俞小凤
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制TIGAR表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子(TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR)表达后对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响及其可能的作用机制。方法:化学合成针对TIGAR基因的特异性siRNA片段(siRNA-TIGAR)和对照干扰片段(siRNAcontrol)。将siRNA-TIGAR或siRNA-control转染至A549细胞后,应用实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测细胞中TIGAR mRNA及蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit-8)法检测依托泊苷、5-氟尿嘧啶、顺铂、依托泊苷联合N-乙酰-L-半胱氨酸和H2O2作用后细胞的存活率,FCM法检测H2O2作用后细胞的凋亡率及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果:siRNA-TIGAR转染组A549细胞中TIGAR mRNA及蛋白的表达水平明显下降(P<0.01);依托泊苷、5-氟尿嘧啶和顺铂对siRNA-TIGAR转染组A549细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)明显降低(P<0.05);H2O2作用后,siRNA-TIGAR转染组A549细胞的存活率下降、凋亡率和细胞内ROS水平上升(P<0.05);依托泊苷联合N-乙酰-L-半胱氨酸作用后,siRNA-TIGAR转染组和siRNA-control转染组A549细胞对依托泊苷敏感性之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制TIGAR的表达可以增强A549细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能与细胞内ROS水平的改变有关。
- 张腾俞小凤苗萍赵小平黄钢刘建军
- 关键词：RNA干扰活性氧
- H_2O_2对肺腺癌A549细胞葡萄糖和谷氨酰胺代谢的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨H2O2对肺腺癌A549细胞中葡萄糖和谷氨酰胺代谢途径依赖性的改变及可能的作用机制。方法:用不同浓度的H2O2处理A549细胞后,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的存活率;荧光探针氯甲基-2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酯[5-(and-6)-chloromethyl-2’,7’-dichlorol uorescein diacetate,acetyl ester,CM-H2DCFDA]染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平;葡萄糖和乳酸测定试剂盒分别检测细胞中葡萄糖的摄取量和乳酸的产生量;CCK-8法检测葡萄糖代谢抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对A549及H2O2处理过的A549细胞增殖的影响及谷氨酰胺对A549及H2O2处理过的A549细胞增殖的影响。实时荧光定量-PCR检测葡萄糖代谢通路和谷氨酰胺代谢通路上相关基因mRNA表达的变化;蛋白质印迹法检测不同浓度H2O2处理后对A549细胞中异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase1,IDH1)和IDH2蛋白表达的影响。结果:低毒性浓度H2O2(50和100μmol/L)作用2 h后,A549细胞的存活率未受明显影响,但细胞ROS水平增高,葡萄糖消耗增加,乳酸生成增高;葡萄糖代谢抑制剂2-DG对H2O2预处理后的A549细胞的增殖具有抑制作用,低浓度谷氨酰胺对H2O2预处理后的A549细胞有上调生存率的作用。与葡萄糖代谢通路相关基因mRNA的表达被上调,与谷氨酰胺代谢通路相关基因mRNA表达被下调,IDH1和IDH2蛋白的表达水平被下调。结论:H2O2可上调A549细胞对葡萄糖代谢通路的依赖性,而下调对谷氨酰胺代谢通路的依赖性,其作用机制可能与IDH1和IDH2蛋白表达的下调有关。
- 俞小凤张腾黄辰张凡黄钢
- 关键词：肺肿瘤活性氧谷氨酰胺
- 全身PET/CT动态显像评估胰腺癌患者^(68)Ga-FAPI-04的动力学参数被引量：1
- 2022年
- 目的应用全身PET/CT动态显像评估胰腺癌患者中病变和正常器官^(68)Ga-成纤维细胞激活蛋白抑制剂(FAPI)-04的动力学参数。方法回顾性分析2020年12月至2021年12月在上海交通大学医学院附属仁济医院行^(68)Ga-FAPI-04全身PET/CT动态显像的胰腺癌患者(6例,男女各3例,中位年龄55.5岁)影像资料,勾画部分正常器官和病变(原发肿瘤、淋巴结转移和腹膜转移)的感兴趣体积,生成时间-活度曲线(TACs)。正常器官和病灶的TAC均采用二组织房室可逆模型(2TCM)进行拟合,获得包括K_(1)、k_(2)、k_(3)和k4在内的速率常数及总分布容积(V_(t)),并按组织类型进行比较。采用Wilcoxon秩和检验和Spearman秩相关分析数据。结果正常器官和胰腺癌病变的动力学参数存在明显差异(z值:2.00~1240.00,均P<0.05)。病变中原发肿瘤的K_(1)最高(0.30 min^(-1)),正常器官中脾的K_(1)最高(1.42 min^(-1));病变中腹膜转移的k_(2)最高(0.24 min^(-1)),正常器官中脾的k_(2)最高(2.59 min^(-1));病变中原发肿瘤的k_(3)最高(0.17 min^(-1)),正常器官中胰腺的k_(3)最高(0.16 min^(-1));病变中原发肿瘤的k4最高(0.03 min^(-1)),正常器官中心脏、肺、腮腺的k4较高(0.06 min^(-1))。与正常器官相比,病变中的V_(t)明显提高,其中原发肿瘤的V_(t)最高,为13.78 ml/cm^(3)。病变V_(t)与SUVmean、SUVmax均相关(r_(s)值:0.86和0.77,均P<0.001)。结论^(68)Ga-FAPI-04的速率常数K_(1)、k_(2)、k_(3)和k4及V_(t)在部分正常器官和病变中明显不同。
- 陈若华杨昕岚霍砚淼王一宁俞小凤Yee Ling Ng郑超杰赵海涛李梁华Yun Zhou黄钢刘建军
- 关键词：动态显像成纤维细胞激活蛋白胰腺癌患者原发肿瘤腹膜转移
