倪衡建 作品数:99 被引量:504 H指数:10 供职机构: 南通大学医学院 更多>> 发文基金: 江苏省高校自然科学研究项目 国家自然科学基金 南通市重大科技创新专项项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 哲学宗教 更多>>
额叶锐器损伤幼鼠神经细胞凋亡及Bax与Bcl-2蛋白的表达变化 2009年 目的探讨额叶锐器损伤后幼鼠神经细胞凋亡的变化规律及调控机制。方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)进行细胞凋亡检测,观察伤后幼鼠细胞凋亡变化;采用免疫组织化学染色方法观察其创伤区及周边的Bax及Bcl-2阳性细胞的表达变化。结果脑损伤1h后幼鼠创伤区及周边皮质即发现凋亡细胞,随伤程的推移,TUNEL阳性凋亡细胞数量逐渐增多,24h达到高峰,之后凋亡细胞数量逐渐下降,120h偶见少许凋亡细胞。创伤后1h幼鼠Bax阳性细胞的表达开始增高,12h达到高峰,之后逐渐下降,脑损伤后120h仅有少量表达。在伤后1h幼鼠Bcl-2的上调明显,Bcl-2阳性凋亡细胞数目达到高峰,随后Bcl-2的表达下调逐渐下降。脑损伤后120h仍见少部分表达。空白对照组及假手术组幼鼠额叶皮质中偶见Bax和Bcl-2阳性细胞表达;伤后Bax/Bcl-2比值上调,24h达到高峰,随后逐渐下降。结论幼鼠额叶锐器伤后存在细胞凋亡,凋亡细胞数量的变化与损伤后时程有关,Bax/Bcl-2比值是决定幼鼠细胞凋亡的重要因素。 陈杰 咸华 倪衡建关键词:额叶损伤 原位缺口末端标记法 BAX BCL-2 微量海人酸注入大鼠延髓网状背侧亚核诱导的Fos表达及其与NADPH-d的共存(英文) 2003年 目的 :研究大鼠网状背侧亚核的功能传出通路及该通路上NADPH d的分布。 方法 :将微量海人酸注入大鼠延髓网状背侧亚核 ,2h后灌注 ,脑片进行NADPH d组织化学和Fos免疫组化染色。 结果 :Fos阳性细胞主要分布于中缝背核 (DR)、中缝大核 (NRM )、蓝斑 (LC)、中脑导水管周围灰质腹外侧 (vlPAG)和下丘脑室旁核。Fos/NADPH d双标细胞主要分布于巨细胞网状核、下丘脑室旁核和中缝大核。 结论 :大鼠延髓网状背侧亚核与脊髓上中枢存在广泛的功能联系 ,而且在延髓网状背侧亚核的功能传出通路上有一氧化氮合酶的分布。 高永静 凌树才 倪衡建关键词:FOS NADPH-D 一氧化氮合酶 大鼠端脑内一氧化氮合酶阳性神经元的发育 被引量:2 2006年 目的研究大鼠胚胎时期及生后早期一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元在端脑的分布,探讨一氧化氮(NO)在脑发育过程中的作用。方法应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学方法观察孕14d起至生后14d大鼠端脑内NOS阳性神经元的形态和分布。结果孕14d没有观察到阳性神经元。孕15d纹状体腹外侧已有NOS阳性表达。孕17d在大脑皮质、梨状皮质观察到NOS阳性神经元,但胞体小,树突短,且分支少。随着年龄的增长神经元的胞体数目增多、染色增强或维持一定的水平。到孕20d,NOS阳性神经元分布广泛,梨状皮质、纹状体腹外侧及终纹床核均有大量NOS阳性神经元,其胞体明显增大,树突分支复杂化,长度增加。在生后,除上述脑区的阳性神经元进一步发育分化,大脑皮质和纹状体的NOS阳性纤维相互编织成疏密不等的纤维网外,在胼胝体、海马也观察到NOS阳性神经元。到生后14d,NOS阳性神经元的分布模式总体上已与成年大鼠相似。结论NOS阳性神经元在端脑独特的表达模式提示NO在脑发育和成熟过程中扮]重要角色。 马涛 凌树才 倪衡建关键词:端脑 发育 一氧化氮合酶 人贲门癌组织中增殖诱导配体及其受体mRNA水平的定量测定 2009年 目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)技术分析贲门癌组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体mRNA的表达水平。