展为登革休克综合征。感染传播依赖于...
- 付宇姣郑学礼
- 关键词:登革病毒BHK-21细胞受体分子
- 文献传递
- 蚊虫细胞表达登革病毒受体蛋白的研究进展被引量:2
- 2013年
- 登革病毒(DENV)是登革热病原体,它经一个感染蚊于摄取血餐期间将病毒传播至人类。登革感染是世界范围内的一个严重公共卫生问题。一个病毒连接至一个宿主细胞是感染过程关键性第一阶段,其过程所涉及细胞蛋白鉴定与机制大部分仍然未知。本文就蚊细胞表达登革病毒的连接分子研究概况进行综述。
- 郑学礼潘京付宇姣
- 关键词:登革病毒伊蚊受体
- 登革Ⅱ型病毒E蛋白第一,二结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定
- 背景与目的:登革热/登革出血热(DF/DHF)已成为热带地区最为重要的蚊-传播病毒性疾病。登革病毒是一个正意单链RNA病毒,属于黄病毒科,黄病毒属。登革病毒基因组RNA编码3个结构蛋白(C,E,prM/M)和7个非结构蛋...
- 付宇姣郑学礼
- 关键词:登革病毒E蛋白免疫印迹
- 文献传递
- 从白纹伊蚊与致倦库蚊分离和鉴定可结合登革Ⅱ病毒的蛋白分子被引量:2
- 2013年
- 目的筛选登革Ⅱ病毒(DENV-2)识别白纹伊蚊、致倦库蚊的连接分子。方法提取不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊的总蛋白,用SDS-12%PAGE进行分析,用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)筛选不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊表达连接DENV-2分子。结果 VOPBA检测不同发育时期白纹伊蚊显示:幼虫样品的泳道可见到25 000、35 000、50 000的DEN-2结合分子,蛹样品的泳道可见到35 000、50 000分子,雄蚊样品可见到50 000分子,雌蚊样品中可见到35 000、50 000分子。DEN-2结合蚊35 000分子在白纹伊蚊幼虫、蛹及成蚊的雌蚊的三个阶段均存在,而雄蚊的成蚊则缺少这一分子。VOPBA检测不同发育时期致倦库蚊:幼虫样品可见100 000分子,蛹样品可见40、100 000分子,另外在50 000位置上下亦可见48 000、60 000左右的多个条带,雄蚊与雌蚊样品均见40 000、100 000分子。结论 35 000大小的蛋白分子分布与白纹伊蚊感染组织向性相关。
- 付宇姣郑学礼潘京
- 关键词:白纹伊蚊致倦库蚊受体分子
- 登革Ⅱ型病毒E蛋白第一、二结构域的表达、鉴定及蚊虫组织中登革病毒受体分子的研究
- 登革病毒(DENV)是最常见的地理分布最广的,通过节肢动物(伊蚊)传播的虫媒病毒,属于黄病毒科黄病毒属,分布于全球100多个国家,特别是热带和亚热带地区。近十年来,登革热在全世界的发病率提高了近30倍。世界卫生组织估算,...
- 付宇姣
- 关键词:登革病毒E蛋白结构域BHK-21细胞
- 文献传递
- BHK-21细胞连接登革Ⅱ型病毒两个受体蛋白分子初步鉴定
- 背景与目的:登革病毒(DENV)是全球最为流行虫媒病毒,通过持续感染伊蚊传播至人类。登革感染范围从自限性无症状或中等性疾病(登革热,DF)至一个严重性登革出血热(DHF),因循环衰竭,发展为登革休克综合征。感染传播依赖于...
- 付宇姣郑学礼
- 关键词:登革病毒BHK-21细胞受体分子
- 文献传递