方法在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的准确含量,并以靶基因和内参β2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为109~101pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数分别为3.87%~10.12%和6.86%~12.29%。40例贲门癌组织样本的检测结果显示,贲门癌及癌旁组织中APRIL和B细胞成熟抗原(BCMA)的水平均显著高于远端正常组织(P<0.01),而穿膜蛋白活化物(TACI)的表达水平在3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;而且发现APRIL在贲门癌发生、发展过程中可能起了重要作用,有可能还参与了肿瘤细胞的转移,并主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。 何志贤 倪启超 陈杰 陈显亮 刘志坚 倪衡建关键词:贲门癌 光谱法 中药注射液不良反应系统评价的再评价 被引量:9 2012年 目的:再评价中药注射液不良反应的系统评价。方法:检索中国期刊全文数据库、维普中文科技期刊全文数据库、万方医药期刊全文数据库、PubMed、Web of Science和Elsevier。分别采用AMSTAR和PRISMA量表评价中药注射液不良反应系统评价的方法学和发表情况,并对不良反应进行定性描述。结果:共纳入12篇系统评价,涉及8种中药注射液。中药注射液不良反应系统评价的方法学和发表质量参差不齐。中药注射液不良反应涉及全身多个系统,严重者表现为过敏性休克。结论:需警惕中药注射液的严重不良反应并提高系统评价的研究质量。 耿劲松 董建成 倪衡建 卢末显 陈亚兰 蒋葵关键词:中药注射液 人参银杏复方制剂对缺氧复氧后大鼠海马CA1区Fos表达的影响 被引量:4 2004年 目的:观察人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧后不同时段Fos表达时程变化的影响,探讨人参银杏复方制剂抗缺氧复氧性脑损伤机制。方法:35只清洁级SD大鼠随机分为常氧对照组,缺氧复氧实验组和人参银杏复方制剂给药组。应用低压氧舱仿海拔8000m高空缺氧模型,采用Nissl染色、Fos免疫组化方法结合图像分析技术,观察预防性应用人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧0,24,72h不同时段海马CA1区锥体细胞层神经元形态及Fos免疫反应阳性神经元的影响。结果:全脑缺氧24h复氧72h后,海马CA1区锥体细胞层神经元数量锐减,Fos免疫反应阳性神经元数量在缺氧24h复氧0h时为(9.3±3.8)个,较常氧对照组(16.6±4.8)个减少,差异有显著性意义(P<0.05),复氧24h时显著减少甚至消失为(2.0±1.8)个,复氧72h为(13.7±5.1)个,时接近常氧对照组水平差异无显著性意义(P>0.05)。预防性应用人参银杏复方制剂后缺氧24h复氧72h时海马CA1区锥体细胞层神经元数量未见明显减少,在缺氧24h复氧0,24,72h时段CA1区Fos免疫反应阳性神经元数量分别较缺氧复氧实验组相应时段增加,以复氧0h时增加最为显著,为(39.0±5.8)个,与常氧对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:人参银杏复方制剂对缺氧复氧后海马CA1区神经元具有保护作用。 张志军 倪衡建 凌树才 董玉林 徐慧君 石中瑗关键词:FOS 药物治疗 大鼠第三脑室及中脑水管多巴胺能触液神经元的分布 被引量:1 2005年 目的 观察大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内多巴胺能触液神经元的分布情况。方法 应用 CB逆行追踪、TH免疫组织化学和CB/TH免疫荧光双重标记技术, 观察多巴胺能触液神经元在间脑及中脑内的分布情况。结果 TH免疫阳性触液神经元分布在第三脑室尾侧部和中脑水管全程的腹侧室管膜上及室管膜内, 其胞体呈倒置梨形、圆形或椭圆形、多角形和梭形; 在中缝背核内可见少量 CB/TH免疫荧光双重标记的远位触液神经元; 另在正中隆起部位 TH免疫阳性神经末梢含量丰富。结论 大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内存在多巴胺能触液神经元, 其在脑-脑脊液之间的信息传递中有着重要的作用。 倪衡建 张志军 何志贤 杨学峰 董玉林 吕广明 徐慧君关键词:触液神经元 酪氨酸羟化酶 免疫组织化学 大鼠脑内一氧化氮合酶阳性神经元的发育 <正> 用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH -d)组织化学方法观察孕13天起至生后14天这段时间大鼠脑内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的发育。结果显示:孕13天时没有观察到阳性神经元。孕14天在低位脑干已... 马涛 凌树才 倪衡建文献传递 Genistein对去卵巢后大鼠基底前脑神经元一氧化氮合酶表达及认知功能的影响 被引量:3 2006年 目的:观察去卵巢大鼠植物雌激素替代治疗后基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达和其认知功能在去卵巢后的时程变化。方法:实验于2004-07/2005-07在南通大学基础医学院人体解剖学教研室完成。3月龄雌性大鼠48只随机抽签法分为假手术组、去势组、Genistein替代组和雌激素替代组,每组12只。卵巢切除前,各组大鼠行避暗回避实验行为学检测。各组大鼠的处理:①去势组:切除双侧卵巢。②Genistein替代组:切除双侧卵巢后进行Genistein替代,剂量100μg(溶于200μLDMSO)。③雌激素替代组:切除双侧卵巢后进行雌激素替代,皮下注射苯甲酸雌二醇,剂量10μg(溶于100μL无菌芝麻油)。④假手术组:只切开双侧腰肌不触及卵巢,随即缝合伤口,相同条件下存活4周。药物注射隔日1次,时间固定,持续4周,分别于最后1次注射24h后进行灌注固定。各组大鼠在灌注前1周进行避暗回避实验。脑切片用NADPH-d组织化学方法染色,观察基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支脑区一氧化氮合酶阳性神经元的分布,并进行计数和统计分析。结果:实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①去势前各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);去势后行替代治疗1,2周后,各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);替代治疗4周后,Genistein替代组和雌激素替代组大鼠的探索次数比去势组明显减少,滞留时间比去势组明显延长(P<0.05)。②大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元染色为深蓝色,胞体边界清晰,突起明显,为双极或多极细胞。内侧隔核的一氧化氮合酶阳性细胞主要分布于中线两侧,呈倒“V”字形排列,体积较小,胞体多呈梭形,各组大鼠的神经元数目在术后各时间点的差异不明显。在斜角带核垂直支则呈“人”字形排列,胞体较内侧隔核大,多呈锥形或� 董玉林 张志军 胡燕 何志贤 郁晓燕 倪衡建关键词:卵巢切除术 雌激素替代疗法 植物雌激素类 一氧化氮合酶 Genistein对他莫昔芬预处理后多巴胺能神经元的保护作用 2009年 目的:观察他莫昔芬阻断雌激素受体后,genistein(GST)对多巴胺能神经元是否具有保护作用。方法:取孕14~16天SD大鼠胚胎中脑腹侧部,常规体外培养后分为4组:正常对照组、GST+MPP^+组、TAM+GST-4-MPP^+组和MPP^+组。用TH免疫细胞化学染色观察各组TH阳性神经元的生长状况。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力和代谢状态。用Western Blot观察各组bax蛋白的表达情况。结果:TAM+GST+MPP^+组与GST+MPP^+组相比,TH阳性神经元数量有所减少,突起长度变短,细胞活力差,bax蛋白的表达量增加,差异有统计学意义。同时MPP^+组与TAM+GST+MPP^+组相比,TH阳性神经元数量减少,突起长度短,细胞活力最差,bax蛋白的表达量最多,差异均有统计学意义。结论:TAM能部分下调GST对多巴胺能神经元的保护作用;GST除了通过ER途径发挥保护作用外,还可能经其他途径发挥保护作用。 杨学峰 沈国强 王念 何志贤 倪衡建关键词:他莫昔芬 多巴胺能神经元